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《細(xì)胞因子對(duì)牛體外受精胚胎細(xì)胞凋亡的影響-碩士論》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、分類號(hào)S823學(xué)校代碼10129UDC636學(xué)號(hào)08201009細(xì)胞因子對(duì)牛體外受精胚胎細(xì)胞凋亡的影響EffectofCytokinesonCellApoptosisofBovineInVitroFertilized(IVF)Embryos申請(qǐng)人：蘇米雅學(xué)科門類：農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)：動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向：動(dòng)物繁殖生物學(xué)與繁殖技術(shù)指導(dǎo)教師：張家新教授論文提交日期：二〇一一年五月0要本研究通過在牛卵母細(xì)胞成熟液和胚胎發(fā)育液中添加不同濃度的表皮生長(zhǎng)因子（EGF）和半胱胺（CYS），比較其對(duì)牛卵母細(xì)胞成熟和胚胎發(fā)育的影響，利用TUNEL檢測(cè)法，檢測(cè)了不同
2、處理?xiàng)l件下胚胎細(xì)胞的凋亡情況。為牛卵母細(xì)胞和胚胎體外發(fā)育的提高提供理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下：試驗(yàn)一，研究了牛體外受精胚胎在不同發(fā)育階段的細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果表明，對(duì)于牛體外受精胚胎，凋亡信號(hào)最早出現(xiàn)于16細(xì)胞期，隨著胚胎的發(fā)育，凋亡發(fā)生比率也增加。16細(xì)胞凋亡率為26%，桑葚胚凋亡率為83%，囊胚為97%,擴(kuò)展囊胚和孵化囊胚為100%。在囊胚階段，細(xì)胞凋亡指數(shù)也隨發(fā)育進(jìn)行呈現(xiàn)上升趨勢(shì)（囊胚凋亡指數(shù)為0.031，擴(kuò)展囊胚為0.066,孵化囊胚為0.105）。試驗(yàn)二，比較不同濃度EGF或CYS對(duì)牛卵母細(xì)胞成熟的影響。結(jié)果表明50ng/mlEGF顯著提高卵
3、母細(xì)胞的卵裂率。說明EGF對(duì)卵母細(xì)胞成熟有促進(jìn)作用。在成熟液中添加CYS對(duì)卵母細(xì)胞卵裂率和囊胚率沒有顯著影響，但50ng/ml濃度EGF和100uM濃度CYS處理組的囊胚凋亡指數(shù)都顯著低于對(duì)照組(0.057,0.058v.0.071)，說明成熟液添加適當(dāng)濃度EGF或CYS能夠顯著提高牛卵母細(xì)胞的質(zhì)量。試驗(yàn)三，比較了在牛胚胎發(fā)育液中添加不同濃度EGF或CYS的效果。結(jié)果表明EGF對(duì)牛胚胎體外發(fā)育沒有明顯影響。在胚胎發(fā)育液中添加100uMCYS可以明顯提高胚胎發(fā)育能力，囊胚率顯著高于對(duì)照組（36.5v.29.4,P<0.05），囊胚的凋亡指數(shù)顯著低于
4、其他組(0.058v.0.069,0.070,0.071,0.073,P<0.05)。說明CYS對(duì)牛胚胎體外發(fā)育有明顯促進(jìn)作用。試驗(yàn)四，比較了在牛卵母細(xì)胞成熟液和胚胎發(fā)育液中同時(shí)添加EGF或CYS的效果。結(jié)果表明，同時(shí)添加EGF或CYS對(duì)牛卵母細(xì)胞的成熟及胚胎的發(fā)育沒有產(chǎn)生疊加效應(yīng)。以上結(jié)果表明，（1）牛體外受精胚胎，凋亡信號(hào)最早出現(xiàn)于16細(xì)胞期，隨著胚胎的發(fā)育，凋亡發(fā)生比率也增加。（2）EGF和CYS可以促進(jìn)卵母細(xì)胞成熟。（3）EGF對(duì)牛胚胎體外發(fā)育沒有明顯影響。CYS可以提高牛胚胎體外發(fā)育能力。（4）在成熟液和發(fā)育液中同時(shí)添加EGF和CYS可
5、以提高牛卵母細(xì)胞成熟和胚胎的發(fā)育，但不產(chǎn)生疊加效應(yīng)。關(guān)鍵詞：牛；體外受精胚胎；細(xì)胞凋亡；細(xì)胞因子EffectofCytokinesonCellApoptosisofBovineInVitroFertilized(IVF)EmbryosAbstractInthisstudy,developmentofoocyteandembryoofbovinewereexaminedafterepidermalgrowthfactor(EGF)andcysteamine(CYS)weresupplementedininvitromaturationmediuma
6、ndembryoculturemedium,cellapoptosisofembryounderdifferenttreatmentconditionsweredetectedusingTUNELfluorescencemethod.Thepurposeofthisstudyistoimprovebovineoocytematurationandembryodevelopment.Theresultsareasfollows:Inexperimentone,cellapoptosisofbovineinvitrofertilizedembryoa
7、tdifferentdevelopmentalstagesweredetected.Theresultsshowedthatapoptosissignalfirstappearedinthe16-cellstage,andapoptosisrateswasincreasedwithembryodevelopment.Theapoptosisratewas26%in16-cellembryo,83%inmorula,97%inblastocystsand100%inexpandedblastocystsandhatchingblastocysts.
8、Inblastocystsstage,cellapoptosisindexwereincreasedwithembryodevelopm
