仙靈強(qiáng)骨口服液對(duì)去勢(shì)老齡大鼠骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防作用論文

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1、仙靈強(qiáng)骨口服液對(duì)去勢(shì)老齡大鼠骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防作用論文.freelg/kg進(jìn)行骨熒光標(biāo)記;給藥末日股動(dòng)脈放血,收集血液,分離出血清,測(cè)定ALP及StrACP;取出大鼠股骨及第四腰椎骨進(jìn)行骨密度、骨形態(tài)計(jì)量學(xué)、骨生物力學(xué)測(cè)定。結(jié)果仙靈強(qiáng)骨口服液能顯著降低血清StrACP水平,.freelenopausalsteoporosisinovariectomizedfemalerats.Method60femaleSprague-daonthizedandrandomlydividedinto5groups:ovariectomized(OVX),OVX+N

2、ylestriol,OVX+XLQGKFY(highdose,middledose,lo-operatedgroup.Ratselabelinginisteredtoallrats.Attheend-pointofstudy,theblood,thefourthlumarvertebra(LV4)andfemurbonesectionsorphometricanalyses,biomechanicalanalysesandBMPanalyses.ResultXLQGKFYdecreasedgreatlytheStrACPcontent,incre

3、asedbonestiffness,boneM-load,improvedbonebiomechanicalproperty.ConclusionXLQGKFYhasagoodpreventiveeffectonpostmenopausalosteoporosisenopausalosteoporosis;ovariectomy;rat本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定去卵巢老齡大鼠骨形態(tài)計(jì)量學(xué)、骨生物力學(xué)、骨密度以及血清堿性磷酸酶(ALP)、酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)水平等指標(biāo),觀察仙靈強(qiáng)骨口服液對(duì)骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防作用。1實(shí)驗(yàn)材料1.1動(dòng)物SD雌性大鼠60只

4、,7月齡,上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。1.2藥物仙靈強(qiáng)骨口服液,江蘇先聲藥物研究有限公司提供,批號(hào)021225;尼爾雌醇片(E3),上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)20020502。1.3試劑和儀器ALP試劑盒及StrACP試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所;DPX-IQ骨密度測(cè)量?jī)x(LUNAR公司產(chǎn)),應(yīng)用軟件SmallAnimalTotalBodyAcquisition;雙能X線(xiàn)骨密度儀(HOLOGIC4500A,美國(guó)),Smallanimalanalyze軟件;熒光顯微鏡(OLYMPUS-BHT);MPIAS-500彩色病理圖文分析

5、儀(同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)清平影像公司產(chǎn));AGS-10KNG(島津)萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī);HPScanjet5470c掃描儀;Image-ProPlus圖像處理系統(tǒng);721型分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠(chǎng)產(chǎn))。2實(shí)驗(yàn)方法2.1造模大鼠ip0.7%戊巴比妥鈉35mg/kg麻醉,俯位固定,在背部脊柱兩側(cè)切口,于無(wú)菌條件下假手術(shù)組不摘除卵巢,僅去除部分脂肪;造模大鼠則摘除雙側(cè)卵巢1。2.2分組及給藥大鼠在手術(shù)45d后隨機(jī)選取假手術(shù)組鼠及造模組鼠各10只,戊巴比妥鈉麻醉后進(jìn)行活體骨密度測(cè)量,統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,模型組大鼠骨密度明顯降低。將造模大鼠隨機(jī)分為5組,即模型組、陽(yáng)性

6、藥組及仙靈強(qiáng)骨口服液高、中、低3個(gè)劑量組。所有大鼠在手術(shù)3d后灌胃(ig)給藥:假手術(shù)組及模型組給予蒸餾水5mL/kg;陽(yáng)性藥組灌胃1.0mg/kg尼爾雌醇;給藥組分別給予1.5、3、6g/kg仙靈強(qiáng)骨口服液。除陽(yáng)性藥組大鼠隔天給藥外,其余大鼠均每天給藥,連續(xù)90d。所有大鼠給藥80、87d時(shí)2次ip四環(huán)素20mg/kg進(jìn)行骨熒光標(biāo)記。2.3觀察指標(biāo)和測(cè)定方法2.3.1血清指標(biāo)測(cè)定給藥末日股動(dòng)脈放血,收集血液,分離出血清,測(cè)定ALP及StrACP。2.3.2形態(tài)計(jì)量學(xué)的測(cè)定取出大鼠股骨及第四腰椎骨,分離周?chē)Y(jié)締組織后,將大鼠骨標(biāo)本置于70%酒精,

7、4℃固定7d,再分別置于80%、90%酒精及無(wú)水丙酮脫水2次,各1d。經(jīng)二甲苯透明2次(各24h)后,浸于3/7比例的甲基丙烯酸丁酯/甲酯16h,包埋、固化于3/7比例的半聚合的甲基丙烯酸丁酯/甲酯中(40℃約1周);用切骨機(jī)切7μm厚不脫鈣連續(xù)切片4張,分別進(jìn)行Gemisa、vonKossa染色;采用光鏡與熒光顯微鏡進(jìn)行病理組織學(xué)與骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)觀察。組織學(xué)觀察采用Gemisa染色、普通光源;類(lèi)骨質(zhì)觀察采用vonKossa染色;四環(huán)素標(biāo)記觀察用熒光顯微鏡。采用彩色病理圖文分析儀進(jìn)行測(cè)定和計(jì)算。2.3.3股骨骨密度測(cè)定雙能X線(xiàn)骨密度儀用標(biāo)模進(jìn)行

8、標(biāo)定。取股骨樣品置骨密度儀掃描臺(tái)上,測(cè)定骨影面積(EARE)、骨礦含量(BMC)和骨密度(BMD)。2.3.4大鼠股骨三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)將試樣

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