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《丹參藥材指紋圖譜建立方法研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、丹參藥材指紋圖譜建立方法研究崔同欣劉將紀(jì)亞楠（上海華源安徽錦輝制藥有限公司，安徽阜陽236018）摘要：在目前已知的丹參及其制劑成分檢測方法的基礎(chǔ)上，主要對丹參水溶性成分的指紋圖譜建立方法進(jìn)行了初步探究，通過試驗(yàn)建立了丹參藥材水溶性成分指紋圖譜檢測的試驗(yàn)條件和方法。.jyqkiltiorrhizaBge.的干燥根及根莖。秋季9—10月份采挖，除去泥沙，干燥。丹參藥材中有效成分主要分為兩類：一類為水溶性的酚酸類成分（丹參素、原兒茶醛和丹酚酸A、B、C等），另一類為脂溶性的二萜類成分（丹參酮I、丹參酮II和隱丹參酮等）。定性鑒別上述兩類成分或定量測定其某種或多種有效成分含量，已
2、成為評價(jià)丹參及其制劑質(zhì)量的重要方法[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，丹參制劑達(dá)100多種，而丹參制劑中主要有效成分為水溶性的酚酸類成分，考慮到原藥材的質(zhì)量控制與制劑質(zhì)量之間的相關(guān)性，我們主要對丹參藥材水溶性酚酸類成分進(jìn)行了指紋圖譜的研究，該類成分對紫外線具有較強(qiáng)的吸收值，可采用HPLC-UV法建立制劑指紋圖譜。1丹參指紋圖譜研究情況1.1脂溶性成分的指紋圖譜丹參脂溶性成分的指紋圖譜，一般將藥材經(jīng)處理提取后，以甲醇-水溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫。由于丹參藥材、對照品以及使用儀器等條件的不同，洗脫系統(tǒng)存在差異。徐德然[2]等以丹參酮ⅡA、隱丹參酮為對照進(jìn)行指紋圖譜研究。目前獲取指紋圖譜的主要方法有色譜
3、法、光譜法、X射線衍射法和分子生物技術(shù)等。其中，色譜技術(shù)是近年來分析化學(xué)領(lǐng)域中發(fā)展快、應(yīng)用廣的方法之一。常用的色譜技術(shù)包括薄層色譜、液相色譜、氣相色譜和毛細(xì)管電泳等[3]。其中，高效液相色譜是液相品，5%甲醇與0.1%乙酸-甲醇梯度洗脫，在254nm波長處檢測，用于不同產(chǎn)地丹參脂溶性成分指紋圖譜的比較研究。1.2水溶性成分的指紋圖譜近10年來，采用HPLC法分析技術(shù)對水溶性酚酸類化合物進(jìn)行指紋圖譜研究有顯著的優(yōu)勢。研究中一般采用C18柱，甲醇或乙腈同時(shí)加入酸抑制劑進(jìn)行線性梯度洗脫，分離效果較佳。周欣[4]等以丹參素鈉、原兒茶醛為對照品，乙腈-0.4%冰醋酸水溶液進(jìn)行梯度洗脫
4、，檢測波長254nm，建立了貴州銅仁地區(qū)丹參藥材的HPLC水溶性共有指紋圖譜；宋敏[5]采用甲醇-1.0%冰醋酸溶液梯度程序洗脫，以丹參對照藥材制備指紋對照品進(jìn)行了色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，并考察了梯度洗脫程序、流動(dòng)相酸度以及色譜柱填充劑對指紋圖譜重現(xiàn)性的影響。1.3有效成分的指紋圖譜研究隨著丹參指紋圖譜研究的深入，丹參有效成分（脂溶性和水溶性）指紋圖譜的研究也日益成熟。鑒于藥材的有效成分理化性質(zhì)差異較大，實(shí)際操作中，多采用水提、不同濃度甲醇提取等方法，以含酸抑制劑的乙腈或甲醇為流動(dòng)相，建立丹參有效部位指紋圖譜定性研究的分析方法。劉艷華[6]等采用水提法，以原兒茶醛為外標(biāo)，1%冰
5、醋酸和1%冰醋酸甲醇溶液梯度洗脫，檢測波長270nm，建立了河南靈寶地區(qū)丹參藥材的指紋圖譜；鄭曉珂[7]等以甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脫，流速0.8mL/min，檢測波長281nm，柱溫35℃，建立了丹參藥材的指紋圖譜；黎瓊紅[8]等采用甲醇為溶劑進(jìn)行索提后，以丹參酮ⅡA、原兒茶醛、丹參素鈉為對照品，0.02%磷酸乙腈-0.02%磷酸梯度洗脫，40℃柱溫，檢測波長280nm，建立了丹參藥材的高效液相指紋圖譜；劉洋[9]等采用水回流提取后甲醇超聲的方法，以丹參素、原兒茶醛、丹酚酸B、隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮ⅡA為對照品，用0.1%三氟乙酸水溶液-乙腈為流動(dòng)相梯度洗脫，檢測波
6、長270nm，柱溫30℃，在同一圖譜中同時(shí)建立起水溶性成分和脂溶性成分的指紋圖譜。1.4其他方法近些年來，隨著毛細(xì)管電泳（HPCE）、高速逆流色譜（HSCCC）及HPLC-MS聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，這些技術(shù)已經(jīng)被用于丹參指紋圖譜的研究。季一兵[10]等用毛細(xì)管電泳技術(shù)，采用50μm×50cm未涂漬毛細(xì)管柱，20mmol/L硼砂溶液作緩沖液，運(yùn)行電壓為15kV，檢測波長210nm，建立了丹參中藥材的HPCE指紋圖譜；顧銘[11]等采用HSCCC法，以正己烷-乙醇-水體系采用分步洗脫，建立了丹參藥材中脂溶性成分的HSCCC指紋圖譜；陳勇[12]等應(yīng)用電噴霧-質(zhì)譜（ESI-MS）技術(shù)研
7、究了原兒茶醛和丹參素的ESI-MS規(guī)律，并對丹參藥材中已知的18種水溶性成分中的5種進(jìn)行了質(zhì)譜檢測和電噴霧行為探討，初步制定了丹參藥材的水溶性成分的特征圖譜。此外，汪紅[13]等以丹酚酸B為指標(biāo)，以0.5%甲酸-乙腈為流動(dòng)相，檢測波長287nm，得到其LC-MS（n）特征圖譜，同時(shí)對圖譜中7種主要化合物進(jìn)行了精確歸屬，初步探討丹酚酸成分的ESI-MS（n）規(guī)律。徐曼[14]等還應(yīng)用對照品對照和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對丹參注射液中的主要成分進(jìn)行了定性分析，測定了18個(gè)不同廠家生產(chǎn)的丹參注射液的HPLC-UV指紋圖
