冬蟲夏草對小鼠淋巴細胞增殖和il2產(chǎn)生的作用論文

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1、冬蟲夏草對小鼠淋巴細胞增殖和IL2產(chǎn)生的作用論文【摘要】目的探討冬蟲夏草對小鼠淋巴細胞增殖反應和IL2的產(chǎn)生的免疫學作用。方法取小鼠24只，隨機分為對照組和實驗組，分別用生理鹽水和100%冬蟲夏草水浸出液定期給小鼠灌胃，然后檢測小鼠淋巴細胞增殖和IL2的產(chǎn)生。結果實驗組對以上兩項免疫學指標均有顯著增強作用，與對照組相比均有非常顯著性差異（P＜0.01）。結論冬蟲夏草可明顯增強機體免疫功能?！娟P鍵詞】冬蟲夏草淋巴細胞增殖白細胞介素2小鼠【Abstract】ObjectiveToresearchtheeffectofcordycepssinensissacc.（CSS)fromth

2、eviemunology.Methods24miceentalgroup)randomly.Filledthestomachesphocyteproliferationandinterleukin2production.Resultsparedphocyteproliferationandinterleukin2productionincreasedsignificantlyinexperimentalgroup(P＜0.01).ConclusionTheresultsindicatedthatCSScouldenhanceimmunefunctionobviously.【Key

3、phocyteproliferation,IL2，mouse冬蟲夏草，始載于《本草綱目拾遺》，因其冬季為蟲.freell水，浸泡2h，水煎2次，每次煮沸30min，合并水煎液，濃縮成200ml備用。RPMI1640為GIBO公司產(chǎn)品，LPL和ConA為美國Sigma產(chǎn)品，MTT為FLUKA公司產(chǎn)品，二甲基亞砜(DMSO)為蘇州化工研究所產(chǎn)。美國產(chǎn)全自動酶標儀（Multiskan)，CO2培養(yǎng)箱，由美國Former公司生產(chǎn)，低速冷凍離心機(Beckman,USA)，超凈工作臺由蘇州凈化設備廠生產(chǎn)，100目不銹鋼網(wǎng)，50ml離心管。1．2動物分組與給藥BALB/C小鼠24只，體重18

4、～22g，雌雄不限，購于北京醫(yī)科大學實驗動物中心。將動物隨機分為兩組，每組12只。Ⅰ組為生理鹽水對照組，Ⅱ組為冬蟲夏草實驗組。Ⅰ組用生理鹽水灌胃，0.5ml/（次·只），1次/天；Ⅱ組用冬蟲夏草液灌胃，0.5ml/（次·只），1次/天，共15次。1．3檢測指標及方法1．3．1淋巴細胞增殖反應［2］：無菌制備小鼠脾細胞懸液，用RPMI1640不完全培養(yǎng)液洗滌2次，每次1000r/min，離心10min，然后用完全培養(yǎng)液配成5×106/ml，取100μl加入96孔細胞培養(yǎng)板（每孔含5×106/ml個細胞），加入終濃度為5μg/ml的ConA，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后,每

5、孔加入10μlMTT溶液（5mg/ml），再繼續(xù)培養(yǎng)12h，然后加入DMSO100μl，充分震蕩后靜止20min，全自動酶標儀用560nm波長進行比色分析。1.3.2IL2的誘生：取上述已制備的脾細胞懸液5×106/ml，放入培養(yǎng)瓶，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)40h，離心收集上清液，置-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。制備活化的脾淋巴細胞?，4］：按上法無菌取正常BALB/C小鼠脾臟，制成5×106/ml細胞懸液，加入ConA使其終濃度為5μg/ml，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，收集細胞，離心洗滌2次，用完全RPMI1640配成5×105/ml細胞懸液，作為檢測IL2的反

6、應細胞。1．3．3IL2活性檢測［3］：取-20℃保存的IL2上清液，并做1/2和1/4的稀釋，在96孔平底培養(yǎng)板中，每孔加入IL2上清液或不同稀釋度的IL2上清液100μl及上述反應細胞100μl；陽性對照不加IL2上清，加100μl1640培養(yǎng)液。每組各設12個復孔，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，每孔加MTT(5mg/ml)10μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h，吸棄100μl上清液，加入酸化異丙醇100μl(0.04mol/LHCl異丙醇)［4］，充分震蕩后靜止20min，全自動酶標儀用560nm波長進行比色分析。1．4結果處理實驗結果采用組間均數(shù)差異t檢驗的方法進行統(tǒng)計

7、學分析。2結果冬蟲夏草對小鼠淋巴細胞增殖反應和IL2產(chǎn)生的影響見表1。表1冬蟲夏草對小鼠淋巴細胞增殖反應和IL2產(chǎn)生的影響表1顯示實驗組對脾淋巴細胞增殖反應明顯，IL2的產(chǎn)生明顯增強，與對照組相比有非常顯著性差異（P＜0.01）。3討論本實驗研究了冬蟲夏草對小鼠淋巴細胞增殖和IL2產(chǎn)生的影響，結果表明冬蟲夏草可使ConA激發(fā)的T淋巴細胞增殖反應明顯增強，表明冬蟲夏草對T淋巴細胞功能具有增強作用，同時對B淋巴細胞免疫功能也具有明顯增強作用。已知T細胞