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1、大豆發(fā)酵制品中總異黃酮的含量測(cè)定論文崔力劍，黃蕓，竇玉紅，詹文紅【摘要】目的建立一種測(cè)定大豆發(fā)酵制品——淡豆豉中異黃酮類成分含量的紫外分光光度法分析方法。方法以染料木素為對(duì)照品，利用染料木素與氫氧化鈉產(chǎn)生反應(yīng)，在271nm波長(zhǎng)處有最大吸收點(diǎn)，用紫外分光光度法測(cè)定淡豆豉中總異黃酮的含量。結(jié)果淡豆豉中總異黃酮的含量為9.884mg/g，加樣回收率為99.3%.freeletryfordeterminationofisoflavonesinSemenSojaePraeparatum.MethodsGenisteinaxiumabsorptionin271nmetry
2、methodinationofisoflavonesinSemenSojaePraeparatum.ResultsThetotalcontentofisoflavonesinSemenSojaePraeparatumextractsg/geanrecovery99.3%,andtheRSDethodissimple,accurateandreproducible,itcanbeusedfortheroutineanalysisandqualitycontroloftheSemenSojaePraeparatumandfunctionfood.Keyax(L.)
3、;SemenSojaePraeparatum;NaOH;Isoflavones;Spectrophotometry豆豉按微生物種類不同可以分為毛霉型豆豉、曲霉型豆豉、細(xì)菌型豆豉和根霉型豆豉［1］。淡豆豉是豆科植物大豆Glycinemax(L.)Merr.的成熟種子與青蒿、桑葉蒸罨、發(fā)酵加工而成的制品，發(fā)源于中國(guó)，是我國(guó)的傳統(tǒng)食品，也是衛(wèi)生部確定的第一批藥食兼用品種之一。作為常用中藥，歷版《中國(guó)藥典》均有記載。因炮制方法的不同，有的性寒，有的微熱，有解毒清熱、透疹解毒的功效，適用于風(fēng)熱頭疼，胸悶嘔吐，痰多虛煩等癥。淡豆豉中含有的大豆異黃酮(SoybeanIsof
4、lavones)是一類重要的生理活性物質(zhì)，具有多種生理功能，如降血糖、抗腫瘤作用；對(duì)血管的防護(hù)作用；雌激素雙向調(diào)節(jié)作用；預(yù)防骨質(zhì)疏松癥；較強(qiáng)的抗氧化活性和抗真菌活性等［2,3,4］。其有效成分以大黃素(Daidzein)和染料木素(Genistein)為主［5］，這是一類異黃酮成分。本實(shí)驗(yàn)以染料木素作為對(duì)照品，利用染料木素與氫氧化鈉產(chǎn)生反應(yīng)，并在271nm波長(zhǎng)處產(chǎn)生最大吸收峰的特性，采用紫外分光光度法在271nm波長(zhǎng)處測(cè)定淡豆豉中異黃酮的含量，建立一種快速、準(zhǔn)確測(cè)定淡豆豉中總異黃酮含量的新方法。1器材與方法1.1材料正己烷（A.R），天津化學(xué)試劑廠產(chǎn)品；無(wú)水乙
5、醇（A.R），天津化學(xué)試劑廠產(chǎn)品；氫氧化鈉（A.R），河北辛集化工廠產(chǎn)品；染料木素對(duì)照品（含量約為98%），Sigma公司產(chǎn)品。淡豆豉（SemenSojaePraeparatum）購(gòu)自石家莊市樂(lè)仁堂藥店，經(jīng)河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室嚴(yán)玉平副教授鑒定為正品，留樣憑證存放于河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院藥用植物教研室。1.2儀器λ-2紫外分光光度儀（美國(guó)PE公司）、RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、BS223S電子天平（德國(guó)賽多利斯公司）。1.3樣品溶液制備［6］取符合實(shí)驗(yàn)要求的淡豆豉，粉碎，過(guò)10目篩，精密稱取5g。加正己烷40ml超聲振蕩脫脂25mi
6、n，棄去正己烷，重復(fù)1次。殘?jiān)尤?0ml70%乙醇溶液，85℃熱回流提取3次，1h/次，收集提取液。減壓回收溶劑至干，加NaOH（0.01mol/L）溶液溶解，定容為250ml，作為供試品液。精密移取供試品液2ml置100ml量瓶中，加NaOH（0.01mol/L）溶液定容至刻度，搖勻。平行操作3份。1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取120℃干燥至恒重的染料木素10.2mg，置50ml容量瓶中，加0.01mol/LNaOH溶液定容至刻度，搖勻。精密吸取此溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0ml分別置于100ml容量瓶中，加0.01mol/LNaOH定容至刻度，
7、搖勻，以0.01mol/LNaOH溶液為空白溶液，在271nm處測(cè)吸收度。以吸收度（Y）為縱坐標(biāo)，染料木素濃度(μg/ml)（X）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（見(jiàn)圖1），結(jié)果表明染料木素濃度與吸收度呈良好線性關(guān)系。回歸方程為Y=0.1698X+0.0059，r=1.0000。1.5樣品測(cè)定以0.01mol/LNaOH溶液為空白溶液，在271nm處測(cè)吸收度。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定2次。2結(jié)果2.1溶劑的選擇從染料木素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及理化性質(zhì)可知，其具有強(qiáng)疏水性，難溶于水、稀鹽酸等，微溶于甲醇、乙醇。選擇上述溶液作為染料木素的溶出介質(zhì)不適宜。根據(jù)染料木素及異黃酮類化合物的理化特性（
8、結(jié)構(gòu)中含有酚羥基呈現(xiàn)弱酸性，易溶于稀堿
