肝細(xì)胞癌組織中cox2及vegf表達(dá)的臨床研究論文

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1、肝細(xì)胞癌組織中COX2及VEGF表達(dá)的臨床研究論文【摘要】目的：研究肝細(xì)胞癌（HCC）中環(huán)氧化酶2（COX2）和血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）蛋白的表達(dá)及其相互關(guān)系.方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測HCC30例石蠟包埋組織中COX2與VEGF蛋白的表達(dá)情況，分析其相互關(guān)系及與肝細(xì)胞癌臨床病理特征間的關(guān)系.結(jié)果：HCC中COX2的表達(dá)陽性率達(dá)70.0%，分化好的HCC中COX2蛋白的表達(dá)高于分化差的HCC（分化好vs分化差，P＜0.05），轉(zhuǎn)移組中COX2蛋白表達(dá)高于無轉(zhuǎn)移組（轉(zhuǎn)移vs未轉(zhuǎn)移，P＜0.01）；而COX2蛋白的表達(dá)與腫瘤大小、有無包膜及AFP水平無關(guān).肝細(xì)胞癌

2、中VEGF的表達(dá)陽性率達(dá)86.7%，VEGF的表達(dá)與腫瘤有無包膜及轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與腫瘤大小、分化程度及AFP水平無關(guān).結(jié)論：COX2在肝細(xì)胞癌中高表達(dá).freela.METHODS:Paraffinembeddedtissuesfrom30hepatocellularcarcinomapatientsethodofSPimmunohistochemicalstainingforproteinexpressionsofCOX2andVEGF.TherelationshipbetetastasisexpressedCOX2proteinstrongerthanthoseeta

3、stasis(P0.01).TheproteinexpressionofCOX2inHCCorsize,theenvelopeandthelevelofAFP.VEGFproteinexpressionetastasisorenvelope(P0.05),butnotrelatedtothetumorsize,thepathologicalgradeandthelevelofAFP.CONCLUSION:ThehighexpressionofCOX2inHCCcaninducethehighexpressionofVEGF.ThecoexpressionofCOX2an

4、dVEGFmightplayanimportantroleinangiogenesis,thuspromotingthegroetastasisofHCC.【Keya,hepatocellular;cyclooxygenase2;vascularendothelialgromunohistochemistry0引言環(huán)氧化酶（cyclooxygenase,COX）是催化花生四稀酸（arachidonicacid,AA）合成內(nèi)源性前列腺素（prostaglandin,PG）的限速酶.在哺乳動物中COX有兩種同工酶COX1和COX2.COX2是一種誘導(dǎo)酶，不僅在炎癥反應(yīng)中起作

5、用，還在許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用［2］；而血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgroa,HCC）組織中COX2和VEGF蛋白的表達(dá)，分析它們在HCC血管生成和侵襲轉(zhuǎn)移中的作用.1材料和方法1.1材料中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院病理科2004/2005年HCC石蠟標(biāo)本30（男24，女6）例，年齡29～71（中位51）歲.EdmondsonI級4例，II級13例，III級11例，IV級2例；腫瘤直徑＜5cm16例，≥5cm14例；腫瘤有包膜11例；伴門靜脈癌栓12例；AFP＜500μg/L9例，≥500μg/L21例.選取癌旁肝硬化組織25例和的正常肝組織1

6、0例作為對照.羊抗人COX2多克隆抗體，鼠抗人VEGFmAb均系SantaCruz公司產(chǎn)品.鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶免疫組化染色超敏試劑盒，購至北京中山生物技術(shù)有限公司.1.2方法采用鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶（streptavidinperoxidase，SP）免疫組化技術(shù)，石蠟包埋組織4μm連續(xù)切片，常規(guī)二甲苯脫蠟，梯度酒精水化，30mL/L過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧化物酶10min；檸檬酸組織抗原修復(fù)液微波修復(fù)15min；過氧化酶阻斷液室溫下孵育10min；非免疫性動物血清室溫下孵育10min；滴加相應(yīng)稀釋的一抗，4℃孵育過夜；PBS液沖洗后加生物素標(biāo)記的二抗室溫

7、下孵育10min，加鏈親和素過氧化物酶溶液孵育10min，PBS液沖洗，DAB染色，蘇木精復(fù)染，脫水、透明封片，光鏡下觀察.以PBS代替一抗作陰性對照，用已知陽性片作陽性對照.COX2和VEGF陽性信號為棕黃色或深棕黃色顆粒，定位于細(xì)胞質(zhì)，胞質(zhì)無棕黃色或與背景著色一致為表達(dá)陰性細(xì)胞.COX2,VEGF判斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)陽性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的比例來判斷，（在400倍光鏡下隨機(jī)觀察5個癌巢）陽性細(xì)胞≤10%為陰性，陽性細(xì)胞＞10%為陽性.統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理.用χ2