hplc測定蓽茇三味散中胡椒堿的含量論文

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1、HPLC測定蓽茇三味散中胡椒堿的含量論文那順朝克圖王烈群劉宏婧白廣翠朱曉宇【摘要】目的：建立蓽茇（蓽茇、訶子、山楂)三味散中胡椒堿的含量測定的方法。方法：采用高效液相色譜法測定,色譜柱為Kromasil(C18,5um,250mm×4.6mm)色譜柱，流動相為甲醇水(77:23)，檢測波長為343nm。結果：胡椒堿在進樣量6.96ug～1.99ug范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關系,r=0.9999,平均回收率為102.9%,RSD為1.4%。結論：HPLC法簡單準確,精密度高,分離度良好,可用于蓽茇三味散的質(zhì)量控制?！娟P鍵詞】蓽茇胡椒堿含量測

2、定高效液相色譜法AbstractObjective:Todeterminethecontentofpiperineinthethelongpepper3poinedbyRPHPLCasil(C18,5um,250mm×4.6mm)columnatroomtemperature.ThemobilephaseethanolL·min-1andtheinjectingvolume.Results:Thelinearrangeethodissimple,accurate,andcanbeusedforthequalitycontroloflo

3、ngpepper3poination;HPLC本品為蒙藥蓽茇、訶子和山楂三味藥材組成的散劑,是一個蒙醫(yī)驗方，此方具有降血脂的作用且臨床應用效果好［1］。方中蓽茇具有溫中散寒、下氣止痛之功效。蓽茇的主要成分為胡椒堿,但蒙藥蓽茇三味散中胡椒堿的含量測定未見報道。為做進一步的研究和開發(fā)，故參考《中國藥典》2005版第一部蓽茇中胡椒堿的含量測定方法建立了蓽茇三味散中胡椒堿的反相高效液相色譜測定法。結果表明,此法操作簡便、靈敏度高、重現(xiàn)性好,為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量提供依據(jù)。1儀器與試藥1.1儀器依利特P230型高效液相色譜儀（大連依利特科學儀器有限公司

4、）包括：UV230+紫外可見檢測器，P230高壓恒流泵，EC2000色譜工作站；AL204電子天平；溶劑過濾器；AS3120型超聲振蕩儀(220V、120asil(C18,5um,250mm×460mm)色譜柱;流動相:甲醇水(V:V=77:23);流速:1.0ml/min；進樣量：20ul;檢測波長：343nm;柱溫：室溫。2.2測定波長的選擇參考藥典(中國藥典2005版一部)蓽茇中胡椒堿HPLC法含量測定檢測波長在343nm處有最大吸收，故將測定波長確定為343nm［2］。2.3流動相的選擇參考中國藥典2005版一部的色譜條件.f

5、reell量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻，制成每1ml含0.4432mg胡椒堿的溶液作為對照品溶液。2.5供試品溶液的制備稱取蓽茇、山楂、訶子粉末各3g(搗碎,過120目篩),混合均勻后,精密稱取蓽茇三味散粉末1g,置于50ml量瓶中,加入甲醇適量,密塞,超聲處理10分鐘,放冷,用甲醇補液至刻度,搖勻放置片刻，取上清液用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。2.6陰性對照試驗按處方(不含蓽茇藥材)及制備工藝,制備空白樣品,稱取山楂、訶子粉末各3g(經(jīng)搗碎,過120目篩),混合均勻后,稱取混合粉末1g,精密稱定,置50ml量瓶中

6、,加入甲醇適量,密塞,超聲處理10分鐘,放冷,用甲醇補液至刻度,搖勻放置片刻，取上清液用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液作為空白溶液，進樣20ul,記錄色譜圖,結果表明陰性樣品溶液在胡椒堿出峰處沒有干擾峰出現(xiàn)。見圖1～3。2.7標準曲線的繪制將胡椒堿對照品溶液(0.4432mg/ml)依次精密吸取8ml,7ml,6ml,3ml,2ml分別置于5個10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度配制成濃度依次為0.35mg/ml,0.3mg/ml,0.25mg/ml,0.15mg/ml,0.1mg/ml等5份溶液，分別取上清液用微孔濾膜（0.45μm）濾

7、過，各取樣20ul,注入液相色譜儀,記錄色譜峰面積(以峰面積為縱坐標,以對照品濃度為橫坐標,繪制標準曲線)計算回歸方程Y(c)=［9.8742e-006］A+［-8.061457e-003］，r=0.9999，結果表明胡椒堿進樣量在6.96ug～1.99ug范圍內(nèi)時與峰面積呈良好的線性關系。2.8精密度試驗精密吸取上述供試品溶液用微孔濾膜（0.45μm）過濾,取樣20ul，注入液相色譜儀，測定峰面積,連續(xù)進樣5次,實驗結果表明樣品的精密度良好，見表1。2.9穩(wěn)定性試驗取同一樣品的溶液分別于0，1，2，4，6，8，12h進行測定，記錄色譜峰面積

8、，結果在12h內(nèi)峰面積無明顯變化，RSD為0.66%，見表2。表1精密度試驗結果（略）表2穩(wěn)定性試驗結果（略）2.10重復性試驗取同一批號樣品,精密稱定蓽茇三味散1