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《LC-MSMS檢測食品基質(zhì)中三聚氰胺和三聚氰酸.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、LC-MS/MS檢測食品基質(zhì)中三聚氰胺和三聚氰酸PeterVarelis,NationalCenterforFoodSafetyandTechnology,IllinoisInstituteofTechnology.JonathanBeck,KefeiWang,andDipankarGhosh;ThermoFisherScientific,SanJose,CA引言：2007年3月，北美幾個寵物食品生產(chǎn)廠家自發(fā)的在全國發(fā)起產(chǎn)品回收的公告，這一舉動源于報道其產(chǎn)品中有一些會引起寵物腎衰竭的物質(zhì)成分【1】，用于生產(chǎn)寵物食品的源
2、材料是從中國進口的小麥麩，已經(jīng)被認定是污染的源頭【2】。雖然，早期報道表明這種污染物在寵物食品中是被禁用的。但是,進一步調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)污染有三聚氰胺的飼料已經(jīng)被用于人所食用的動物喂養(yǎng)【3、4、5】。特別是，它已經(jīng)存在于雞、豬、鯰魚的飼料中。因此，美國FDA和USDA開發(fā)了動物器官中三聚氰胺殘留檢測方法―――強離子交換固相萃取的液湘色譜－串聯(lián)質(zhì)譜檢測。藥品和試劑：除了特別說明的試劑而外，所有使用的有機溶劑均為色譜純，并購自ThermoFisherScientific(FairLawn,NJ,USA)。三聚氰胺、三聚氰酸和3
3、0％（w/w）氨水購自Sigma(St.Louis,MO,USA)。所使用的內(nèi)標是13C3標記的三聚氰胺和三聚氰酸，由13C3氯化氫標記，也購自Sigma(St.Louis,MO,USA)。Milli-Q?超純水系統(tǒng)提供了18MΩ的實驗用水，Milli-Q?超純水系統(tǒng)購自Millipore(Billerica,MA,US)。標準溶液制備：先用50%(v/v)甲醇水分別配制1000μg/mL的三聚氰酸、三聚氰胺溶液。分別取1mL上述溶液，用1:3的水-乙晴進行稀釋，獲得終濃度為10μg/mL的儲存標準溶液。另外，分別取1
4、0μg/mL的儲存標準溶液1mL，用乙晴進行連續(xù)稀釋，獲得1-1000ng/mL范圍內(nèi)的8個標準工作溶液。取50μL內(nèi)標儲存標準溶液分別加入到1mL上述8個標準工作溶液中，即為校正標準溶液。樣品制備：固體樣品放在Ultra-Turrax?(IKA?-WerkeGmbH&Co.KG,Staufen,Germany)中高速攪拌成均勻微粒。然后加入1:1水－甲醇抽提，取水相。加入內(nèi)標準品。樣品制備由非在線離子交換色譜SPE小柱完成。液湘色譜：儀器：BioBasic?AX(ThermoFisherScientific,Bell
5、efonte,PA)。液湘色譜柱：粒徑5μm、內(nèi)徑2.1mm、長150mm，分析柱溫：30°C。最初流動相為乙晴－異丙醇－50mM醋酸銨，其各組份比率為85:10:5，流速為400μL/min。五分鐘以后，流動相立即改變?yōu)?:1的水－乙晴，流速轉(zhuǎn)換為500μL/min，平衡5min。流動相再變回到最初的流動相，流速也換回到400μL/min。在最初的1.5min里，柱子另一端的流出液接入廢液，隨后接在檢測器上，即運行保留時間。質(zhì)譜條件－三聚氰胺質(zhì)譜：TSQQuantumUltra系列質(zhì)譜儀（ThermoScientif
6、ic）源極：加熱電噴霧離子源(H-ESI)離子化：正離子電噴霧離子源夾套氣壓(N2)：65units輔助氣壓(N2)：35units（250°C）離子轉(zhuǎn)換管溫度：350°C掃描時間：200ms/transitionQ1/Q3分辨率:0.7FWHMSRM變調(diào)：13C3標記的三聚氰胺三聚氰胺（內(nèi)標）m/z12768@32eVm/z13070@32eVm/z12785@18eVm/z13087@18eVQED-MS/MS條件：碰撞能量：30eV反向碰撞能量（RER）：50eV質(zhì)譜條件－三聚氰酸質(zhì)譜：TSQQuantumUlt
7、ra系列質(zhì)譜儀（ThermoScientific）源極：加熱電噴霧離子源(H-ESI)離子化：負離子電噴霧離子源夾套氣壓(N2)：75units輔助氣壓(N2)：10units（250°C）離子轉(zhuǎn)換管溫度：350°C掃描時間：200ms/transitionQ1/Q3分辨率:0.7FWHMSRM變調(diào)：13C3標記的三聚氰酸三聚氰酸（內(nèi)標）m/z12842@17eVm/z13143@17eVm/z12885@11eVm/z13187@11eV結(jié)果：圖1是三聚氰胺、三聚氰酸、13C3標記的三聚氰胺和三聚氰酸的標準色譜圖。圖
8、2、3分別為三聚氰胺、三聚氰酸濃度范圍為1-1000ppb的標準曲線，該標準曲線在整個濃度范圍內(nèi)具有較好的線性關(guān)系。同時，在圖中也給出了該曲線中1-100ppb區(qū)段的放大圖。從圖4可以看出，在鯰魚基質(zhì)樣品（具體樣品制備方法見前面所述）譜圖中有三聚氰胺、三聚氰酸相應(yīng)的尖峰，其分別為10ppb、50ppb。而且其他雜峰也表現(xiàn)較弱?？梢?/p>
