心房鈉尿肽對(duì)急性肺損傷的治療作用及其可能機(jī)制論文

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1、心房鈉尿肽對(duì)急性肺損傷的治療作用及其可能機(jī)制論文閆志強(qiáng),李志超,李志斌,宋景春,魏敏【關(guān)鍵詞】心鈉素【Abstract】AIM:Tostudytheprotectiveeffectofatrialnatriureticpeptide(ANP)onalveolartypeⅡcells(ATⅡ)fromlipopolysaccharide(LPS)inducedacutelunginjury(ALI).METHODS:Eighteenratsaleicdialdehyde(MDA)contentoft

2、heBALFeasured.Theactivityoflactatedehydrogenase(LDH)andalkalinephosphatase(AKP)inBALFN/m]decreasedinLPSgroup(P0.05),butnodifferenceN/m]andcontrolgroup.ANPpreventedtheincreaseoftheAKPactivity[ControlGroup(0.10±0.08)μkat/L,.freelinjurybyLPSinALI.Oneofth

3、emostimportantmechanismsispossiblythatANPcanprotecttheATⅡandfacilitatethesecretionofPS.【Keyonarysurfactants;respiratorydistresssyndrome,adult【摘要】目的:研究心房鈉尿肽(ANP)對(duì)急性肺損傷時(shí)肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(ATⅡ)的保護(hù)作用及其機(jī)制.方法:SD大鼠18只隨機(jī)等分為生理鹽水對(duì)照組、脂多糖(LPS)模型組、ANP治療組.通過(guò)頸外靜脈給藥,給藥4h后處死動(dòng)物,

4、收集肺泡灌洗液(BALF),測(cè)定BALF表面張力、總磷脂含量(TPL)、乳酸脫氫酶(LDH)、堿性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)及總蛋白(TP)含量.結(jié)果:與對(duì)照組比較,LPS可使BALF中LDH活性[(4.8±1.9),(8.4±1.9)μkat/L]及TP含量升高(P0.05),ANP[(5.1±1.7)μkat/L]可逆轉(zhuǎn)此現(xiàn)象;LPS可使BALF中TPL[(0.43±0.04)vs(0.34±0.06)μg/kg]明顯降低(P0.05)、表面張力[(19.8±2.6)vs(23.3±2

5、.9)mN/m]升高(P0.05),ANP治療后TPL[(0.41±0.06)μg/kg]升高、表面張力[(18.6±2.9)mN/m]降低;與對(duì)照組比較,LPS組AKP活性[(0.10±0.08)vs(0.36±0.10)μkat/L]升高(P0.05).freela公司;堿性磷酸酶(AKP),乳酸脫氫酶(LDH),丙二醛(MDA)試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品;磷標(biāo)準(zhǔn)溶液由第四軍醫(yī)大學(xué)預(yù)防系營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)教研室高雙斌高級(jí)實(shí)驗(yàn)師惠贈(zèng);725C型紫外可見分光光度計(jì)(上海).1.2方法1.2

6、.1實(shí)驗(yàn)分組及模型建立將動(dòng)物隨機(jī)等分為3組:①對(duì)照組(n=6),經(jīng)頸外靜脈導(dǎo)管注射等容積生理鹽水;②LPS組(n=6),經(jīng)頸外靜脈導(dǎo)管注射LPS2mg/kg復(fù)制ALI動(dòng)物模型,注射LPS后再立即注射等容積的生理鹽水;③ANP組(n=6),經(jīng)頸外靜脈導(dǎo)管注射LPS2mg/kg后立即注射ANP2μg/kg.1.2.2手術(shù)及標(biāo)本采集大鼠腹腔注射200g/L烏拉坦5mL/kg,麻醉后固定于鼠板;沿頸部正中切開皮膚,分離一側(cè)頸外靜脈,插入導(dǎo)管給藥,給藥后4h頸椎脫臼處死,行氣管插管術(shù),以20mL/kg的生理

7、鹽水進(jìn)行支氣管肺泡灌洗,連續(xù)3次,取第1次灌洗所得肺泡灌洗液(BALF)0.2mL用于表面張力的測(cè)量,收集所有BALF并記錄BALF回收量,1000r/min離心10min,取上清,留1.4mL于-20℃保存,用于測(cè)AKP,MDA,LDH和總蛋白(TP)等,剩余上清用于磷脂提取.1.2.3表面張力的測(cè)定毛細(xì)管法測(cè)定肺泡BALF表面張力,即將毛細(xì)玻璃管垂直插入到BALF中,測(cè)量毛細(xì)管內(nèi)外液面高度差,根據(jù)拉普拉斯方程σ=rρg(h+r/3)/2計(jì)算出BALF的表面張力,以此來(lái)反映PS的活性.其中,σ為

8、表面張力(單位為N/cm),r?yàn)槊?xì)管半徑,ρ為液體密度,g為重力加速度,h為內(nèi)外液面高度差.1.2.4總磷脂(TPL)的測(cè)定采用Bartlett法[2]略有改進(jìn).BALF中加入2倍體積的氯仿甲醇(2∶1,V/V)萃取液,震蕩1min,2500r/min離心10min,棄上層液體但不棄界面雜質(zhì).加入1/4體積的甲醇水(1∶1,V/V)萃取液,震蕩1min,2500r/mim離心10min.棄去上層液及界面雜質(zhì),氮?dú)獯蹈?,即得到磷脂?20℃保存待測(cè).將磷脂加入1mL高氯酸加熱,溫度

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