s-co值在hbsag檢測中臨床應用價值的探討

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1、s/co值在HBsAg檢測中臨床應用價值的探討【摘要】目的了解酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法在乙型肝炎標志物檢測中吸光度值/臨界值(s/co)的意義和臨床應用價值。方法采用6種常用乙肝試劑盒檢測不同濃度乙肝病毒表面抗原(HBsAg)陽性定值血清,比較其s/co值的線性走勢。結(jié)果HBsAg在高濃度時其s/co值并不能客觀地反映其真實濃度,差異無顯著性(P>0.05)。結(jié)論病毒性肝炎標志物以s/co值報告時不能完全客觀地反映其在血清中的真實含量,必須結(jié)合樣本的稀釋度,并采取嚴格的質(zhì)控措施,防止漏檢和錯檢。  【關鍵詞】

2、酶聯(lián)免疫吸附試驗;s/co值;乙型肝炎表面抗原一般來說,檢測病毒性肝炎血清標志物最普通的方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。大多數(shù)醫(yī)院都采用s/co(s為樣品吸光度值,co為cutoff值)的方式向臨床出具報告,可看作是病毒性肝炎標志物的半定量分析,在一定程度上可以反映病毒標志物的強弱,但由于免疫檢測方法學敏感性強,檢測試劑品種繁多,變異大,線性范圍小,所以應該對不同肝炎病人的血清做進一步的分析,才能對肝炎病毒標志物的濃度進行正確的檢測與評估。本文對6種不同的ELISA試劑盒檢測不同HBsAg濃度的陽性血清給予了比較和分

3、析,其s/co值的結(jié)果如下?! ?材料與方法  1.1材料  HBsAg陽性定值血清1、5、25、150、500、800、1000ng/ml,購自衛(wèi)生部臨檢中心?! ?.2方法  酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),所用試劑為臨床日常使用較多的a、b、c、d、e、f6家公司產(chǎn)品,都具有國藥準字號且已經(jīng)衛(wèi)生部臨檢中心定標。嚴格按各試劑盒說明書操作,分別取6種試劑測定同一濃度樣本20次s/co均值(x)?! ?.3儀器  以K3型酶標儀讀取吸光度值,按試劑盒說明書計算s/co值。6種試劑的co值計算方法均為陰性對照平均OD值×2.

4、1,陰性對照平均OD值<0.05按0.05計。  2結(jié)果  6種試劑檢測不同濃度HBsAg(ng/ml)陽性血清(s/co)比較,見表1。表16種試劑檢測不同濃度HBsAg(ng/ml)陽性血清(s/co)比較(略)注:x為同一試劑測定同一濃度樣本20次(s/co)均值,X為6種試劑測定同一濃度樣本(s/co)均值從表中可以看出,6種試劑對500ng/ml的HBsAg的s/co值均明顯低于HBsAg為150ng/ml時的s/co值(t=9.49,P<0.01),差異有顯著性,而HBsAg為500ng/ml、800ng

5、/ml、1000ng/ml時s/co值變化不大(t=1.32,P>0.05),差異無顯著性,因此,血清濃度增高時s/co值與HBsAg濃度不呈線性關系,達不到線性值。  3討論免疫反應由抗原和相應抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物,在一定條件下,隨著抗原量的增加形成的復合物也逐步增加,呈線性關系,但達到峰值后抗原抗體復合物隨著抗原量的進一步增加反而減少。HBsAg試劑盒中,當HBsAg濃度在一定范圍內(nèi)(20ng/ml)[1],s/co值與HBsAg濃度呈線性關系,隨著HBsAg濃度的增加,s/co值反而降低,達不到線性值,當

6、血清中HBsAg為500ng/ml時,6種試劑盒的s/co值均低于HBsAg為150ng/ml時s/co值,當HBsAg達到800ng/ml、1000ng/ml時,s/co值變化不大,即為等價區(qū);而當HBsAg為強陽性(>10萬ng/ml)s/co值會顯示陰性,此為“鉤狀效應”。因此,HBsAg濃度超過線性區(qū)后不能用原血清檢測,必須將原血清適當稀釋后再進行檢測,其s/co值才有意義。所以,臨床中病毒性肝炎診斷指標以s/co值報告時并不能完全客觀地反映血清中HBsAg指標的真實含量。乙型肝炎患者在不同病程中HBsAg濃

7、度含量是不同的,一些高HBsAg濃度的血清經(jīng)一定比例稀釋后s/co值才達最高值[2],動態(tài)連續(xù)觀察s/co值的變化對臨床分析和診斷病情有一定的參考價值。近幾年病毒性肝炎檢測項目的結(jié)果報告方式已逐漸由定性向半定量和定量方式演變,s/co值越大,說明血清中HBsAg濃度越高。但由于其方法學特定的局限性,實驗室要快速報告結(jié)果,大都采用“一步法”,部分廠家的試劑存在質(zhì)量差異,抗原抗體結(jié)合有一定線性區(qū)、等價區(qū)和抗原過剩區(qū),只有當HBsAg濃度在線性范圍內(nèi),s/co值與HBsAg濃度呈正相關,HBsAg濃度超過線性范圍時,s/co值不

8、能客觀地反映患者體內(nèi)HBsAg真實水平。因此,臨床報告結(jié)果時,用s/co值來說明檢測指標的強弱存在著一定的局限性,必須嚴格相應的質(zhì)控措施,同時,s/co值必須結(jié)合樣本的稀釋度才能客觀反映乙肝病毒標志物的真實濃度,為臨床分析和診斷病情提供可靠的診斷依據(jù)?!  緟⒖?/p>

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