腎癌患者外周血中survivin mrna的表達

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1、腎癌患者外周血中survivinmRNA的表達作者：侯子珍，王志平，岳中瑾，盧建中，付生軍，馬寶良【關(guān)鍵詞】腎癌；RTPCR；survivinmRNA　腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要特征，也是惡性腫瘤患者死亡的重要因素。腎細胞癌是成人腎臟最常見的惡性腫瘤。近1/3的腎細胞癌患者在診斷原發(fā)腫瘤時已有轉(zhuǎn)移灶，另外約40%的患者術(shù)后一年內(nèi)出現(xiàn)復發(fā)、轉(zhuǎn)移。腎細胞癌一旦轉(zhuǎn)移，5年生存率<10%，平均存活時間不到2年。未接受治療者的3年存活率<5%。因此尋找敏感、特異的檢測方法和腫瘤轉(zhuǎn)移指標以明確腫瘤有無轉(zhuǎn)

2、移對臨床診斷、治療及預后判斷具有重要的臨床意義。近年來，RTPCR法以其很高的靈敏性，被廣泛用于各種實體瘤微轉(zhuǎn)移(micrometastasis)的檢測[12]。本研究應(yīng)用RTPCR檢測了腎細胞癌患者外周血中survivinmRNA的表達,初步探討其在腎細胞癌微轉(zhuǎn)移中的意義。1資料與方法1.1臨床資料收集蘭州大學第二醫(yī)院泌尿外科2004年12月-2005年8月經(jīng)病理證實的腎透明細胞癌患者外周血標本共30例。男19例，女11例，年齡48-76歲，平均57歲。病理分級按arker、瓊脂糖均購自北京天為時代科技

3、有限公司。RTPCR試劑盒為Takara公司產(chǎn)品。survivinmRNA引物參考檢測腫瘤微轉(zhuǎn)移的方法很多，如細胞形態(tài)學、流式細胞儀、細胞遺傳學、免疫細胞化學、免疫組織化學等,但效果并不理想[56]。直至20世紀80年代后期,高靈敏度PCR方法的出現(xiàn)使得檢測循環(huán)腫瘤細胞及微小殘余病灶的存在再次成為可能。而RTPCR技術(shù)是在PCR基礎(chǔ)上發(fā)展起來的基因診斷方法，可快速擴增特異基因和DNA片段,可檢測出106-107個正常細胞中的一個腫瘤細胞，是一種非常敏感的檢測方法[7]。隨著分子生物學技術(shù)的飛速發(fā)展，運用R

4、TPCR檢測患者外周血中某些特異性基因的表達已成為判斷有無異位腫瘤細胞存在的一種重要手段[8]。腫瘤標志物包括傳統(tǒng)的大分子標志物(主要是大分子蛋白質(zhì))和基因標志物，大分子蛋白質(zhì)以抗體為基礎(chǔ)進行IHS或蛋白質(zhì)印跡(期特異性表達?；趕urvivin基因在正常組織中不表達，而在腫瘤發(fā)生的早期往往能夠檢測的這一特性，因此可用于腫瘤發(fā)生的早期診斷。多方面研究提示survivin可能是一種癌基因，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，是一個具有潛在價值的腫瘤標志物。雖然survivin對于腎癌不具有組織特異性，但有著腫瘤特異性，因此檢測

5、腎癌患者外周血中survivinmRNA的表達，可以明確腫瘤有無轉(zhuǎn)移，對手術(shù)選擇術(shù)式及清掃范圍，確定術(shù)前、術(shù)后治療方案，減少腫瘤的轉(zhuǎn)移和復發(fā)將起到重要作用，從而為臨床的診斷、治療帶來根本變化。本研究采用RTPCR方法檢測了30例腎細胞癌患者外周血中survivinmRNA的表達，其陽性率為76.7%，與正常健康人0%相比其差異具有統(tǒng)計學意義。survivinmRNA的表達隨腫瘤組織分化程度的降低,陽性率有增加的趨勢,但各組間比較差異無統(tǒng)計學意義，可能與病例數(shù)少及組間分配不平衡有關(guān)。但隨著臨床病理分期的提高,外

6、周血中survivinmRNA的陽性率有顯著上升趨勢，各組間比較差異有統(tǒng)計學意義。同時我們注意到有明確轉(zhuǎn)移病灶存在(包括血道轉(zhuǎn)移)的晚期患者(RobsonⅢ、Ⅳ期)外周血中survivinmRNA的陽性率為100%，明顯高于早期腎癌患者(RobsonⅠ、Ⅱ期)56.3%，說明該方法是可靠的。因此我們認為RTPCR方法可以作為腫瘤微轉(zhuǎn)移檢測的敏感手段[7]，survivin可以作為腫瘤標記物用于腫瘤微轉(zhuǎn)移的檢測。微轉(zhuǎn)移是出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶的早期階段。微轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)歸取決于癌細胞的生物學特性、機體的免疫狀態(tài)及與宿主器官微環(huán)境

7、之間的相互作用。血液中即使檢測到循環(huán)腫瘤細胞，但并不一定可致顯著的臨床轉(zhuǎn)移灶的發(fā)生。Glaves等對10例腎細胞癌的觀察發(fā)現(xiàn)，每例術(shù)前釋入腎靜脈的癌細胞數(shù)高達109，而只有3例最終形成轉(zhuǎn)移。盡管如此，血液中循環(huán)腫瘤細胞或微轉(zhuǎn)移灶的存在畢竟增加了惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的風險。Azuhata[10]研究表明，survivin的陽性表達是腎腫瘤復發(fā)的高危因素且提示預后不良。檢測外周血中survivinmRNA可作為腫瘤微轉(zhuǎn)移的一個監(jiān)測指標，將有助于腫瘤的早期診斷和預后的評估，確定患者術(shù)后復發(fā)的危險性，指導選擇正確的治療方案?！?/p>

8、參考