鐵皮石斛的植物學(xué)特性及組培苗生產(chǎn)技術(shù)論文

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1、鐵皮石斛的植物學(xué)特性及組培苗生產(chǎn)技術(shù)論文.freelcandidumisavaluableChineseherbalmedicine.Itsreprodutiontechnologyisconcernedbyscientistsandindustrypersonnels.Inthispaper,thebiologicalandecologicalcharacteristicsofDendrobiumcandidumonproblemsfromDendrobiumcandidumtissueculture,thesolution

2、scandidum;botanicalcharacteristics;seedlingpropagation;technigue鐵皮石斛(DedrobiumcandidumS+6-BA0.5～2.0mg/L+NAA0.2～0.5mg/L;(Ⅱ)培養(yǎng)后期壯苗和生根同步培養(yǎng)基:MS+NAA0.5～2.0mg/L+IBA0.2～0.5mg/L。以上培養(yǎng)基均附加食用白糖30g/L、瓊脂7.5g/L、土豆泥50～60g/L、香蕉泥50～60g/L、活性碳5～10g/L、pH值5.5～5.8。最適溫度24～28℃,最適光照1500～200

3、0Lx,光照時(shí)間為12h/d。2.2無菌苗的獲得以野生鐵皮石斛蒴果為外植體,當(dāng)蒴果外表剛轉(zhuǎn)為褐色,達(dá)到形態(tài)成熟而尚未開裂時(shí)采收,帶入實(shí)驗(yàn)室用洗衣粉液清洗1min,漂洗干凈后,在超凈工作臺(tái)中用0.1%HgCl2消毒20～25min,無菌水沖洗3～4次,每次約2min,隨后將滅菌后的果莢用刀片切開,把種子撒播于培養(yǎng)基(Ⅰ)上,脫菌率可達(dá)90%以上。培養(yǎng)20～30d可看到種胚明顯膨大,由黃綠色轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色。70d后分化為石斛小苗。2.3繼代培養(yǎng)把上述獲得的小苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(Ⅰ)上,100d左右可發(fā)育成1.0～1.5cm高的小苗,若

4、每隔40～50d繼代1次,每次可增殖3～6倍。2.4壯苗與生根當(dāng)芽增殖到預(yù)定數(shù)量后,在保持一定的基數(shù)條件下,小于3.0cm的叢生苗繼續(xù)轉(zhuǎn)接在培養(yǎng)基(Ⅰ)上繼續(xù)增殖培養(yǎng),高于3.0cm的叢生苗轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基(Ⅱ)上進(jìn)行生根培養(yǎng),每叢2～3株苗,有利于生根生長。約60d后,生根率可達(dá)到100%。當(dāng)苗高5～8cm、每根根數(shù)3～5條、根長4～6cm,即可出瓶煉苗。3組培常見問題及其解決措施3.1常見問題鐵皮石斛組培苗生長緩慢,在適宜的培養(yǎng)條件下,種苗生產(chǎn)周期一般都需10個(gè)月以上,培養(yǎng)過程中,生長發(fā)育表現(xiàn)為增殖倍數(shù)較高,從而導(dǎo)致植株密度過大

5、,由此帶來以下2個(gè)生產(chǎn)問題:3.1.1污染。瓶苗在轉(zhuǎn)接之前,由于植株生長過密,致使被污染的母瓶難以剔除,造成交叉污染,污染率迅速擴(kuò)大。污染是植物組織培養(yǎng)中普遍存在的問題,也是影響組培苗生產(chǎn)成本最重要的因素之一,污染率每上升5個(gè)百分點(diǎn),生產(chǎn)成本將遞增10%以上,污染嚴(yán)重時(shí),會(huì)導(dǎo)致整個(gè)生產(chǎn)流程都難以正常運(yùn)轉(zhuǎn)11。3.1.2植株死亡。在高密度下,植株之間的競爭更加激烈,光照、營養(yǎng)物質(zhì)都難以滿足植物的正常需求,隨著植株的生長,有些植株開始死亡,出現(xiàn)“自疏現(xiàn)象”。3.2解決措施3.2.1及時(shí)轉(zhuǎn)接。要降低污染,除了一般措施,如接種室、緩沖

6、間、培養(yǎng)室及培養(yǎng)基貯藏室定期消毒,強(qiáng)化接種人員的“無菌操作”概念11外,及時(shí)轉(zhuǎn)接可同時(shí)減少以上問題的發(fā)生率。管理人員要隨時(shí)觀察種苗的生長狀況,在種苗的長勢較好、生長密度有利于觀察瓶苗是否已污染時(shí),盡快轉(zhuǎn)接,這樣既可以截?cái)辔廴驹?又可以給植物及時(shí)更換生長環(huán)境,提供新的營養(yǎng)物質(zhì),杜絕植株死亡現(xiàn)象。3.2.2控制基數(shù)。由于鐵皮石斛的增殖倍數(shù)較高,但生長緩慢。常規(guī)的接種方法導(dǎo)致當(dāng)苗高達(dá)到出瓶要求時(shí),繼代苗將增加幾十倍?，F(xiàn)有的接種工人要做到及時(shí)轉(zhuǎn)接,只能不斷增加勞動(dòng)力,由此帶來的結(jié)果是種苗基數(shù)越來越大,生產(chǎn)流程處于一個(gè)無序狀態(tài),要解決這

7、一矛盾,關(guān)鍵是控制好基數(shù),丟棄無效苗,優(yōu)選健壯植株繼代。4