粗糙鏈孢霉的雜交

《粗糙鏈孢霉的雜交》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、粗糙鏈孢霉的雜交一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模喝?、?shí)驗(yàn)材料：四、操作步驟：五、結(jié)果分析：二、實(shí)驗(yàn)原理：六、參考文獻(xiàn)：一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)對(duì)粗糙孢霉的賴氨酸缺陷型的野生型雜交所得后代的表現(xiàn)型的分析，了解順序排列的四分體的遺傳學(xué)分析方法，進(jìn)行有關(guān)基因的著絲粒距離的計(jì)算和作圖。二、實(shí)驗(yàn)原理：粗糙鏈孢霉(Neurosporacrass)屬于真菌中的子囊菌綱。它是進(jìn)行順序排列的四分體的遺傳學(xué)分析的好材料。粗糙鏈孢霉的菌絲體是單倍體(n=7)，每一菌絲細(xì)胞中含有幾十個(gè)細(xì)胞核。由菌絲頂端斷裂形成分生孢子。分生孢子有兩種，小型分生孢子中含有一個(gè)核，大型分生孢子中含有幾個(gè)核。分生孢子萌發(fā)成菌絲，可再生

2、成分生孢子，周而復(fù)始，這是粗糙鏈孢霉的無(wú)性生殖過(guò)程。粗糙鏈孢霉的菌株有兩種不同的接合型(matingtype)，用A、a或mt+、mt-表示，它們受一對(duì)等位基因控制。不同接合型菌株的細(xì)胞接合產(chǎn)生有性孢子，這過(guò)程稱為有性生殖。有性生可以通過(guò)兩種方式進(jìn)行：二、實(shí)驗(yàn)原理：1．當(dāng)菌絲在有性生殖用的雜交培養(yǎng)基上增殖時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生許多原子囊果，內(nèi)部附有產(chǎn)囊體，若另一接合型的分生孢子落在這原子囊果的受精絲上時(shí)，分生孢子的細(xì)胞核進(jìn)入受精絲，到達(dá)原子囊果的產(chǎn)囊體中，形成接合型基因的異核體。進(jìn)入產(chǎn)囊體中的分生孢子的核發(fā)生分裂，并進(jìn)入產(chǎn)囊菌絲中，被隔膜分成一對(duì)細(xì)胞形成鉤狀細(xì)胞，亦稱原子囊。

3、鉤狀細(xì)胞頂端細(xì)胞的二個(gè)核形成合子，合子核再進(jìn)行減數(shù)分裂，成為四個(gè)單倍體的核，就是四分體，再進(jìn)行一次有絲分裂，變成八個(gè)核，順序地排列在一個(gè)子囊中。原子囊果在受精后增大變黑，成熟為子囊果。一個(gè)子囊果葉集中著三十到四十個(gè)子囊，成熟的子囊孢子呈橄欖球狀，長(zhǎng)30-40微米，比3-5微米的分生孢子要大得多。子囊孢子如經(jīng)60℃處理30-60分鐘，便會(huì)發(fā)芽，長(zhǎng)出菌絲，再度開(kāi)始無(wú)性繁殖（圖10-1）。二、實(shí)驗(yàn)原理：圖10-1二、實(shí)驗(yàn)原理：2．不同接合型的菌標(biāo)的菌絲連接，兩種接合型的細(xì)胞核發(fā)生融合形成合子，產(chǎn)生子囊果。粗糙鏈孢霉的于囊孢子是單倍體細(xì)胞，由它發(fā)芽長(zhǎng)成的菌絲體也是單焙體。所

4、以一對(duì)等位摹因決定的性狀在雜交子代中就能分離。在粗糙鏈孢霉中；一次減數(shù)分裂產(chǎn)物包含在一個(gè)子囊中，所以很容易看到一次減數(shù)分裂所產(chǎn)生的四分體中一對(duì)基因的分離，這就直觀地證明基因的分離，并證明基因在染色體上。同時(shí)由于8個(gè)子囊孢子順序地排列在子囊中，這就可以測(cè)定著絲粒距離并發(fā)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)變(geneconversion)。若兩個(gè)親代菌株有某一遺傳性狀的差異，那么雜交所形成的每一子囊，必定有4個(gè)子囊孢子屬于一種類型，4個(gè)子囊孢子屬于另一類型，它們的分離比倒是1：1，而且子囊孢子按一定順序排列。如果這一對(duì)等位基因與予囊孢子的顏色或形狀有關(guān)，那么在顯微鏡下可以直接觀察到子囊孢子的不同

5、排列方式。`二、實(shí)驗(yàn)原理：本實(shí)驗(yàn)用賴氨酸缺陷型（記作Lys-）與野生型（記作Lys+）雜交，得到的子囊孢子分離為4個(gè)黑的（+），4個(gè)灰的（－）。黑的孢子是野生型的，賴氨酸缺陷型孢子成熟遲，所以呈灰色。根據(jù)黑色孢子和灰色孢子在子囊中的排列順序，可有6種子囊類型。二、實(shí)驗(yàn)原理：子囊型（1）和（2）的產(chǎn)生如圖。第一次減數(shù)分裂（M1）時(shí)，帶有Lys+的兩條染色單體移向一致，而帶有Lys-的兩條染色單體移向另一極。Lys+/Lys-這對(duì)基因在第一次減數(shù)分裂時(shí)分離，稱第一次分裂分離（firstdivisionsegregration）。第二次減數(shù)分裂（M2）時(shí)，每一染色單體相互

6、分開(kāi)，形成四分體，順序是++－－或－－++，再經(jīng)過(guò)一次有絲分裂，成為（1）和（2）子囊型。形成這兩種子囊型時(shí)，在著絲粒和基因?qū)ys+/Lys-間未發(fā)生過(guò)交換，是第一次分裂分離子囊。二、實(shí)驗(yàn)原理：下圖表示子囊型（3）和（4）的形成。由于Lys基因與著絲粒間發(fā)生了一個(gè)交換，Lys+/Lys-在第一次減數(shù)分離時(shí)沒(méi)有分離，到第二次減數(shù)分裂（M2）時(shí)，帶有Lys+的染色單體才和帶有Lys-的染色單體相互分開(kāi)，所以稱為第二次分裂分離（seconddivisionsegregration）。然后再經(jīng)一次有絲分裂，形成4個(gè)孢子對(duì)，順序是++－－++－－或－－++－－++。這是第二

7、次分裂分離子囊。二、實(shí)驗(yàn)原理：（5）和（6）子囊型的形成與（3）和（4）類似，也是兩個(gè)染色單體發(fā)生了交換，不過(guò)交換不是發(fā)生在第2條染色單體與第3條染色單體之間，而是發(fā)生1，3或2，4兩條染色單體之間，如下圖。二、實(shí)驗(yàn)原理：從上面的分析可知，第二次分裂分離子囊的出現(xiàn)，是由于有關(guān)的基因和著絲粒之間發(fā)生了一次交換的結(jié)果。第二次分裂子囊愈多，則有關(guān)基因和著絲粒之間的距離愈遠(yuǎn)。所以由第二次分裂分離子囊的頻度可以計(jì)算某一基因和著絲粒之間的距離，稱為著絲粒距離。因?yàn)榻粨Q在兩條染色單體之間發(fā)生而與另外兩條無(wú)關(guān)，而每發(fā)生一次交換，產(chǎn)生一個(gè)第二次分裂分離子囊，所以，求出第二次分裂分