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1、通腑益氣法對(duì)多器官功能障礙大鼠全身炎癥反應(yīng)的調(diào)控論文翁書和,梁俊雄,丁愛(ài)民,吳思慧【關(guān)鍵詞】通腑益氣法摘要:【目的】探討通腑益氣法及所組方藥對(duì)全身炎癥反應(yīng)的調(diào)控及防治多器官功能障礙(MODS)的作用?!痉椒ā縎D大鼠80只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、中藥低劑量治療組和中藥高劑量治療組;造模前1*!d高、低劑量組分別按60*!g/kg、30*!g/kg劑量連續(xù)給藥2次,空白及模型組給予等容量生理鹽水;給藥后第2天除空白組外其他3組參照文獻(xiàn)方法造模,12*!h后取血清測(cè)腫瘤壞死因子α(TNFα)及一氧化氮(NO)含量,并對(duì)主要臟器
2、進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。【結(jié)果】模型組TNFα與NO水平升高.freelultipleorgansdysfunctionsyndrome,MODS)是指各種原因如感染、休克等引起的2個(gè)或2個(gè)以上系統(tǒng)或器官的功能障礙或衰竭的一組病變。迄今治療效果欠佳,4個(gè)系統(tǒng)或器官功能障礙者,死亡率接近100%,是當(dāng)前危重醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的重要課題。目前認(rèn)為腸道屏障功能障礙是引起細(xì)菌和/或毒素移位,激發(fā)全身炎癥反應(yīng),導(dǎo)致MODS的可能因素之一[1]。本病中醫(yī)認(rèn)為是陰陽(yáng)逆亂,臟腑衰竭導(dǎo)致的陽(yáng)明腑實(shí)證[2]?;谏鲜稣J(rèn)識(shí)以及結(jié)合臨床中某些成功的治療經(jīng)驗(yàn),我們
3、試圖通過(guò)建立大鼠MODS模型,以通腑益氣法組方,觀察該組方對(duì)全身炎癥反應(yīng)的調(diào)控,評(píng)價(jià)其對(duì)MODS的防治作用。1材料和方法11動(dòng)物與藥物動(dòng)物:SD大鼠80只,雌雄各半,體重70~100*!g,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;藥物:由生大黃、生梔子、蚤休、厚樸、人參、丹參、桔梗和黃芩組成。劑量比例為2∶2∶2∶2∶1∶6∶10∶10,將上藥煎制成濃度為2*!kg/L和4*!kg/L的藥液各80*!mL備用。12試劑與儀器試劑:酵母多糖A(ZymosanA),美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品,規(guī)格5*!g/瓶,批號(hào)Z4250;一氧化氮(NO)
4、試劑盒,南京建成生物工程研究所生產(chǎn);腫瘤壞死因子α(TNFα)試劑盒由解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免所提供;儀器:Eppendof半自動(dòng)生化檢測(cè)儀(型號(hào)為EF6124);SN695B型γ計(jì)數(shù)器和UV754分光光度儀,由廣州中醫(yī)藥大學(xué)核醫(yī)學(xué)教研室及第一附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心提供。13分組與給藥將80只大鼠按性別分層隨機(jī)分為模型組、中藥低劑量治療組(低劑量組)、中藥高劑量治療組(高劑量組)和空白對(duì)照組,每組20只,雌雄各半;中藥低劑量組按30*!g/kg、高劑量組按60*!g/kg分別灌胃給藥(灌藥容量為15*!mL/kg),造模前1*!天
5、間隔8*!h共給藥2次,造模后不再給藥;模型組和空白組給予等容量生理鹽水。14造模與取樣參照胡森等方法造模[3],把4*!g酵母多糖A與50*!mL滅菌石蠟油混合,高頻振蕩30*!min,超聲振蕩6*!h,制成造模用混懸液。末次給藥后所有動(dòng)物均禁食、不禁水,除空白組外,其他各組動(dòng)物均按1*!mg/kg劑量腹腔注射上述混懸液,注射后用消毒棉簽按壓針口2*!min,同時(shí)按摩腹部數(shù)次。造模后自由進(jìn)食,4*!h后,各組動(dòng)物腹腔注射生理鹽水1*!mL,以補(bǔ)償大鼠取樣后丟失的血容量。按照“動(dòng)物MODS時(shí)器官功能障礙分期診斷及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)”評(píng)價(jià)模
6、型成功與否。取樣:所有動(dòng)物在造模前12*!h用毛細(xì)管(直徑1*!mm)自眼眶后靜脈叢取血1次(約15*!mL),造模后12*!h摘眼球取血(約15mL),血液標(biāo)本離心(3000*!r/min)后,取血清保存于-170℃下待檢;各組大鼠末次采血后立即處死,取心、肝、肺、腎、腸等主要臟器,用體積分?jǐn)?shù)為10%的市售福爾馬林固定,進(jìn)行組織病理學(xué)檢查,觀察損傷程度(包括組織細(xì)胞的排列、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度)。15指標(biāo)與方法TNFα和NO含量,分別用放射免疫法和比色法測(cè)定。16統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料用(±s)表示,兩組比較用t檢驗(yàn),多組比較用F檢驗(yàn)
7、,組間兩兩比較用q檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示,兩組比較用χ2檢驗(yàn)和直接概率法檢驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)均用SPSS100統(tǒng)計(jì)軟件處理。2結(jié)果21各組動(dòng)物臟器病理檢驗(yàn)結(jié)果模型組動(dòng)物臟器全部出現(xiàn)損傷,其中3個(gè)或3個(gè)以上臟器損傷者占80%,2個(gè)者占20%;藥物組則以1個(gè)臟器損傷多見(jiàn),占25%,2個(gè)或2個(gè)以上者占10%,無(wú)損傷者占65%,與模型組比較損傷率降低(P<001);空白組無(wú)臟器損傷;低、高劑量?jī)山M間臟器損傷無(wú)顯著性差異(P>005),結(jié)果見(jiàn)表1。表1各組動(dòng)物臟器受累數(shù)目及分布N(p/%)(略)22各組血清TNFα和NO含量的變化表2結(jié)果顯示:
8、模型組血清TNFα與NO水平升高,與空白組比較有顯著性差異((P<005);中藥高、低劑量組均能降低血清TNFα與NO水平升高,與模型組比較有顯著性差異(P<005),但未見(jiàn)明顯量效關(guān)系。表2通腑益氣法中藥對(duì)MODS大鼠血清TNFα和NO濃度的影響(略)3討論近