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1、黃芪多糖對(duì)大鼠損傷坐骨神經(jīng)再生的作用研究桑秋凌,魏壯,許則民,劉飆,劉浩宇,李滿,尹維田【摘要】 目的觀察黃芪多糖(APS-P)對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后神經(jīng)再生的影響。方法建立大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型,將雌性NCV)、有髓神經(jīng)纖維數(shù)目在各時(shí)間點(diǎn)上黃芪多糖組均優(yōu)于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論黃芪多糖可以促進(jìn)損傷神經(jīng)的再生。【關(guān)鍵詞】黃芪多糖周圍神經(jīng)損傷再生 Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofAstragaluspolysaccharidesonnerveregeneration.Methods24femaleNCV),numbersofmye
2、linatednerveepointsthanthoseofcontrolgroup(P0.05).ConclusionAstragaluspolysaccharideshaseffectofpromotingregenerationofinjuriedperipheralnerve. Keyg/kg腹腔注射麻醉,分別在大鼠左、右兩側(cè)股外側(cè)肌間隙進(jìn)入顯露雙側(cè)坐骨神經(jīng),在坐骨結(jié)節(jié)下1.0cm處切斷神經(jīng)干,取同種異體鼠腹主動(dòng)脈橋接坐骨神經(jīng),神經(jīng)遠(yuǎn)近端之間留有2.0mm間隙,以9-0顯微縫線制成小間隙橋接雙側(cè)坐骨神經(jīng)損傷模型。 術(shù)后第1天開始用藥,實(shí)驗(yàn)組給予腹腔注射黃芪多糖
3、20mg/kg,對(duì)照組給予同體積生理鹽水。1次/d連續(xù)給藥28d?! ?.3檢測(cè)項(xiàng)目與檢測(cè)方法在4,8,12周時(shí)分別觀察大白鼠的下列指標(biāo)?! ?.3.1一般情況攻擊性、步態(tài)、足趾與足跟潰瘍的發(fā)生、發(fā)展以及恢復(fù)情況、肌肉的萎縮與恢復(fù)情況、局部感染和死亡情況?! ?.3.2神經(jīng)電生理檢測(cè)利用MedtronicKeypoint肌電圖儀,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雙側(cè)坐骨神經(jīng)均作檢測(cè)。方法:1%氯胺酮腹腔麻醉動(dòng)物后,無(wú)菌消毒術(shù)野,俯臥位分別暴露坐骨神經(jīng)總干,采用同芯針電極刺入大鼠比目魚肌肌腹內(nèi)作為記錄電極,以平行刺激電極分別于吻合口近側(cè)坐骨結(jié)節(jié)水平及遠(yuǎn)側(cè)坐骨神經(jīng)分支處給以超強(qiáng)刺激(電流為50mA)
4、,通過潛伏期差儀器自動(dòng)計(jì)算出運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MCV)。室溫保持24℃?! ?.3.3組織學(xué)觀察各組動(dòng)物切取吻合口遠(yuǎn)端神經(jīng),經(jīng)固定脫水包埋后分別作切片HE染色,光鏡觀察非神經(jīng)細(xì)胞、無(wú)髓和有髓神經(jīng)軸突在神經(jīng)再生過程中的變化。通過HPIAS-1000高清晰度彩色病理圖文分析系統(tǒng)。 1.3.4透射電鏡觀察取吻合口遠(yuǎn)端3mm神經(jīng)按電鏡標(biāo)本常規(guī)固定、脫水、包埋后作超薄切片。FEI公司生產(chǎn)(飛利浦公司)的TEAIG2透射電子顯微鏡觀察再生神經(jīng)的超微結(jié)構(gòu)?! ?.3.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)分析比較,結(jié)果以±s表示,P0.05統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著?! ?結(jié)果 2.1大體觀察
5、 術(shù)后兩組動(dòng)物均有后肢腫脹,步態(tài)不穩(wěn),體毛稀疏光澤變差,足趾潰瘍,足趾脫落改變。但實(shí)驗(yàn)組鼠一般狀態(tài)、攻擊性較對(duì)照組恢復(fù)快。足趾潰瘍和脫落數(shù)目實(shí)驗(yàn)組(3鼠4側(cè))要少于對(duì)照組(5鼠7側(cè))。取材時(shí)見兩組動(dòng)物神經(jīng)吻合口均愈合良好,無(wú)神經(jīng)瘤形成,實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)表面血管較豐富,神經(jīng)與周圍組織輕度黏連。見圖1?! ?.2肌電圖檢測(cè)結(jié)果 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV,m/s)4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組為(28.95±5.30)m/s,對(duì)照組為(15.35±5.78)m/s,t值2.896,P0.05;8周時(shí)實(shí)驗(yàn)組為(40.20±6.23)m/s,對(duì)照組為(25.95±4.34)m/s,t值2.830,P0
6、.05;12周時(shí)實(shí)驗(yàn)組為(49.63±8.61)m/s,對(duì)照組為(36.90±4.721)m/s,t值2.752,P0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著?! ?.3組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果 光鏡下術(shù)后12周縱切片(40×)可見實(shí)驗(yàn)組(圖2)有髓神經(jīng)纖維較多,排列規(guī)則;對(duì)照組(圖3)有髓神經(jīng)纖維數(shù)量較少。圖像分析再生有髓神經(jīng)纖維數(shù)目:術(shù)后8周、12周實(shí)驗(yàn)組〔8周為(149.00±22.16),12周為(180.14±21.35)〕優(yōu)于對(duì)照組〔8周為(111.86±22.41)12周為(159.57±20.72)〕。P0.05,統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著?! ?.4電鏡觀察結(jié)果 術(shù)后12周實(shí)驗(yàn)組(圖4,6
7、)髓鞘較厚,板層致密,明暗板清晰。對(duì)照組(圖5,7)髓鞘較薄,扭曲變形明顯,板層疏松,點(diǎn)狀分離,成熟度欠佳?! ?討論 周圍神經(jīng)損傷后再生是一個(gè)涉及多因素的復(fù)雜過程。如何促進(jìn)神經(jīng)再生,提高神經(jīng)損傷后的治療效果,仍然是眾多醫(yī)者孜孜探索的重點(diǎn)。中藥及其提取物來源廣泛,價(jià)格低廉,臨床應(yīng)用歷史久遠(yuǎn),作用機(jī)制多途徑,有著不可輕視的作用。黃芪多糖(APS)作為黃芪的主要有效成分,對(duì)機(jī)體免疫功能有廣泛的調(diào)節(jié)作用〔1〕。本次實(shí)驗(yàn)觀察到其對(duì)周圍神經(jīng)損傷后再生有比較積極的影響?! ?.1黃芪多糖促進(jìn)周圍神經(jīng)再生效果及作用機(jī)制本次實(shí)驗(yàn)首先從整體上