三葉青葉指紋圖譜研究及8種酚類成分含量測定

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1、三葉青葉指紋圖譜研究及8種酚類成分含量測定[摘要]采用超高效液相色譜建立三葉青葉指紋圖譜,并同時測定8種酚類成分(新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異葒草苷、葒草苷、牡荊素鼠李糖苷、牡荊苷、異牡荊苷)的含量,為三葉青葉質(zhì)量評價提供依據(jù)。采用UHPLC法,WelchUHPLCUltimateXB-C18色譜柱(4.6mmX150mm,2.7um),流動相為乙腈-0.1%甲酸(含5%甲醇)水梯度洗脫,流速0.4mL?min-l,柱溫30"C,采用國家藥典委員會“相似度評價軟件2004AB”處理分析,建立41批不同產(chǎn)地三葉青葉的指紋圖譜

2、,共標(biāo)定15個共有峰并對不同產(chǎn)地進行聚類分析,然后選擇其屮8個主要的酚類成分作為定量指標(biāo),建立UHPLC同時測定8種主要酚類成分含量的方法,經(jīng)方法學(xué)驗證該研宂建立的三葉青葉指紋圖譜和8種酚類成分含量測定方法簡便有效、靈敏、準(zhǔn)確,可為綜合評價三葉青葉的質(zhì)量提供參考。[關(guān)鍵詞]三葉青葉;UHPLC;指紋圖譜;含量測定[Abstract]Anovelmethodcombiningultra-highperformanceliquidchromatography(UHPLC)fingerprintandsimultaneousqua

3、ntitativeanalysisofeightphenoliccomponentswasdevelopedandvalidatedforqualityevaluationofTetrastigmahemsleyanumleaves.Forfingerprintanalysis,15peakswereselectedasthecommonpeakstoevaluatethesimilaritiesamong41batchesofT.hemsleyanumleavescollectedfromdifferentregions.

4、Additionally,simultaneousquantificationofeightmarkers,includingneochlorogenicacid,chlorogenicacid,cryptochlorogenicacid,isoorientin,orientin,vitexin-2-O-rhamnoside,vitexinandisovitexin,wasperformedandtheobtaineddatademonstratedthatourmethodhasachieveddesiredlineari

5、ty,precisionandaccuracy.ClusteringstatisticalanalysiswasfurtherapplicationinT.hemsleyanumleavesfromdifferentregions.Theresultsindicatedthatnewapproachconbineultra-highperformanceliquidchromatography(UIIPLC)fingerprintandsimultaneousquantitativeanalysisofeightphenol

6、iccomponentswasapplicableinqualitycontrolofT.hemsleyanumleaves.[Keywords]Tetrastigmahemsleyanumleaves;UHPLC;fingerprintanalysis;qualitycontroldoi:10.4268人jcmm20162115三r青是我國特有的珍稀藥用植物,為葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤TetrastigmahemsleyanumDielsetGilg,以塊根或者全草入藥,具有清熱解毒、祛風(fēng)化痰、活血止痛的功效[1],并

7、廣泛用于多種國藥準(zhǔn)字中成藥,如排石利膽膠囊、華佗風(fēng)痛寶、結(jié)石康膠囊等。前期課題組己經(jīng)針對三葉青的塊根進行了質(zhì)量評價[2-4],但由于三葉青對生長環(huán)境的要求較為苛刻,在自然條件下生長緩慢,加上近年來針對三葉青塊根人為無節(jié)制的采挖,野生的三葉青已經(jīng)成為瀕危藥用植物[5],目前多數(shù)三葉青藥材的使用多為塊根部位,對三葉青葉資源的開發(fā)利用的報道較少,而現(xiàn)代藥理研宄表明三葉青葉也具有抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱、抗腫瘤、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫[6-7]等作用,同時也是結(jié)石康膠囊等中成藥的直接原料,因此為了加大三葉青資源的應(yīng)用,本文采用UHPLC建立三葉青

8、葉指紋圖譜,并同時測定8種主要酚類成分(新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異葒草苷、葒草苷、牡荊素鼠李糖苷、牡荊苷、異牡荊苷)的含量,為三葉青葉質(zhì)量評價提供依據(jù)。1材料安捷倫LC1290超高效液相色譜儀(安捷倫公司);CPA225D型1/10萬分析天平(德國Sartorius公司);KQ-500

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