地錦草槲皮素提取工藝研究

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1、地錦草槲皮素提取工藝研究周玉平，吳玉娣，張紀(jì)興【摘要】目的對地錦草的提取工藝進(jìn)行研究。方法采用正交試驗(yàn)法，以槲皮素的含量為考察指標(biāo)進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果用地錦草重量10倍量的體積分?jǐn)?shù)為75%的乙醇作為提取溶劑，提取2h，共提取3次為最佳方案。結(jié)論提取方法操作簡單、方便，為地錦草槲皮素提取工藝的進(jìn)一步研究提供了依據(jù)。【關(guān)鍵詞】地錦草；槲皮素；提取工藝；正交試驗(yàn)　　Abstract:ObjectiveOptimumextractiontechnologyoftriterpeneacidsofmedicineHerbaeuphorbiaeHumifusaeentde

2、signoftriterpeneacidsofherbaeuphorbiaehumifusaeadeusingorthogonalfromL9（34）.Thefourfactors，thedataofalcoholconcentration，extractivetime;addingsolventvolumeandextractivetimeseachofthefourfactorsentresultsshoumextractivetechnologyofcoarsepoifusaeaddingten-timevolumeof75%ethanoland

3、thenrefluxextractingfor2.0handextracting3timesethodissimple，convenient,andthisextractionprocedureishelpfulforfurtherstudyofextractiontechnologyoftriterpeneacidsofHerbaeuphorbiaeHumifusae.　　Keyifusae;triterpeneacids;extractivetechnology;orthogonaltest　　地錦草HerbaeuphorbiaeHumifusae

4、為大戟科雙子葉一年生草本植物，全草入藥，具有涼血止血、清熱止痢、通乳汁、清熱解毒、利濕退黃、涼血止血等功效，用于治療痢疾、外傷出血、乳汁不足、腸炎、咳血、便血、崩漏等癥〔1〕。地錦草主要含槲角素甙及素、山素甙及素、地錦草素的黃酮類化合物〔2〕，藥理研究證實(shí)槲皮素、山柰素等黃酮類化合物是地錦草抗菌、止血、抗氧化的主要有效成分，地錦草煎劑、醇提取液及地錦草素均有抗菌止血等作用〔3〕。為研究地錦草的有效成分，探索地錦草槲皮素提取的最適條件，本文以槲皮素為考察指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)方法對地錦草槲皮素提取工藝進(jìn)行了研究?！　?儀器與試藥　　　　高效液相色譜儀：LC-

5、10Avp紫外檢測器，LC-10ATvp泵（日本島津公司）；FA1104N型電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇富華儀器有限公司）；GZX-9240MBE型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）?！　　　￠纹に貙φ掌?008129304，中國藥品生物制品檢定所)；地錦草，為HerbaeuphorbiaeHumifusae的干燥全草；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純?！　?方法與結(jié)果　　2.1正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)　　　　依據(jù)對地錦草醇提工藝的預(yù)實(shí)驗(yàn)情況及槲皮素的理化性質(zhì)〔4〕，確定以提取溶劑乙醇的體積分?jǐn)?shù)、提

6、取時(shí)間、提取溶劑乙醇用量以及提取的次數(shù)為考察因素，每個(gè)因素設(shè)立3個(gè)水平(見表1)。采用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表，以地錦草提取物中槲皮素的含量為考察指標(biāo)進(jìn)行試驗(yàn)?！　?.2樣品溶液的制備　　　　取地錦草藥材粗粉精密稱取9份，每份5.0g，按L9(34)組合試驗(yàn)條件進(jìn)行加熱回流提取，合并濾液，備用?！　?.3槲皮素的含量測定方法　　表1正交試驗(yàn)因素水平表（略）　　Tab.1Factorsandlevels　　2.3.1色譜條件島津ODS色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)；流動相：乙腈-20.4%磷酸(體積比40∶60)，流速1.0mL·min-1，

7、檢測波長370nm。　　2.3.2對照品溶液制備精密稱定槲皮素對照品適量，加甲醇溶解，制成每1mL含0.1mg槲皮素的對照品貯備液。精密吸取1mL貯備液，置10mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，即為對照品溶液?！　?.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取對照品溶液分別進(jìn)樣3、6、9、12、15、18μL，測定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，槲皮素進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為:Y=3815.96X-5.61，r=0.9996。槲皮素的質(zhì)量濃度在0.03～0.18μg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系〔5〕?！　?.3.4樣品測定取上述按L9(34)組合試驗(yàn)條件進(jìn)

8、行試驗(yàn)所制備的樣品液，過濾，取濾液用高效液相法進(jìn)行測定，并計(jì)算各種提取條件下槲皮素的含量〔6〕