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1、本品只能用于科學研究,不能用于臨床檢測本品于GMP標準下生產(chǎn)人外周血淋巴細胞分離液說明書【包裝規(guī)格】200ml/瓶【貨號】LTS1077-1【實驗前準備】A.適用儀器最大離心力可達1200g的水平轉(zhuǎn)子離心機B.耗材產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號產(chǎn)地15ml離心管散裝339650美國NUNC15ml離心管架裝339651美國NUNC50ml離心管散裝339652美國NUNC50ml離心管架裝339653美國NUNC無菌膠頭滴管或塑料滴管【檢驗方法】全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。首先根據(jù)樣本量大小,分以下幾種情況:一、
2、使用15ml離心管時:情況A:血液樣本量小于3ml時,實驗方法如下:1.取一支15ml離心管,加入3ml分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上,400-650g,離心20-30min(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果)。3.離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞層到另一15ml離心管中,向所得離心管中
3、加入10ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細胞。5.250g,離心10min。本品只能用于科學研究,不能用于臨床檢測本品于GMP標準下生產(chǎn)6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118)重懸所得細胞。8.250g,離心10min。9.重復6、7、8,棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。情況B:血液樣本量為3-6ml時,實驗方法如下:1.取一支15ml離心管,先加入與血液樣本等量的分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上,450-650g,離心20-30min(注:根據(jù)
4、血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果,但最大離心力最好不超過1200g)。3.離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞層到另一15ml離心管中,向所得離心管中加入10ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細胞。5.250g,離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118)重懸所得細胞
5、。8.250g,離心10min。9.重復6、7、8,棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。二、使用50ml離心管時:情況A:血液樣本量為6-10ml時,實驗方法如下:1.取一支50ml離心管,先加入與血液樣本等量的分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上,500-950g,離心20-30min(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果,但最大離心力最好不超過1200g)。3.離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿
6、層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞層到另一15ml離心管中,向所得離心管中加入10ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細胞。5.250g,離心10min。本品只能用于科學研究,不能用于臨床檢測本品于GMP標準下生產(chǎn)6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118)重懸所得細胞。8.250g,離心10min。9.重復6、7、8,棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞。情況B:血液樣本量為10-20ml時,實驗
7、方法如下:1.取一支50ml離心管,先加入與血液樣本等量的分離液。2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上,500-1100g,離心20-30min(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果,但最大離心力最好不超過1200g)。3.離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞層到另一15ml離心管中,向所得離心管中加入10m
8、l清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細胞。5.250g,離心10min。6.棄上清。7.用吸管以5ml清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118)重懸所得細胞。8.250g,離心10min。9.重復6、7、8,棄上清后以0.5ml后續(xù)實驗所需相應液體重懸細胞?!咀⒁馐马棥?/p>