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《沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)報(bào)告材料》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)與顏色反應(yīng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆砧b定蛋白質(zhì)的原理和方法。熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)，進(jìn)一步熟悉蛋白質(zhì)的有關(guān)反應(yīng)。二、實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)分子中某種或某些集團(tuán)可與顯色劑作用，產(chǎn)生顏色。不同的蛋白質(zhì)由于所含的氨基酸不完全相同，顏色反應(yīng)亦不完全相同。顏色反應(yīng)不是蛋白質(zhì)的專一反應(yīng)，一些非蛋白物質(zhì)也可產(chǎn)生同樣的顏色反應(yīng)，因此不能根據(jù)顏色反應(yīng)的結(jié)果來(lái)決定被測(cè)物是否為蛋白質(zhì)。另外，顏色反應(yīng)也可作為一些常用蛋白質(zhì)定量測(cè)定的依據(jù)。蛋白質(zhì)是親水性膠體，在溶液中的穩(wěn)定性與質(zhì)點(diǎn)大小、電荷、水化作用有關(guān)，但其穩(wěn)定性是有條件的，相對(duì)的。如果條件發(fā)生了變化，破壞了蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，蛋白質(zhì)就會(huì)從溶液中沉淀
2、出來(lái)。三、實(shí)驗(yàn)儀器1、吸管2、滴管3、試管4、電爐5、ph試紙6、水浴鍋7、移液管四、實(shí)驗(yàn)試劑1、卵清蛋白液：雞蛋清用蒸餾水稀釋10-20倍，3-4層紗布過(guò)濾，濾液放在冰箱里冷藏備用。2、0.5%苯酚：1g苯酚加蒸餾水稀釋至200ml。3、millon’s試劑：40g汞溶于60ml濃硝酸（水浴加溫助溶）溶解后，冷卻，加二倍體積的蒸餾水，混勻，取上清夜備用。此試劑可長(zhǎng)期保存。4、尿素晶體5、1%cuso：1gcuso晶體溶于蒸餾水，稀釋至100ml446、10%naoh：10gnaoh溶于蒸餾水，稀釋至100ml7、濃硝酸8、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于95%的乙醇
3、并稀釋至100ml.9、冰醋酸10、濃硫酸11、飽和硫酸銨溶液：100ml蒸餾水中加硫酸銨至飽和。12、硫酸銨晶體：用研缽研成碎末。13、95%乙醇。14、醋酸鉛溶液：1g醋酸鉛溶于蒸餾水并稀釋至100ml15、氯化鈉晶體16、10%三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于蒸餾水中并稀釋至100ml17、飽和苦味酸溶液：100ml蒸餾水中加苦味酸至飽和。18、1%醋酸溶液。五、實(shí)驗(yàn)步驟蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)（一）米倫（millon’s）反應(yīng)1、苯酚實(shí)驗(yàn)：取0.5%苯酚溶液1ml于試管中，加millon’s試劑0.5ml，電爐小心加熱觀察顏色變化。2、蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)：取2ml蛋白液，加mill
4、on’s試劑0.5ml，出現(xiàn)白色的蛋白質(zhì)沉淀，小心加熱，觀察現(xiàn)象。（二）雙縮脲反應(yīng)1、取少量尿素晶體放在干燥的試管中，微火加熱熔化，至重新結(jié)晶時(shí)冷卻。然后加10%naoh溶液1ml，搖勻，再加2-4滴1%cuso4溶液，混勻，觀察現(xiàn)象。2、取蛋白液1ml，加10%naoh溶液1ml，搖勻，再加2-4滴1%cuso4溶液，混勻，觀察現(xiàn)象。（三）黃色反應(yīng)取一支試管，加入1ml蛋白液及濃硝酸5滴。加熱，冷卻后注意顏色變化。然后再加入10%naoh溶液1ml，觀察顏色有什么變化。（四）茚三酮反應(yīng)取蛋白液1ml于試管中，加4-8滴茚三酮溶液，加熱至沸，即有藍(lán)紫色出現(xiàn)。蛋白質(zhì)的沉淀（一
5、）蛋白質(zhì)的鹽析作用1、試管中加蒸餾水3ml，加固體硫酸銨至飽和。另一支試管加蛋白液2ml，再加入飽和硫酸銨溶液2ml，搖勻靜置觀察現(xiàn)象。2、將上述混合液過(guò)濾。向?yàn)V液中逐漸加入少量固體硫酸銨，直至飽和為止，此時(shí)析出為清蛋白。再加入少量蒸餾水，觀察沉淀是否溶解。（二）有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)試管中加蛋白液1ml，加晶體氯化鈉少許，溶解后加95%乙醇3ml,搖勻，觀察現(xiàn)象。（三）重金屬鹽與某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì)1、取試管2支，各加蛋白液2ml，一支管中滴加1%醋酸鉛溶液，另一支管中滴加1%硫酸銅溶液，至有沉淀產(chǎn)生。2、取一支試管加蛋白液2ml，再加入10%三氯乙酸1ml，充分混勻，觀察結(jié)
6、果。（四）生物堿試劑沉淀蛋白質(zhì)取一支試管，加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴，再加飽和苦味酸數(shù)滴，觀察現(xiàn)象。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)（一）米倫（millon’s）反應(yīng)1、苯酚實(shí)驗(yàn)：溶液即出現(xiàn)玫瑰紅色。2、蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)：出現(xiàn)白色的蛋白質(zhì)沉淀，小心加熱后凝固的蛋白質(zhì)出現(xiàn)紅色。（二）雙縮脲反應(yīng)1、有紫色出現(xiàn)。2、溶液有藍(lán)紫色出現(xiàn)（三）黃色反應(yīng)先有黃色沉淀生成，加入10%naoh溶液1ml后顏色變?yōu)殚冱S色。（四）茚三酮反應(yīng)有藍(lán)紫色出現(xiàn)。蛋白質(zhì)的沉淀（一）蛋白質(zhì)的鹽析作用1、有蛋白析出。2、有蛋白質(zhì)析出，加水后可復(fù)溶。（六）有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)取一試管加蛋白液1ml，，加入晶體氯化鈉少許
7、，待溶解后再加95%乙醇3ml,搖勻，觀察現(xiàn)象（七）重金屬鹽與某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì)取試管2支，各加蛋白液2ml，一支管中滴加1%醋酸鉛溶液，另一支管中滴加1%硫酸銅溶液，至有沉淀產(chǎn)生。（八）生物堿試劑沉淀蛋白質(zhì)取一支試管，加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴，再加飽和苦味酸和鞣酸數(shù)滴，觀察現(xiàn)象。七、實(shí)驗(yàn)分析蛋白質(zhì)分子中某種或某些集團(tuán)可與顯色劑作用，產(chǎn)生顏色。不同的蛋白質(zhì)由于所含的氨基酸不完全相同，顏色反應(yīng)亦不完全相同。篇二：自由沉淀實(shí)驗(yàn)報(bào)告六、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與整理1、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄沉降柱直徑水樣來(lái)源柱高靜置沉淀時(shí)間/min表
