重金屬對貝類毒性效應(yīng)的研究進(jìn)展

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1、重金屬對貝類毒性效應(yīng)的研究進(jìn)展摘要本次研究重金屬對貝類毒性效應(yīng),其中包括鎘和汞對貝類的毒性效應(yīng)。研究表明,鎘對貝類重金屬鎘能夠誘導(dǎo)SOD、CAT、GSH-PX三種氧化酶的活性上升,而脅迫時間超過一定范圍后,三種酶活性均會逐下降。在研究鎘對貝類的毒性影響時,主要著重抗氧化酶系活性的影響和免疫功能的探索。探明了金屬硫蛋白、超氧化物歧化酶和溶菌酶基因的表達(dá)對Cd、Hg、弧菌復(fù)合脅迫的響應(yīng)情況;檢測了Cd、Hg導(dǎo)致的血細(xì)胞損傷,初步闡明了四角蛤蜊對Cd、Hg脅迫的響應(yīng)機制。關(guān)鍵詞重金屬抗氧化酶系統(tǒng)脅迫免疫AbstractThestudyon

2、thetoxiceffectofheavymetalinshellfish,includingthetoxiceffectsofcadmiumandmercuryonshellfish.Researchshowsthattheriseofshellfish,cadmiumcadmiumcaninduceSOD,CAT,GSH-PXthreekindsofenzymeactivity,andthestresstimeexceedsacertainrange,threekindsofenzymeactivitywilldecline.I

3、nthestudyofeffectsofcadmiumonshellfishtoxicity,exploretheeffectsandimmunefunctionismainlytheactivityofantioxidantenzymes.Provenmetallothionein,superoxideandlysozymegeneexpressioninresponsetoCd,Hg,Vibriocompositestress;detectionofbloodcellinjury,causedbyHgCd,theresponse

4、mechanismoffourtoCd,clamHgstress.KeywordsHeavymetalAntioxidantenzymesystemCoercionImmune1.鎘對貝類毒性效應(yīng)的研究進(jìn)展1.1鎘脅迫對貝類抗氧化酶系活性的影響取經(jīng)重金屬鎘脅迫實驗后的青蛤血清,用于超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性測定。1.1.1過氧化氫酶(CAT)活性測定過氧化氫酶(CAT)活性采用鉬酸銨中止法,以每毫升血清或每毫克組織蛋白每秒鐘分解1μmol的H202的量為一個活力單位。1.1.2超氧化物歧化酶(SOD)活性測定

5、超氧化物歧化酶(SOD)活性測定原理為:通過使用黃嘌呤/黃嘌吟氧化酶體系生成超氧化物陰離子。加入發(fā)色基團(tuán),發(fā)色基團(tuán)可被由上述體系產(chǎn)生的氧化物陰離子還原成為水溶性的黃色甲染料,這樣SOD活性通過抑制發(fā)生基團(tuán)的還原來測定。在本反應(yīng)體系中SOD抑制率達(dá)50%時所對應(yīng)的酶量為一個SOD活力單位。1.1.3受到鎘脅迫后氧化酶的活性變化受到鎘脅迫后,青蛤血清和肝臟中的抗氧化酶SOD、CAT和GPx的活性可在短期內(nèi)達(dá)到峰值,這表明Cd在青蛤體內(nèi)富集能對機體造成氧化壓力,同時有大量活性氧產(chǎn)物的產(chǎn)生,這種刺激能使青蛤體內(nèi)迅速合成抗氧化酶,來進(jìn)行清除和

6、轉(zhuǎn)運活性氧產(chǎn)物。之后隨著暴露時間的延長,抗氧化酶系活力整體逐漸下降,即青蛤清除活性氧、抵御外環(huán)境損傷的能力降低。在個別時間點,實驗組酶活力顯著低于對照組,表明此時抗氧化酶活力受到了抑制。貝類處于對逆境脅迫具有高易感性的不穩(wěn)定狀態(tài),此時機體的免疫系統(tǒng)遭到破壞而易于遭受來自外界的病害。1.1.4谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性測定谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)可以催化GSH產(chǎn)生GSSG,而谷胱甘肽還原酶可以利用NADPH催化GSSG產(chǎn)生GSH,通過檢測NADPH的減少量就可以計算出谷胱甘肽過氧化物酶的活力水平。規(guī)定為每0.1ml血清在37

7、°C反應(yīng)5分鐘,或者每毫克蛋白質(zhì),每分鐘扣除非酶反應(yīng)的作用,使反應(yīng)體系中GSH濃度降低lumol/L為一個酶活力單位。1.2鎘脅迫對貝類免疫活性的影響1.2.1貝類的免疫防御機制軟體動物具有體液免疫和細(xì)胞免疫功能,體液免疫系統(tǒng)由溶酶體酶,凝集素和抗菌肽等組成。細(xì)胞免疫在貝類免疫過程中起著主要作用.血細(xì)胞的吞噬作用是整個防御系統(tǒng)最主要的過程,由識別,粘連,攝取,破壞和清除外源細(xì)胞等不同階段組成。貝類血細(xì)胞在營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運,傷口修復(fù),去除代謝產(chǎn)物或污染物等方面起著重要作用。貝類血細(xì)胞可以細(xì)分為兩種主要類型:透明細(xì)胞和顆粒細(xì)胞。顆粒細(xì)胞主

8、要負(fù)責(zé)吞噬作用,它們又可以分為噬酸性顆粒細(xì)胞,噬堿性顆粒細(xì)胞和中性顆粒細(xì)胞。貝類血細(xì)胞可以利用溶酶體酶和呼吸爆發(fā)吞噬外源細(xì)胞和顆粒。貝類血細(xì)胞對特定刺激的呼吸爆發(fā)反應(yīng)與哺乳動物的噬菌細(xì)胞類似。1.2.2鎘對貝類免疫功能的影響貝類血細(xì)胞

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