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1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃磷鎢酸染色后材料是白色 磷鎢酸用水或磷酸緩沖液配制成1%左右的溶液,用滴管一滴染色液在制好樣品的銅網(wǎng)上,1~2分鐘后,用剪成尖角的濾紙吸去染色液。再滴一滴純水在銅網(wǎng)上,用濾紙吸去,反復(fù)兩三次,這樣是為了洗去多余的磷鎢酸,然后靜置干燥。然后就可以用電鏡觀察了。 磷鎢酸中的重原子相對(duì)于有機(jī)分子中的碳?xì)溲醯容p原子來(lái)說(shuō),更能阻擋電子。所以,有磷鎢酸吸附的地方在TEM照片中看起來(lái)更黑,而有機(jī)物占據(jù)的地方看起來(lái)更亮。之所以叫“
2、負(fù)染色”,就是因?yàn)楸蝗尽昂凇钡氖潜尘昂屯廨喞嬲信d趣的樣品部分是“白”的。也就是說(shuō),典型的經(jīng)過(guò)負(fù)染色的樣品是表現(xiàn)為黑背景中的白區(qū)。 一般有機(jī)物并不與磷鎢酸發(fā)生反應(yīng),磷鎢酸只是沉積在有機(jī)物周圍形成“背景”或“輪廓”。但是不是所有的磷鎢酸染色都是負(fù)染色。有一些羥基和酰胺類會(huì)與磷鎢酸作用,出現(xiàn)正染色的效果,即有些含有這些基團(tuán)的有機(jī)物在TEM下看起來(lái)被染“黑”,最典型的是尼龍。 另外,有時(shí)候不成功的負(fù)染色,看到的結(jié)果也是“白底黑點(diǎn)”,其實(shí)雖然是做了染色的操作,但可能由于方法不對(duì),或者樣品本身的性質(zhì)不適用負(fù)染色,結(jié)果跟沒(méi)染是一樣的。
3、如果有機(jī)顆粒足夠大,不染色時(shí)就能看到“白底黑點(diǎn)”。目的-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 另一方面,如果染色很弱,一般只是給有機(jī)顆粒鑲上一個(gè)輪廓,如果染色劑量很大,則會(huì)出現(xiàn)很黑的“背景”。因此,對(duì)于很小的有機(jī)顆粒,如果染色很弱,只是一個(gè)輪廓圈,電鏡放大倍數(shù)不夠的時(shí)候,看起來(lái)就是一個(gè)小黑點(diǎn)了。就好像一個(gè)紙上畫一個(gè)空心圈,站遠(yuǎn)了看也可能
4、 成一個(gè)小黑點(diǎn)?! ∝?fù)染色技術(shù) 負(fù)染色又稱陰性染色,是相對(duì)于普通染色(稱正染色)而言的。負(fù)染色首先由Hall在1955年提出。Hall在病毒研究中用磷鎢酸染色后,發(fā)現(xiàn)圖像的背景很暗,而病毒象一個(gè)亮晶的"空洞"被清楚地顯示出來(lái)。在超薄切片的染色中,染色后的樣品電子密度因染色而被加強(qiáng),在圖像中呈現(xiàn)黑色。而背景因未被染色而呈光亮,這種染色稱為正染色。而負(fù)染色則相反,由于染液中某些電子密度高的物質(zhì)(如重金屬鹽等)"包埋"低電子密度的樣品,結(jié)果在圖像中背景是黑暗的,而樣品像"透明"地光亮。兩者之間的反差正好相反,故稱為負(fù)染色。目的-通過(guò)
5、該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 對(duì)于負(fù)染色的機(jī)制目前還不十分了解。對(duì)顆粒狀的生物材料的研究而言,負(fù)染色技術(shù)與超薄切片方法相比具有分辨率高(可達(dá)15?),簡(jiǎn)單快速等優(yōu)點(diǎn)。因此,在生物學(xué)研究中得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。它可以顯示生物大分子、細(xì)菌、病毒、分離的細(xì)胞器以及蛋白質(zhì)晶體等樣品的形狀、結(jié)構(gòu)、大小以及表面結(jié)構(gòu)的特征。尤其在病毒學(xué)中,負(fù)染色
6、技術(shù)成為不可取代的實(shí)驗(yàn)技術(shù)?! 編輯] 負(fù)染色液的制備 用作負(fù)染色的負(fù)染色劑應(yīng)具有: 較強(qiáng)的電子散射能力以產(chǎn)生足夠的圖像反差;熔點(diǎn)高,在電子束的轟擊下不會(huì)升華;溶解度大,不易析出沉淀;在電鏡下不呈現(xiàn)出可觀察到的結(jié)構(gòu);分子小,容易滲入不規(guī)則表面的凹陷處;與樣品不起化學(xué)反應(yīng)等。目前最常用的負(fù)染液是磷鎢酸、磷鎢酸鉀和磷鎢酸鈉(分別簡(jiǎn)稱為PTA、KPT、NaPT)。此外醋酸鈾、甲酸鈾、硅鎢酸、鉬酸銨等也常作負(fù)染色劑用?! ∷鼈兊呐渲品椒ㄈ缦拢耗康?通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專
7、業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 磷鎢酸、磷鎢酸鈉、磷鎢酸鉀溶液通常用雙蒸水或磷酸緩沖液配制成1%~3%的溶液,使用時(shí)應(yīng)用1mol/L氫氧化鈉溶液將負(fù)染色液的pH值調(diào)至~或?qū)嶒?yàn)所需的值。醋酸鈾:通常使用雙蒸水配制成%~%水溶液()。醋酸鈾染色液應(yīng)是新鮮的,最好使用前配制。醋酸鈾溶解需15~30分鐘,在黑暗中能穩(wěn)定幾小時(shí),使用前用1mol/L的氫氧化鈉溶液將pH值調(diào)至。甲酸鈾:用雙蒸水配制成%~1%水溶液,pH值為,
8、使用時(shí)用1mol/L的氫氧化鈉溶液將pH值調(diào)至~。鉬酸銨:用雙蒸水配制成2%~3%水溶液,使用時(shí)用醋酸銨將pH值調(diào)至~。鉬酸銨對(duì)有界膜的生物材料具有特別良好的染色值。[編輯] 染色方法 懸滴法用一根細(xì)滴吸管吸一滴樣品懸液滴在有膜的銅網(wǎng)上,滴樣時(shí)