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《雙價(jià)抗真菌基因表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因西瓜的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)2005，13(5)：369—374JournalofTropicalandSubtropicalBotan)雙價(jià)抗真菌基因表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)基因西瓜的研究張志忠，吳菁華，呂柳新，何承坤(福建農(nóng)林大學(xué)園藝學(xué)院，福州350002)摘要：構(gòu)建了同時(shí)含有番茄兒丁質(zhì)酶基岡(Chi3)和13一l，3一葡聚糖酶基因(Glu-Ac)的雙價(jià)抗真菌基因植物表達(dá)載體，以西瓜(Citrulluslanatth~)子葉塊為外植體，采用根癌農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)介導(dǎo)
2、法，將Chi3和Glu-Ac同時(shí)導(dǎo)入西瓜栽培種“中育一號(hào)”，共獲得46株抗性再生植株。經(jīng)PCR、Southernblot和RT-PCR檢測，表明外源基因己成功整合到西瓜基因組中，并在轉(zhuǎn)錄水平得到表達(dá)。利用尖孢鐮刀菌西瓜?；?Fusariumoxysporurn)對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行離體葉片抗病性檢測，表明轉(zhuǎn)基因植株對(duì)枯萎病的抗性均有不同程度的增強(qiáng)。關(guān)鍵詞：幾丁質(zhì)酶基因；B—l，3一葡聚糖酶基因；西瓜；遺傳轉(zhuǎn)化；抗病性中圖分類號(hào)：Q782文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：l005—3395(2005)05—0369—06ConstructionofaPl
3、antExpressionVectorCarryingTwoAntifungalGenesandItsTransfertoWatermelonZHANGZhi—zhong，WUJing—hua，L0Liu—xin，HECheng—kun(CollegeofHorticulture，r4ionAgricuhureandForestryUniversity,Fuzhou350002，China)Abstract：UsingplantbivalentexpressionvectorpCAMBIA1300andpBI121asbasiccompon
4、ents，anewbinaryvectorharboringtomatochitinasegeneChi3andtomato盧一1，3一glucanasegeneGlu-Ac，wasconstructedthroughsequentialrestrictiondigestsandligationsrecombination．ThetwogenesdrivenbyCaMV35spromoterweresuccessfullytransferredintowatermeloncultivars“ZhongYuYiHao”viaAgrobacte
5、rium．mediatedtransformation．SuccessfulintegrationandexpressionofChi3andGIu-AcwereconfirmedbyPCR,SoutheFllblotanalysisandRT—PCR．ThereactionofdetachedleavesoftransgenicplantstoinfectionFusariumoxysporuminfectionWaSexamined．Theresultsindicatedthattransgenicplantsgainedcertain
6、resistance．Keywords：Chitinasegene；B一1，3-glucanasegene；Watermelon；Genetictransformation；Diseaseresistance西瓜(Citrulluslanatus(Thunb．)Mansfeld)是重中可長期存活，防治十分困難，并且由于長期連作要的經(jīng)濟(jì)水果，但生產(chǎn)中病害種類繁多，主要有枯及使用農(nóng)藥，客觀上篩選了致病力更強(qiáng)的病原突變萎病、炭疽病、蔓枯病、白粉病、霜霉病、疫霉病及病體，致使病害日益猖獗。野生西瓜材料PI296341是毒病等，其中枯萎病是西瓜生產(chǎn)上
7、危害最嚴(yán)重的病目前國際上公認(rèn)的唯一1份抗枯萎病3個(gè)生理小害之一，由尖孢鐮刀菌西瓜專化型(Fusarium種的抗源，但農(nóng)藝與品質(zhì)性狀極差，屬飼料西瓜變oxysporumfsp．niveurn(E．F．Smith)Synder&種，不能直接作為育種材料來使用[2]，所以通過常規(guī)Hansen)侵染所致【”。該病屬土傳病害，病菌在土壤育種方法獲得穩(wěn)定抗病的品種較為困難。近年來，收稿日期：2005—03—11接受日期：2005—06—20基金項(xiàng)目：福建省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(B0510017)資助通訊作者Correspondingauthor維普資訊ht
8、tp://www.cqvip.com370熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)第l3卷植物抗真菌病害基因工程的迅速發(fā)展為解決這一菌介導(dǎo)法導(dǎo)入西瓜，成功獲得了一批抗病性增強(qiáng)的問題帶來了希望。目前最常
