資源描述：
《針對隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲雙重實時熒光pcr檢測方法的建立》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲雙重實時熒光PCR檢測方法的建立廖立珊1,2，肖娜3，孫潔1,2，阮周曦1,2，林慶燕1,2，呂建強1,2，曹琛福1,2，曾少靈1,2，張彩虹1,2，陶虹1,2，劉建利1,2，唐金明1,2，楊俊興1,2，花群義1,2，秦智鋒1,2*(1.深圳出入境檢驗檢疫局，廣東，深圳市，518001；2.深圳市外來有害生物質(zhì)檢測技術(shù)研發(fā)重點實驗室，廣東深圳，518045；3.深圳市鹽田區(qū)疾病預防控制中心，廣東，深圳市，518001）摘要：本研究根據(jù)隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲相對保守序列,設(shè)計兩對引物及其相應的Taqman探針,通過對引物和探
2、針濃度、Taq酶以及反應條件等優(yōu)化篩選后，建立了能同時檢測隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲的雙重實時熒光PCR方法。所建立的隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲雙重熒光PCR檢測方法的靈敏度為10-9，相當于46.1copies/μL，重復性良好，特異度實驗未發(fā)現(xiàn)有非特異性擴增。結(jié)論本研究建立的雙重熒光定量RT-PCR技術(shù)可以快速、準確地檢測隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲。?關(guān)鍵詞：隱孢子蟲，賈第鞭毛蟲，雙重實時熒光PCRDevelopmentofDuplexfluorescencequantitativePCRforCryptosporidiumandGiardiainwat
3、ersamplesLIAOLi-shan1,2,XIAONa3,SUNJie1,2,RUANZhou-xi1,2,LINQing-yan1,2,LVJian-qiang1,2,CAOChen-fu1,2,ZENGShao-ling1,2,ZHANGCai-hong1,2,TAOHong1,2,LIUJian-li1,2,TANGJin-ming1,2,YANGJun-xing1,2,HUAQun-yi1,2,QINZhi-feng1,2（1.ShenzhenEntry-ExitInspection&QuarantineBureau，Shen
4、zhen，Guangdong，518001,China；2．ShenzhenKeyLaboratoryofInspectionResearch&DevelopmentofAlienPestsShenzhen，Guangdong，518045,China；3.YantianDistrictofShenzhenCityCenterforDiseaseControlandPreventionShenzhen，Guangdong，518001,China)Abstract：AccordingtoconservativesequencesofCryp
5、tosporidiumandGiardialamblia,twosetsofprimersandTaq-manprobesweredesigned．Afteroptimizationofreactionconditions,wesetupadoublefluorescentreal-timePCRmethodtodetectCryptosporidiumandGiardialamblia.ThesensitivityofCryptosporidiumandGiardialambliadualfluorescencePCRdetectionm
6、ethodwas10-9,equivalentto46.1copies/ul,reproducibilitywasgood,andhighspecificity.Thedetectionsystembasedonreal-timePCRcouldbeutilizedtorapidlyandsensitivelydetectCryptosporidiumandGiardialamblia．Keywords：Cryptosporidiumparvum；Giardialamblia；DoublerealtimefluorescencePCR.隱孢
7、子蟲(Cryptosporidiumparvum)是一種全球普遍存在的人獸共患寄生原蟲，可引起隱孢子蟲病。寄生于人體的種主要是微小隱孢子蟲,該蟲是機會致病原蟲,但也是一種重要的腹瀉病原。藍氏賈第鞭毛蟲(Giardialamblia)簡稱賈第鞭毛蟲，是一種寄生于人類和動物腸道的原生動物。寄生于人體小腸、膽囊，主要在十二指腸，可引起腹痛、腹瀉和吸收不良等癥狀，引起賈第蟲病（Giardiasis），為人體腸道感染的常見寄生蟲之一。近年來,由于不斷發(fā)生水源性隱孢子蟲病和賈第蟲病的暴發(fā)流行,所以水中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲卵囊的污染及其檢測問題倍受關(guān)注。
8、最具有代表性的感染事件是1993年美國威斯康辛州公共飲水受隱孢子蟲卵囊污染而發(fā)生大范圍的人群急性腹瀉[1]。美國疾病控制和預防中心(CDC)把它作為一種新的高傳染性疾病來防治。澳
