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《ephb6在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的調(diào)控作用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、EphB6在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的調(diào)控作用李松濤1，劉涌1，宋磊1，董世武2，邸寧1，李殿威1，徐源1，周強(qiáng)1(400038重慶，第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院骨科,全軍矯形外科中心)[摘要]目的本研究旨在了解EphB6在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的表達(dá)變化及其對成骨分化的影響。方法將小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過雙相接種法接種于脫鈣骨基質(zhì)構(gòu)建組織工程骨，分為4組：成骨誘導(dǎo)5d（A）、14d（B），普通培養(yǎng)5d（D）、14d（D），檢測各組堿性磷酸酶活性，Runx2、Osterix和EphB6的m
2、RNA表達(dá)，然后用游離態(tài)配體ephrinB1-Fc激活EphB6并重復(fù)檢測上述指標(biāo)。結(jié)果ALP活性、Runx2和Osterix在A、B組增高，且B組檢測到最高的ALP活性[(7.32±2.02)金氏單位/100ml、Runx2(3.4426±0.2585)倍和Osterix(2.4823±0.3292)倍，EphB6的表達(dá)水平在A、B組降低，且在B組最低(0.7543±0.0235)倍。以ephrinB1-Fc激活EphB6后，A、B組EphB6的表達(dá)較試劑空白上調(diào)(P＜0.05)，ALP活性顯
3、著下降(P＜0.05)，在高濃度配體作用后ALP活性為(12.20±1.30)金氏單位/100ml較低濃度配體的(15.40±1.03)金氏單位/100ml有進(jìn)一步下降(P=0.008)，Runx2和Osterix表達(dá)的變化趨勢與ALP活性一致。茜素紅染色顯示高濃度配體作用后鈣結(jié)節(jié)明顯減少。結(jié)論明確了EphB6對BMSC成骨分化有負(fù)性調(diào)控作用。[關(guān)鍵詞]ephrinreceptor；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；成骨分化；組織工程[中圖法分類號][文獻(xiàn)標(biāo)志碼]AEffectofEphB6onosteogen
4、esisofbonemarrowstemcells:apreliminarystudyLiSongtao,LiuYong,SongLei,DongShiwu,DiNing,XuYuan,LiDianwei,ZhouQiang(DepartmentofOrthopaedics,SouthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,China)[Abstract]ObjectiveTodetecttheexpressiono
5、fEphB6duringosteogensisofbonemarrowstemcells(BMSC).AndapreliminarystudyofligandstimulatedEphB6onosteogensiewasperformed.MethodsTissueengineeredbonesestablishedviabiphasicseedingweredividedintoosteogenesis5-day(groupA),osteogenesis14-day(groupB),non-i
6、nduced5-day(groupC),non-induced14-day(groupD).Activityofalkalinephosphatase(ALP),mRNAofRunx2,OsterixandEphB6werequantitated.ThensolubleephrinB1wasadministratedforBMSCandRunx2wasquantitated.ThensolubleephrinB1-Fcwasadministratedinallgroupswiththesamet
7、estitems.ResultsALP(7.32±2.02King’sUnit/100mL),Runx2(3.4426±0.2585)andOsterix(2.4823±0.3292)reachedthepeakingroupB,andincreasedingroupA.EphB6wasdown-regulatedingroupAandB,andwaslowestinB(0.7543±0.0235).AftertheadministrationofsolubleephrinB1-Fc,EphB6
8、wasup-regulated(P＜0.05).ALPactivitydecreased(P＜0.05),andwaslessinhigh-doseephrinB1(12.20±1.30King’sUnit/100mL)comparedwithlow-doseephrinB1(15.40±1.03King’sUnit/100mL),P=0.008.similartrendswereobservedinRunx2andOsterix.Alizarinredstainingsuggestedanev
