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1、番茄紅素分離純化研究 摘要：以5%番茄紅素粉為原料，研究了應用不同型號樹脂對番茄紅素進行分離純化的效果。結果表明，不同型號樹脂對番茄紅素的分離純化效果不同，其分離純化效果順序為X-5>AB-8>S-8>離子交換樹脂，最適靜態(tài)吸附樣液濃度為0.03g/L、最適靜態(tài)解吸時間為1h、最適動態(tài)上樣速度為2BV/h、最適洗脫劑為乙酸乙酯。番茄紅素經X-5吸附后，以乙酸乙酯為洗脫劑，可將番茄紅素濃縮5.9倍，具有良好的富集純化效果?！ ￡P鍵詞：番茄紅素；分離純化；大孔樹脂 中圖分類號：TS202.3；R284.2文獻標識碼：A文章編號：0439-8114（
2、2016）18-4787-03 DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.18.038 番茄紅素是人類自身不能合成，而由植物和微生物合成的一種天然色素，是目前在自然界的植物中被發(fā)現的最強抗氧化劑之一，對人體具有預防癌癥、延緩衰老、保護心腦血管等功用[1]，人們主要通過食用番茄攝入番茄紅素。 當前，人們常見以氯仿、丙酮、正乙烷等有機溶劑作為提取劑從番茄果實中提取番茄紅素[2]，再采用皂化純化法、溶劑純化法、HPLC法、重結晶法和柱層析法等方法進一步分離純化番茄紅素。本試驗擬以5%番茄紅素粉為原料，研究不同型號
3、樹脂對番茄紅素的分離與純化效果，為進一步研究利用番茄紅素提供科學根據。6 1材料與方法 1.1試驗材料 試驗所用材料為番茄紅素粉（5%），購自陜西森弗高科實業(yè)有限公司；大孔吸附樹脂（X-5、AB-8、S-8、離子交換樹脂）?！ ?.2試劑與儀器 試驗所用試劑主要有：乙酸乙酯（AR）、丙酮（AR）、石油醚（AR）、乙醇（95%）、去離子水（自制）。 試驗所用主要儀器：VIS-7220型可見分光光度計，北京瑞利分析儀器公司；AL204型電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；層析柱（1.6cm×30cm）；旋轉蒸發(fā)器；真空泵；烘箱；HL
4、-2B型數顯恒流泵；電腦全自動部分收集器?！ ?.3方法 1.3.1番茄紅素提取液制備準確稱取番茄紅素粉（5%）0.05g，用乙酸乙酯溶解后，定容至500mL。 1.3.2最大吸收波長的確定將所制備的番茄紅素提取液稀釋一定倍數，選用1cm比色皿在波長為400～700nm進行可見光吸收光譜掃描?！ ?.3.3大孔吸附樹脂的預處理將樹脂用清水漂洗干凈后，用80%乙醇浸泡24h以除醇溶性有機物，濾干，再用蒸餾水洗滌，濾干，用2mol/LHCl溶液浸泡4h，再用蒸餾水洗滌至中性，濾干，用2mol/LNaOH溶液浸泡4h，再用蒸餾水洗滌至中性，備用。
5、1.3.4靜態(tài)分離純化條件篩選 1）吸附劑的選擇。取已經活化的X-5、AB-8、6S-8、離子交換樹脂5.0g于250mL錐形瓶中，分別加入30mL番茄紅素提取液避光振蕩吸附4h，測定A502nm[3]，了解各樹脂對番茄紅素的吸附速度，確定最佳吸附時間和吸附劑?！ ?）樣液濃度的選擇。取已經活化的X-55.0g，加入不同濃度的番茄紅素提取液避光振蕩吸附4h，測定A502nm，計算吸附率，確定最佳樣液濃度?！ ?）解吸時間的選擇。各大孔樹脂吸附完成后，倒去上層清液，加入乙酸乙酯40mL，25℃水浴振蕩3h，每隔0.5h取解吸液分別稀釋適當倍數后，測
6、定A502nm并計算解吸率。 1.3.5動態(tài)分離純化的選擇 1）上樣速度的選擇。取已經活化的X-55.0g裝填層析柱，取稀釋一定倍數的番茄紅素提取液30mL，以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0BV/h速度上樣，10min后測定流出液的吸光度A502nm，確定最佳上樣速度?！ ?）洗脫劑的選擇。取稀釋一定倍數的番茄紅素提取液以2mL/min速度上樣，分別以95%乙醇、丙酮、石油醚、乙酸乙酯為洗脫劑進行洗脫，洗脫液連接自動部分收集器，速度為1min/管，每隔一管測定A502nm，繪制洗脫曲線?！ ?.3.6吸附及解析效果評價[4]
7、吸附率E=■×100% 解吸率D=■×100% 式中，A0為吸附前溶液的吸光度；Ae為吸附完成后溶液的吸光度；An為洗脫液的吸光度。6 2結果與分析 2.1不同樹脂對番茄紅素的靜態(tài)吸附曲線 X-5、AB-8、S-8、離子交換樹脂中分別加入30mL番茄紅素提取液避光振蕩吸附4h，每隔0.5h測定提取液的A502nm，結果如圖1所示。由圖1可見，X-5、AB-8、S-8、離子交換樹脂中分別加入30mL番茄紅素提取液避光振蕩吸附，提取液的吸光度逐漸降低，在4h內X-5的降低速度和幅度最大，吸附效果最佳，3h左右吸附基本完成。其次為AB-8，S-
8、8。離子交換樹脂的吸附效果則較差，因此后續(xù)試驗選擇X-5?！ ?.2番茄紅素濃度的選擇 不同濃度的番茄紅素提取液經X-5
