eppendorf plus 移液槍校準(zhǔn)方法

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1、Eppendorfplus移液槍校準(zhǔn)方法1、準(zhǔn)備超純水、萬分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十萬分之一的天平）、溫濕度計(jì)、恒溫室，還需準(zhǔn)備一個小口容器，防止水分揮發(fā)。2、按移液器總量程的100%、50%、10%分別進(jìn)行第三和第四步。3、吸頭要反復(fù)吸取超純水三次后，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數(shù)據(jù)穩(wěn)定讀取天平數(shù)值，同時記錄溫度。重復(fù)10次。4、將測量的數(shù)據(jù)用iso8655中的計(jì)算公式計(jì)算獲得對應(yīng)溫度下的體積，取平均值。5、根據(jù)三個測量點(diǎn)的偏差，用移液器專用的

2、校正扳手通過移液器的校正窗進(jìn)行調(diào)整。6、重復(fù)3、4步，直至偏差在ISO8655的要求內(nèi)為止。ISO8655-1-2002活塞式容量測量儀器.第1部分:術(shù)語、一般要求和用戶使用建議ISO8655-2-2002活塞式容量測量儀器.第2部分:活塞式吸量管ISO8655-6-2002活塞式容量測量儀器.第6部分:確定測量誤差的重量分析法三、校準(zhǔn)方法及步驟操作環(huán)境：溫度應(yīng)控制在15-30℃，恒定在±0.5℃，相對濕度50%-80%，要保持較高的空氣濕度以減少水分蒸發(fā)對結(jié)果造成的影響。建議使用防蒸發(fā)裝置。測試應(yīng)

3、在獨(dú)立無通風(fēng)的房間內(nèi)進(jìn)行，并配備溫度和濕度顯示。所需設(shè)備：1、分析天平一臺。確保室內(nèi)空氣流動平緩，應(yīng)避免天平正對空調(diào)出風(fēng)口。根據(jù)所測試的移液器的容量來選擇適合的天平：移液器容量范圍天平可讀性天平的重復(fù)性和線性測量不準(zhǔn)確度1μl~10μl0.001mg0.002mg≤0.002mg10~100μl0.01mg0.02mg≤0.02mg>100μl0.1mg0.2mg≤0.2mg?2、純水、三蒸水或去離子水，需達(dá)到ISO3696三級水的標(biāo)準(zhǔn)。3、獨(dú)立工作間，配備防震、防塵、遠(yuǎn)離熱源、無陽光直射的操作臺。

4、4、溫度計(jì)、濕度計(jì)。校準(zhǔn)操作：為確保校準(zhǔn)的準(zhǔn)確性，采用三點(diǎn)移液十次，具體步驟如下：1、同溫處理，將移液器、吸頭、天平、測試用水、操作臺等校準(zhǔn)用具放置在同一工作間內(nèi)，至少四小時。2、在正式操作前，先預(yù)洗吸頭，吸排測試用水5次。3、用最大體積、50%最大體積和最小體積（或10%最大體積），各移液10次，記錄每次移液的質(zhì)量。4、計(jì)算每組數(shù)據(jù)的平均值，代入計(jì)算公式，計(jì)算出不準(zhǔn)確度與不精確度。5、對比可允許的最大誤差限度，根據(jù)實(shí)際需要確定進(jìn)行調(diào)整。附：相關(guān)計(jì)算公式質(zhì)量體積轉(zhuǎn)換公式1：V=(w+e)×Z式中：V

5、=體積（μl）w=質(zhì)量（mg）e=蒸發(fā)損失（mg）Z轉(zhuǎn)換因子以上公式參考ISO8655標(biāo)準(zhǔn)。蒸發(fā)損失對測量小體積液體影響較大，因此應(yīng)將蒸發(fā)損失計(jì)算在內(nèi)。方法：在稱過重的容器中注入定量清水，按下秒表觀察30秒，讀出損失量，然后算出每秒的損失量。（若30s內(nèi)質(zhì)量損失3mg，則損失量為3mg÷30s=0.1mg/s）。記錄移液時間，將移液時間乘以每秒損失量，算出實(shí)際蒸發(fā)損失量，代入上述公式計(jì)算實(shí)際體積。若使用防蒸發(fā)裝置，通常可以忽略蒸發(fā)損失量。不同溫度、壓力下水的質(zhì)量和體積不同，具體轉(zhuǎn)換因子Z值請查看附錄

6、1。公式2：V20=m×K(t)式中：V20=標(biāo)準(zhǔn)溫度20℃下實(shí)際體積（μl）m=質(zhì)量（mg）K(t)值以上公式參考JJG646-2006移液器檢定規(guī)程。根據(jù)天平測試蒸餾水的質(zhì)量，以及檢測時溫度所對應(yīng)的K(t)值，即可計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)溫度下蒸餾水的實(shí)際體積。具體K(t)值請查看附表2。計(jì)算式時，請根據(jù)實(shí)際需要，選擇公式進(jìn)行計(jì)算。不準(zhǔn)確度（系統(tǒng)誤差）不準(zhǔn)確度是指實(shí)際移取體積和顯示體積的差異。A=-V0式中：A=不準(zhǔn)確度=平均值V0=標(biāo)稱容量A%=100%×A/V0不精確度（隨機(jī)誤差）不精確度指每次實(shí)際移取體

7、積與實(shí)際體積平均值的差異，其變化是不可預(yù)計(jì)的測量誤差的一部分。它可以表示為標(biāo)準(zhǔn)差S或變異系數(shù)CV：式中：S=標(biāo)準(zhǔn)偏差=平均值n=測量次數(shù)Vi=單次測量數(shù)值CV=100%×S／附表1：轉(zhuǎn)換因子Z(μl/mg)數(shù)值表（無菌水）溫度氣壓（KPa）1KPa=10hPa（℃）80859095100101.310515.001.00171.00181.00191.00191.00201.00201.002015.501.00181.00191.00191.00201.00201.00201.002116.001

8、.00191.00201.00201.00211.00211.00211.002216.501.00201.00201.00211.00211.00221.00221.002217.001.00211.00211.00221.00221.00231.00231.002317.501.00221.00221.00231.00231.00241.00241.002418.001.00221.00231.00231.00241.00251.00251.002518.501.