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1、尿液HCG試驗在臨床門診的應用陳潔(新疆瑪納斯縣婦幼保健站新疆瑪納斯832200)【中圖分類號】R446.12【文獻標識碼】A【文章編號】1672-5085(2010)17-0011-021人絨毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盤合體滋養(yǎng)細胞分泌的一種具有促性腺發(fā)育的糖蛋白激素,其對促性腺激素受體具有高度的親和性,而HCG存在于孕婦的血液,尿液,初乳,羊水和胎兒體內,妊娠后尿液中的HCG增高,一般妊娠后35-40d時,HCG為200ng/L以上:60-70d出現(xiàn)高峰,HCG可達6.4-25.6ng/L,常用的HCG檢查方法即能顯示陽性結果,對于一般的早期妊娠診斷首選尿液HCG試驗,
2、它既省時,方便,快速做出妊娠診斷,使它的檢測在臨床上,門診上,很受醫(yī)牛和患者的歡迎。2HCG的主要功能有(1)?作用于朋經(jīng)黃體,與黃體細胞膜上的受體結合,使黃體增大成為妊娠黃體,增高,笛體激素的分泌以維持妊娠,肓至滋養(yǎng)細胞本身產牛足夠的孕激素以維持妊娠蛻膜。(2).HCGβ亞基具有促進卵泡成熟,促甲狀腺及睪丸間質細胞的活性,(3).HCG有與黃體生成激素相似的牛物活性與人絕經(jīng)期促性腺激素合用能誘發(fā)排卵。(4).HCG能抑制淋巴細胞的免疫性,能以激素屏障保護滋養(yǎng)層不受母體的免疫攻擊。HCG是由兩個獨立的非共價鍵相連的肽鏈(α亞基和β亞基)組成的糖蛋
3、白激素,相對分子質量為47000,單個亞基不具有生物學活性,當其連接成完整的化合物時才具有活性,HCGα亞基的氨基酸數(shù)量及其排列順序與卵泡刺激素,黃體牛成激素,促甲狀腺激素的亞基幾乎相同,故HCGα亞基抗體均能與FSH,LH,TSH的α亞基發(fā)牛交叉反應。HCGβ亞基竣基端最后的28?32的氨基酸為其所特有,不存在于其它糖蛋白激素中,從而決定了其生物學活性及免疫學的高度特異性。因此,臨床上均釆用高效的抗HCGβ亞基單克隆抗體進行特異性HCG檢查。近年來,也采用抗β-HCG基末端肽單克隆抗體,以進一步提高HCG檢查的
4、靈敏度和特異性。3在受精后第6天受精卵滋養(yǎng)層形成吋,開始分泌微量的HCG,受精精卵著床后,采用特異性β-HCG抗血清能在母體血液中檢測出HCG,在妊娠早期HCG分泌量增高極快大約1.0-2.7d即可增高1倍,至妊娠8-10周時血清濃度達到高峰,持續(xù)1-2周后迅速減低,妊娠晚期血清HCG濃度僅為峰值的10%,持續(xù)至分娩,分娩后若無胎盤殘留,約于產后2周內消失,HCG是唯一不隨胎盤重量增加而分泌增多的胎盤激素,分泌后直接進入母血,幾乎不進入胎血循環(huán),HCG可通過孕婦血液循環(huán)而排泄到尿液中,血清HCG濃度略高于尿液,H呈平行關系。我們在門診多采用的是單克隆抗體膠體金試驗,應
5、用免疫層析式雙抗體夾心法,以膠體金為指示標記的一步法原理。主要有抗-β人絨毛膜促性腺激素(HCG)單克隆抗體和抗鼠IgG多克隆抗體分別固相于硝酸纖維膜和膠體金標記的抗?αHCG單克隆抗體及其它試劑組成。其檢測原理將羊抗人HCG抗血清(多抗),羊抗鼠IgG分別固定在特制的纖維素試帶上,并呈上下排列的兩條線,羊抗鼠IgG線在試帶上方為陰性對照,羊抗人HCG多抗在試帶下方為測定線,試帶中含有均勻分布的膠體金標記的鼠抗人β-HCG單克隆抗體和無關的金標記鼠IgG,檢測時,將試帶條浸入被檢尿液中(液面要低于兩條抗體線)后迅速取出,尿液沿試帶繼續(xù)上行,尿液中
6、β-HCG在上行過程中與金標記β-HCG單克隆抗體結合,當行至羊抗人HCG抗體線吋,形成金標記的β?HCG單克隆抗體一尿HCG?羊抗人HCG多抗復合物,在試帶上顯示紫紅色線條,為HCG陽性。試帶上無關的金標記鼠IgG隨尿繼續(xù)上行至羊抗鼠IgG處,與之形成金標記抗原一羊抗鼠IgG復合物,在試帶上顯示紫紅色線條,為陰性對照。試帶上顯示上下兩條紫紅色線條為陽性,只顯示上邊一條紫紅色為陰性。它以操作簡便,快速,結果可靠,特異性高,靈敏度好,約為0.8-2.0ng/L可半定量,廣泛應用于臨床。3.1質量控制3丄1標本采集與處理宜采集首次晨尿(中段尿)100m
7、l,離心取上清液用于檢查,若為蛋白尿血紅蛋尿,應加熱煮沸3min后,離心取上清液檢查。不宜使用嚴重的血尿,菌尿標本檢查HCG。3.1.2質控液制備采集HCG陽性的尿液3?4份,將蛋白定性陰性的尿液混合,置4°C冰箱過液,取出后立即離心,取上清液以化學交聯(lián)抗原和配套抗血清做稀釋試驗,測定HCG效價,按所測效價低1倍稀釋度以滅菌,生理鹽水稀釋尿液,作為陽性質控物。3.1.3檢驗過程每批試驗均應設定陽性對照和陰性對照,對照試驗得到預期結果,才能簽發(fā)報告,每份尿液均做雙份檢查,即以原濃度和倍量稀釋后