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1、學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權江蘇大學可以將本學位論文的全部內容或部分內容編入有關數據庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密口本學位論文屬于,在年我解密后適用本授權書。不保密醇學位論文作者簽名:墊主、.亂指導教師簽名:2008年‘月/汨2008年;月/力鉉孚日獨自J性申明本人鄭重聲明:所呈交的學位論文,是本人在導師的指導下,獨立進行研究工作所取得的成果。除
2、文中已經注明引用的內容以外,本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名:蘊友組日期:2008年鄉(xiāng)月江蘇大學碩士學位論文素為pH、溫度和氧濃度,一些次要因素通常為存在的降解酶、抗壞血酸、二氧化硫、金屬離子、糖及親核試劑。此外,共色素(如單寧、咖啡酸等被證實是有效的共色素)形成作用也可能會影響花色苷的降解速度【3】。1.3花色苷類物質的分離鑒定方法1.3.1花色苷類物質的提取1.3.1.1傳統(tǒng)
3、溶劑提取花色苷是水溶性色素,其基本骨架通常被一個或多個極性側鏈如糖基酰化;另外,取決于pH,雜環(huán)上的氧原子可能帶正電。所以,傳統(tǒng)方法采用溶劑萃取來提取花色苷。常見的提取溶劑可分為以下三類【4。5】:(1)水:水是一種強的極性溶劑。植物中親水性的成分,如無機鹽、糖類、分子不太大的多糖類、氨基酸、蛋白質、有機酸鹽、生物堿鹽等都能被水溶出。為了增加某些成分的溶解度,也常采用酸水及堿水作為提取溶劑。酸水提取,可使生物堿與酸生成鹽類而溶出,堿水提取可使有機酸、黃酮、葸醌、內酯、香豆素及酚類成分溶出。在花色苷類色素的提取中,水提法提取率
4、往往較低而極少采用。(2)親水性的有機溶劑:一般是說與水能混溶的有機溶劑,如乙醇、甲醇、丙酮等,以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比較好,對植物細胞的穿透能力較強。親水性的成分除蛋白質、果膠、淀粉和部分多糖等外,大多數能在乙醇中溶解。還可以根據被提取物質的性質,來采用不同濃度的乙醇進行提取。(3)親脂性的有機溶劑:一般是說與水不能混溶的有機溶劑,如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。這些溶劑的選擇性強,不能或不容易提出親水性雜質。因此,大量提取植物原料中的花色苷時,直接應用這類溶劑有一定的局限性。在上述溶劑中,由于乙醇無毒、經濟,
5、提取效果也好,故一般多采用乙醇作為提取花色苷的溶劑。添加少量的鹽酸或甲酸可以阻止非酰化物質的降解。工業(yè)生產中一般采用含O.1%鹽酸的乙醇溶液提取花色苷。1.3.1.2超聲波輔助提取超聲波是頻率高于20l(Hz的機械波,它在媒質中傳播時可產生空化現象。超聲波的空化作用是:在超聲波聲場中,振動負壓區(qū)由于周圍的液體來不及補充,形成無數的微小真空泡,而當正壓來到時,微小氣泡在壓力下突然閉合,液體間猛烈產生極大的沖三I江蘇大學碩士學位論文解等處理,使花色苷中的糖苷配基、糖和有機酸游離出來,再通過標準的糖苷配基、糖和有機酸作對照或參考文
6、獻數據,進行色譜分析。應用于花色苷結構鑒定的傳統(tǒng)色譜方法是紙色譜、薄層色譜法、GC、HPLC、RP.HPLC。表征花色苷結構的紙色譜分析方法,在鑒定時,即使沒有標準品,通過同一樣品在不同展開劑中的Rf值,對照標準的Rf值,也可粗略估計出樣品所含花色苷的種類。此外,也可采用薄層層析法進行鑒定【141。葉興乾等‘151采用紙層析法推測荸薺種楊梅中所含主要花色苷的苷原分別為矢車菊素、天竺葵色素、飛燕草素、芍藥素。(2)光譜分析法光譜分析法包括紫外.可見光譜法Ⅳ炸娜印Pc護“圳和紅外吸收光譜法。其中花色苷及其糖苷配基在紫外.可見區(qū)域
7、的吸收光譜對它們的結構表征很有用,這種方法主要包括以下幾個要點【16邯】:可見光區(qū)的最大吸收波長(k觚.Ⅵ。);添加ALCl3對可見光區(qū)的最大吸收波長的影響;添加甲醇鈉對可見光區(qū)的最大吸收波長(k缸.Ⅵn)的影響;花色苷在4401lIIl下的吸光度值與k默.Vin下吸光度值之比(~40mn幾‰缸.Vin),該花色苷在300nm~33011111間有無吸收峰;該花色苷在紫外光下是否有熒光;通入二氧化硫后是否褪色等。花色苷的紅外光譜主要有苯環(huán)、含氧雜環(huán)、糖和羥基甲氧基四部分。將樣品作出紅外光譜與標準圖及數據對照,來了解花色苷的結
8、構。紅外吸收光譜法:花色苷的紅外光譜主要有苯環(huán)、含氧雜環(huán)、糖和羥基或甲氧基四部分。(3)其他方法目前,隨著分析技術的進步,越來越多的方法應用于花色苷結構鑒定。如GC.MS分析花色苷與氯代三甲基硅烷反應后的產物,快速原子轟擊質譜(FAB.MS)可以精確測定花色苷的分子量【18】,H.NMR和