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《microrna調(diào)控植物葉極性分子機(jī)制》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要microI礬A是一類21-24nt的小RNA分子，而雙鏈RNA結(jié)合蛋白IffLl則是一個(gè)microRNAs形成所必需的蛋白質(zhì)。HYLI可以與microRNA相結(jié)合，在其它microRNAs形成相關(guān)蛋白DCLl，AG01等共同作用下，把前體RNA分子加工為成熟的microRNAs，并介導(dǎo)下游的靶基因的剪切，從而在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)植物相關(guān)基因進(jìn)行調(diào)控。目前的研究發(fā)現(xiàn)許多microRNAs參與植物的發(fā)育過程。其中，腫-zlPm基因家族是一個(gè)與葉片極性發(fā)育相關(guān)的基因家族，參與葉片近軸面極性的確定。而miRl65／166可以對(duì)其進(jìn)行剪切，在轉(zhuǎn)錄后水平上調(diào)控這些基因的
2、表達(dá)，從而調(diào)控植物葉片的極性建立和維持。首先構(gòu)建了向一門姐船嘲Te嘲rev-lOD和∞6幣腳P巧的雙突變和三突變體，hyll葉片呈現(xiàn)向上側(cè)卷的表型，而應(yīng)ⅣJ9"e嘲hyllz'e嘲hyllphb--6肋y百葉片平展，恢復(fù)為野生型的表型；相對(duì)應(yīng)的byllrev-lOB雙突變體的葉片比hyll更加卷曲。說明hyll葉片的卷曲是由于腰}二PItY和PRY等肋誓撅族基因的過量表達(dá)引起的，因?yàn)镋YLl是microRNA成熟過程中一個(gè)重要的基因，HYLI的突變導(dǎo)致microRNAs的加工效率降低，從而不能有效的剪切下游勵(lì)_Z壚團(tuán)靶基因。RT-PCR和real-timeP
3、CR的表達(dá)分析進(jìn)行進(jìn)一步的證實(shí)了在hyll中REV，PHB，PIN和CAN的表達(dá)都比野生型發(fā)生上調(diào)。石蠟切片的結(jié)果表明，腰K冊(cè)和PI-W基因不僅在葉片中具有極性分布，而且調(diào)控莖中木質(zhì)部和韌皮部的空間排布。同時(shí)還克隆擬南芥的AGOIcDNA序列，構(gòu)建原核表達(dá)載體，為下一步研究A601與BYLI之間的相互作用，以及它們和葉極性的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：擬南芥；葉極性，HYLl，AGOIstlD--ZI戌礦ThemolecularmechanismofmicroRNA-regulatedpolarityofleavesAbstractnficrolLNA-s(nli
4、RNAs)axe21．24nucleotidesingle．strandedRNAmolecules，anddoublestrandRNAbindingproteinHYLlisnecessaryformicroRNAbiogenesis．HYLlcarlprocesstheprimarymicroRNAintomaturemicroRN&TogetherwithDCLlandAG01，HYLldirectstheprocessingoftargetgenetoregulatetheexpressionatpost-transcfiptlevel．Ourre
5、searchinvolvedinmicroRNAmainlyisfocusedonthedevelopmentofplant。Homeodomain—leucinezippedl／(nD-Zipln)genefamilyisinvolvedinlearpolarity,anddeterminationofleafadaxialidentity．1ID-ZlpY理[fifethetargetsofmiRl65／166．whichregulatethegeneexpressionatpost-transcriptionallevelandrecapitulate
6、theestablishmentandmaint饑趾ceoflearpolarityfurther．11leleavesofhyllaxehyponasticandcurvedupward．butintheIeavesofhyHdoublemutantswith(hvHrev-6,hyUrev-9andhillphb-ephv-5),thecurvedleaveswererecoveredtowildphenotype；conversely，the磚ljphenotypeofcurvaturewasaggravatedinhyt]ren-1DDdoublem
7、utant．咖istosaythephenotypeof所以wasresponsiblefortheoverexpressionofRE礦PHBand戶日礦Because胍1mediatedthematurationofmicroKNA，inbyllmutanttheefficiencyandquantityofmieroRNAprocessingreduced,leadingtodecreasedamountofmaturemicroRNAandtheincreasedexpressionofRE礦PHBandPHvincreasedRT-PCRandRE
8、AL-TIMEPCRexperimentsdemon
