寒蘭快速繁殖技術(shù)與其試管成花的分析

寒蘭快速繁殖技術(shù)與其試管成花的分析

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1、年我國(guó)學(xué)者羅士韋在培養(yǎng)菟絲子的莖尖時(shí)發(fā)現(xiàn)有花的形成,目前已有葉子花(BougainvilleaSpectabilisWilld)、青蒿0rtemisiaeannuaL)、矮牽牛c尸etuniahybridaVilm)、煙草(NicotianatabacumL.)、石竹(GypsophilapaniculataL)、向日葵(Helianthusclnnus)、何氏風(fēng)仙(Impatiensholstii.)及竹子(Dendrocalamuslatiflorus)等植物誘導(dǎo)試管內(nèi)成花獲得成功,有的還獲

2、得了有效的試管種子。近年來(lái),有關(guān)蘭花離體培養(yǎng)成花的研究也有不少的報(bào)道,并且在建蘭(censifolium)、春蘭(Cgoeringii)、石斛蘭(DendrobiumSonia)、文心蘭(Oncidiumvariosum)、蝴蝶蘭(Phalaenopsis)等中獲得成功,但是普遍存在著成花率低、系統(tǒng)穩(wěn)定性差、機(jī)理不明確等問(wèn)題。由于開(kāi)花過(guò)程本身以及花分化啟動(dòng)、花原基、花器官原基形成過(guò)程中影響因子的復(fù)雜性,很難對(duì)開(kāi)花過(guò)程進(jìn)行全面監(jiān)控,而只能以某一階段的試驗(yàn)結(jié)果作為衡量標(biāo)準(zhǔn),這就為探討開(kāi)花機(jī)理增加了難

3、度。研究表明,植物離體成花的規(guī)律與整體成花規(guī)律是基本相似的,而組織培養(yǎng)具有研究材料來(lái)源單一,無(wú)性系(克隆)遺傳背景一致;經(jīng)濟(jì)方便、效率高;條件可控、誤差小;生長(zhǎng)快、周期短、重復(fù)性強(qiáng);可進(jìn)行周年試驗(yàn)或生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn),所以被大量用于成花研究。因此,建立一個(gè)穩(wěn)定的高效的離體培養(yǎng)系統(tǒng),進(jìn)而來(lái)研究探討試管成花的機(jī)理,有著十分重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。蘭花種子萌發(fā)形成苗后,植株通常要經(jīng)過(guò)5~7年的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)才能開(kāi)花,如果采用雜交來(lái)繁育新品種,考慮到性狀分離現(xiàn)象,必須用F.代進(jìn)行多次自交才能得到穩(wěn)定性狀的新品種,如此繁

4、育一個(gè)新品種需要耗費(fèi)幾十年的時(shí)間,這樣不但遺傳育種的周期很長(zhǎng),而且需要投入大量栽培設(shè)施以及管理費(fèi)用,因此,極不利于寒蘭新品種的繁育工作。通過(guò)試管成花技術(shù)可提早知道育種后代的花色、花型等性狀,能有目的的選擇具有優(yōu)良性狀的個(gè)體,從而大大地縮短育種周期,降低繁殖成本,使育種工作更具目的性。其次,蘭花試管開(kāi)花可實(shí)現(xiàn)瓶?jī)?nèi)雜交,由于蘭花試管開(kāi)花不受季節(jié)的限制,這就為不同季節(jié)開(kāi)花的蘭花品種或是花期不遇的蘭花品種之間的雜交成為可能。此外,由于開(kāi)花的試管植株本身就是很好的商品,可直接進(jìn)入消費(fèi)市場(chǎng),目前市場(chǎng)上已有試

5、管觀賞蘭花商品出售,雖然沒(méi)有花也大受歡迎,若能開(kāi)發(fā)出開(kāi)花的試管蘭花,將會(huì)更受消費(fèi)者歡迎。本研究以寒蘭(CymbidiumkanranMakino)種子為外植體,建立了寒蘭的離體快繁技術(shù)體系,將為寒蘭工廠化育苗提供一定的技術(shù)支持;通過(guò)研究外界環(huán)境—_2一因子對(duì)寒蘭試管成花的影響,可為將來(lái)建立一個(gè)穩(wěn)定性強(qiáng),重復(fù)性好,成花率高的寒蘭試管成花體系提供部分技術(shù)資料;最后,通過(guò)連續(xù)石蠟切片,對(duì)寒蘭試管成花過(guò)程的解剖學(xué)進(jìn)行研究,可為離體成花機(jī)理的研究提供基礎(chǔ)資料。此外,誘導(dǎo)建蘭(Ce腳ifolium)和春蘭(

6、Cgoeringii)等開(kāi)花的外植體是假鱗莖上的頂芽和側(cè)芽,而本試驗(yàn)所采用的外植體是來(lái)自種子無(wú)菌播種形成的寒蘭試管苗。目前,有關(guān)誘導(dǎo)寒蘭試管成花方面的研究在國(guó)內(nèi)外為空白。該實(shí)驗(yàn)體系的創(chuàng)建將對(duì)國(guó)蘭的雜交育種,提高育種可見(jiàn)度,縮短育種時(shí)間,擴(kuò)大雜交親本的選擇范圍,加速蘭花的繁殖,生產(chǎn)商品蘭花,滿足市場(chǎng)需求,保護(hù)野生蘭花資源等有極其重要的現(xiàn)實(shí)意義,同時(shí)也將產(chǎn)生顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。3一綜述蘭花屬于蘭科(Orchidaceae)植物,全世界約有700屬,近20000種【”,廣泛分布于全球各地,其具有

7、極高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。在蘭花新繁殖技術(shù)的探索中出現(xiàn)了兩次技術(shù)飛躍變革,第一次發(fā)生在1922年,LKundson在無(wú)菌培養(yǎng)基上首次培養(yǎng)蘭花種子發(fā)芽成功【1];第二次發(fā)生在1960年,法國(guó)人G.Morel利用蘭花莖尖誘導(dǎo)出原球莖狀體(Protocorm.1ikebodies)并分化成植株【甜。20世紀(jì)60年代之前,關(guān)于蘭花組織培養(yǎng)的研究主要是針對(duì)種子在人工培養(yǎng)基上的萌發(fā),之后,則側(cè)重于莖尖培養(yǎng),20世紀(jì)80年代以后,蘭花的試管成花有不少研究報(bào)道【3_21l。蘭花離體培養(yǎng)成花系統(tǒng)的建立,可以用來(lái)探

8、明蘭花從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)變機(jī)制,是研究花的分化和發(fā)育的理想材料。本文主要就這些領(lǐng)域的研究進(jìn)展加以綜述。1蘭花的組織培養(yǎng)進(jìn)展1.1種子無(wú)菌萌發(fā)蘭花的雌蕊受精后,子房經(jīng)6—12個(gè)月發(fā)育為成熟的蒴果,為柱形,具有三角。1個(gè)蒴果中的種子約104~106?!?2】,蘭花的種子極小,一般呈長(zhǎng)紡錘形,每粒種子僅有0

9、3一O.5微毫克,沒(méi)有胚乳,只有1個(gè)發(fā)育不完全的胚,其外包著透明不易透水的種皮,種子內(nèi)還可能存在抑制其萌發(fā)的物質(zhì)【23】。自然條件下蘭花種子極難萌發(fā),通常要與真菌共生才能萌發(fā)。自從1922年

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