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《白屈菜生物堿類(lèi)成分提取、分離、純化與體外抑菌作用的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要白屈菜(Chelidoniummaj淞L．夕為罌粟科白屈菜屬植物，別名土黃連，山西瓜，“性涼，味苦，有小毒，入肺、心、腎三經(jīng)”，首載于《救荒本草》，全草入藥，具有清熱解毒、鎮(zhèn)痛、止咳、平喘、疔瘡消腫之功效。喜生于山谷的濕潤(rùn)地帶，林緣水溝邊，廣泛分布于歐亞大陸，北美等地，在我國(guó)主要分布于東北，華北等眾多省份，自然資源極其豐富。白屈菜中主要有效成分是生物堿類(lèi)物質(zhì)，全草約含生物堿o．97"-"1．87％，根含生物堿1．9"-'-'4．14％。迄今為止已經(jīng)累計(jì)報(bào)道其中含有苯并菲啶型、原托品型、原小檗堿型、阿樸菲型四大結(jié)構(gòu)類(lèi)型共計(jì)29種
2、生物堿?，F(xiàn)代藥理作用證明自屈菜中重要的活性成分是具有明顯生物活性和生理功能異喹啉類(lèi)生物堿，主要為白屈菜堿、白屈菜紅堿、血根堿等。迄今為止，關(guān)于白屈菜單體分離的研究較為深入，而白屈菜中生物堿提取工藝和含量測(cè)定方法的報(bào)道較少，并且在白屈菜的藥理作用的研究中，關(guān)于白屈菜對(duì)畜禽生產(chǎn)常見(jiàn)的細(xì)菌性疾病的研究還未見(jiàn)報(bào)道。因此，本文由此出發(fā)，對(duì)白屈菜中生物堿開(kāi)發(fā)為新型獸藥的各個(gè)關(guān)鍵步驟均進(jìn)行了一些研究，包括生物堿的提取、富集、純化和藥理作用研究，以期為白屈菜的大工業(yè)生產(chǎn)和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。首先，白屈菜中生物堿提取工藝的研究。本文建立了反
3、相I-IPLC法檢測(cè)白屈菜堿含量的色譜條件，運(yùn)用正交實(shí)驗(yàn)，分別以浸膏重量和白屈菜堿含量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察了熱浸和超聲波兩種醇提工藝的提取效果，運(yùn)用SPSSl4．0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，得到優(yōu)化的提取工藝如下：以白屈菜浸膏為目標(biāo)物質(zhì)時(shí)，熱浸提法提取效率優(yōu)于超聲波提取法，且差異達(dá)到極其顯著，其提取條件為：65％乙醇、料液比1：20，提取溫度80℃，提取時(shí)間2h。以白屈菜堿為目標(biāo)物質(zhì)時(shí)，超聲波提取法效果優(yōu)于熱浸提法，差異極其顯著，其提取條件為95％乙醇、料液比l：10，提取溫度50。C，提取時(shí)間0．5h，提取頻率為85Hz。其次，富集方法
4、的研究。本文考察了六種常見(jiàn)大孔吸附樹(shù)脂對(duì)白屈菜堿的吸附效果，分別是國(guó)產(chǎn)常用的D一101型大孔吸附樹(shù)脂，AB一8型大孔吸附樹(shù)脂，進(jìn)口的HP。20型，HP．2MG型，SP一700型，SP．850型六種型號(hào)。篩選出適合白屈菜生物堿純化工藝用樹(shù)脂——SP．700型大孔樹(shù)脂，此系列樹(shù)脂優(yōu)點(diǎn)突出，前處理和再生均較容易，新樹(shù)脂使用30BV95％乙醇處理即可使用，過(guò)完樹(shù)脂的浸膏容易干燥，經(jīng)HPLC檢測(cè)，雜峰與未過(guò)樹(shù)脂之前大幅減少，富集效果較好。第三，分離純化的研究。采用常規(guī)的中藥化學(xué)手段對(duì)白屈菜藥材進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究。采取硅膠正相柱層析，使
5、用石油醚丙酮和氯仿甲醇洗脫系統(tǒng)，得到兩個(gè)單體化合物，經(jīng)MS、1HNMR、13CNMR、IR色譜鑒定其中一個(gè)為白屈菜堿。第四，體外抑菌試驗(yàn)的研究。選擇臨床常見(jiàn)的致病菌，檢測(cè)不同工藝不同部位的六種提取物的MIC值。不同工藝的提取物分別是：90％乙醇洗脫AB．8大孔吸附樹(shù)脂浸膏、60％乙醇洗脫AB一8大孔吸附樹(shù)脂浸膏、氯仿層提取物、水煎劑提取物、水層提取物、正丁醇層提取物。六種細(xì)菌分別是大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、金黃色葡萄球菌耐藥株、鏈球菌ATCC55121、沙門(mén)氏菌、大腸桿菌耐藥株。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：90％
6、乙醇洗脫AB．8大孔吸附樹(shù)脂浸膏對(duì)大腸桿菌ATCC25922、大腸桿菌耐藥株MIC值分別為7．8125mg／mL和15．625mg／mL。60％乙醇洗脫AB．8大孔吸附樹(shù)脂浸膏對(duì)大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、金黃色葡萄球菌耐藥株、大腸桿菌耐藥株MIC值分別為7．8125mg／mL，7．8125mg／mL，15．625mg／mL，15．625mg／mL；氯仿層提取物對(duì)對(duì)大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、金黃色葡萄球菌耐藥株、大腸桿菌耐藥株MIC值分別為7．8125mg／mL
7、，15．625mg／mL，31．25mg／mL，15．625mg／mL；水煎劑提取物對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC25923、金黃色葡萄球菌耐藥株MIC值分別為7．8125mg／mL，31．25mg／mL。關(guān)鍵詞：白屈菜，白屈菜堿，HPLC，大孑L吸附樹(shù)脂，正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)體外抑菌StudyonExtraction，Abstraction，PurificationandBacteriostaticEffectinVitroofAlkaloidsfromChelidoniumAbstractGreatercelandine(CheBdoniu
8、mmajusL)isthePapaveraceaechelidoniumplant，thealiasiswintergreenbarberryroot，themountainwatermelon．Itisgrowninthemountainvall
