土壤中芐嘧磺隆降解菌的篩選與誘變馴化

土壤中芐嘧磺隆降解菌的篩選與誘變馴化

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1、摘要土壤中芐嘧磺隆降解菌的篩選及誘變馴化農(nóng)藥學(xué)專業(yè)碩士研究生翟雨淋指導(dǎo)教師鄧新平教授(摘要)芐嘧磺隧適用于水稻插秧田和直播田防除鴨舌草、眼予草、節(jié)節(jié)菜、陌上菜、矮慈姑等蠲時(shí)雜草,以及警毛草、異型莎革、水莎革、碎米莎草、螢藺等莎葷辯雜草,具有高效、廣譜、低毒及低用量等優(yōu)點(diǎn),是目前廣泛用于稻田雜草防治的主要除草劑之一。芐嘧磺隆除草劑選擇性強(qiáng),生物活性高,對(duì)不同作物的敏感性差異很大,因而殘留的芐嘧磺隆對(duì)敏感作物易產(chǎn)生藥害。本試驗(yàn)通過在土壤中富集培養(yǎng)、分離出對(duì)芐嘧磺隆具有較好降解作用的微生物,進(jìn)一步通過誘交馴化方法,以提高其芐嘧磺隆的降解熊力,為今后利用微生物治理芐嘧磺隆的相關(guān)研究提供一

2、定參考。主要結(jié)論如下:1耐藥菌的馴化培養(yǎng)和分離透過逐步提嵩芐瞳磺隆濃度進(jìn)行羽曩:培養(yǎng),經(jīng)反復(fù)涂板、劃線分離,褥到了37株熊耐受700mg/L芐嘧磺隆的菌株,其中污染土壤中分離得到21株,農(nóng)田生土中分離到16株。2降解效果濺定采用HPLC法(配紫夕}檢測器),在C18反相柱(250ramX4.6ram)、流動(dòng)提乙腈+0.5%冰醋酸:55+45(VI+V2)、流速:lmL/min、檢測波長254nm、柱溫30"C、進(jìn)樣攝20/旺L的條搏下,對(duì)37株耐藥菌對(duì)芐噻磺隆的降解效果進(jìn)行測定,以采盤l基tJtl籬陽農(nóng)藥廠排污I:21污染土壤中分離的C06菌株降解效果最好,其降解率為32.4%。

3、經(jīng)西南大學(xué)植保學(xué)院植物病理研究室鞫大連寶生物有限公司,采用綴菌形態(tài)學(xué)釋分J予生物簽定,確定C06菌株屬類芽孢桿菌科,短短芽孢桿菌屬細(xì)菌(Brevibacillus)。3.最佳培養(yǎng)條件通過一系列實(shí)驗(yàn),得到適合C06在芐嘧磺隆環(huán)境下生長的最適條件為:以500me/L濃度的芐嘧磺隆為C源和N源,最適生長溫度29"C,最適生長pH值7.0。3誘變馴化成果通過對(duì)C06菌株進(jìn)行紫外誘變和化學(xué)誘變,獲得兩株誘變菌uv40-60與m3—60,分別是在254nm40W紫外燈照射60s和化學(xué)誘變劑MNNG在pH-7.5處理60min詹得到,其西南大學(xué)碩士學(xué)能論文對(duì)芐噬磺隆的降解率達(dá)至438。9%和3

4、5。2%。綜上所述,本研究篩選得到了對(duì)芐嘧磺隆具有較好降解效果的菌株C06,經(jīng)~次紫外線和化學(xué)誘變,在一定程度上提離了鎣株的降解麓力,雖然提高幅度并不是十分理想,艇至少證明采用誘變方式以提高菌株對(duì)芐嘧磺隆降解能力的方式是可行的。如果能夠適當(dāng)增加誘變次數(shù),輔以逐漸增加芐嘧磺隧的弱化培養(yǎng),有望得到更高降髂能力的菌株。此研究結(jié)果不僅為芐嘧磺隆降鰓菌的篩選、培育提供了重要的理論依據(jù),也為其他農(nóng)藥離效降解菌的選育提供了方法參考。2關(guān)鍵詞;芐嘧磺?。赫T變馴化;降解菌;篩選;高效液相色譜摘要ScreeningofBensulfuron-—methylDegradingBacteriainSoi

5、landMutagenizingMastercandidate:ZhaiYulinAdvisor:ProfessorDengXinpingAbstractBensulfuron-methylisforcontrollingweedsinplantingricefields,suchasMonochoriavaginalis,Potamogetondis蠢nctus,andsewfam蓮yweedssuchasSagittariapygmaeaandCyperaceae,etc.,bensulufuron-methylisconsideredasakindofhighefficie

6、ncy,wildused,lowtoxicandlow-dosageherbicide,whichis硝茈lyusedinriceweedcontrollingandoneoftheprimaryherbicides.Bensulfuron·methylisofhighselectivityandbiologicalactivity;itssensitivityvariesfromcropstocrops;therefore,thechemicalinjuriesaxeeasytobetakenplacebyresidualBensulfuron—methylonsensitiv

7、ecrops.Thewayofenrichmentcultivationinsoil,isolatesthedegradingmicrobeforBensulfuron-methylisadoptedinthisstudy.Then,theeffectsofdegradingmicrobeofBensulfuron-methylWeredeterminedbyHPLConebyone.Thebestdegradingbacteriawasrelegatedtointerrelat

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