生物樣品與中藥制劑中中藥活性成分聯(lián)用色譜的分析

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1、碩亡學(xué)位論文摘要中醫(yī)藥是中華民族一個偉大的寶庫。當(dāng)今世界在回歸自然思潮的影響下，許多國家尋找天然藥物的呼聲日漸高漲，而中藥以其豐富的資源、獨特的療效、毒副作用少等特點，已引起世界各國的關(guān)注。尤其是近年來西方發(fā)達(dá)國家醫(yī)藥市場逐漸接受天然藥物，這給我國的中藥現(xiàn)代化發(fā)展提供了前所未有的機(jī)遇。中藥質(zhì)量控制和中藥藥代動力學(xué)研究是中藥現(xiàn)代化的兩個主要方面。因此采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)闡明其有效成分和作用機(jī)理，掌握其在體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄過程的特點，用可靠的科學(xué)數(shù)據(jù)來評價和監(jiān)控中藥的內(nèi)在質(zhì)量，保證中藥用藥安全和有效，改善中藥科技含量過低，是當(dāng)前的首

2、要任務(wù)。聯(lián)用色譜技術(shù)是從聯(lián)用技術(shù)入手，通過有效的利用色譜，光譜或質(zhì)譜提供的聯(lián)合信息，從而建立起對中藥和生物體液等復(fù)雜體系快速、準(zhǔn)確、可靠、靈敏的分析方法。因此，基于目前的色譜開發(fā)平臺，我們開展了如下創(chuàng)新性的研究：(1)基于陽離子表面活性劑CTAB在濃度低于CMC時吸附在二氧化硅包裹的磁性納米顆粒上形成混合膠束，我們采用了這種CTAB．Si02／Fe304混合膠束作為納米萃取固定相萃取和富集生物樣品中的化合物。以中藥大黃的主要活性物質(zhì)為例，用HPLC／FLD方法檢測血清，尿液中的大黃酸和大黃素?？疾炝酥饕蛩厝绫砻婊钚詣┑臐舛取⒋判约{

3、米顆粒的量、吸附時間及解吸附條件等對萃取效率的影響。結(jié)果顯示，該方法準(zhǔn)確度、靈敏度高，大黃酸和大黃素的檢測下限低，在尿液中分別為0．2ng／mL和O．5ng／mL，血清中分別為7ng／mL和10ng／mL。也獲得了較滿意的回收率(92．76％一109．90％)。(2)建立了一種簡單、快速、靈敏的膠束液相色譜方法(MLC)直接檢測中藥制劑和生物樣品中的隱丹參酮(CT)和丹參酮IIA(TS)。CT和TS為中藥丹參中主要活性成分，因它們具有強(qiáng)而廣的藥理作用得到大家的廣泛關(guān)注。MLC以pH為5的0．15MSDS．8％正丁醇溶液作流動相，在分

4、析生物樣品時不需要任何的樣品前處理，相對傳統(tǒng)的樣品前處理方法如蛋白質(zhì)沉淀，液液萃取等，節(jié)省了大量的人力物力。實驗中蛋白質(zhì)及內(nèi)源性物質(zhì)對實驗分析無任何干擾和影響。且這種流動相相對于傳統(tǒng)的高效液相色譜水．有機(jī)溶劑流動相更為綠色，說明MLC又是一種環(huán)境友好的分析方法。該方法獲得了好的線性關(guān)系(i'2>0．998)，準(zhǔn)確度、精確度好，回收率高(CT和TS分別處于96．97％一101．86％和97．48％一103．14％之間)。為中藥丹參及制劑中活性成分的藥理，藥代動力學(xué)研究提供了簡單可靠的檢測方法。(3)基于磁性納米粒子易于分離并且是優(yōu)秀的

5、微波輻射吸收劑，我們以磁性II生物樣品及中藥制劑中中藥活性成分的聯(lián)用色譜分析納米粒子作為固體媒介吸收微波能量，建立了新型的磁性納米粒子．微波協(xié)助萃取的方法，用于中藥中活性成分的快速有效的提取。以中藥黃芩為例，比較了加入磁性納米顆粒．微波萃取與傳統(tǒng)的微波萃取的提取效果，結(jié)果表明，在有磁性納米顆粒時，微波萃取不僅時間縮短(60s一40s)，并且萃取所需的有機(jī)溶劑含量少，萃取效率更高。以柚皮甙作為內(nèi)標(biāo)，萃取液通過HPLC—ESI／MS聯(lián)用技術(shù)定性定量分析，回收率在97．6．104．1％之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2．5％。黃芩苷，黃芩素，漢黃芩

6、素的檢測限分別為O．05，1．0和2．0ng／mL。這種方法成功的用于檢測實際樣品中有效成分的分析。關(guān)鍵詞：中藥；生物樣品；高效液相色譜；膠束液相色譜；活性成分III碩i：學(xué)位論文AbstractTraditionalChinesemedicine(TCM)isagreattreasure．houseoftheChinesenation．Recently，undertheinfluenceofbacktonature，searchingfornaturalmedicinesiSattractingmoreandmoreattenti

7、on，whileTCMhasarousedtheconcernofallcountriesintheworldforitsrichresources，uniqueeffects，fewersideeffects．etc．Moreover，theacceptanceofnaturalmedicineinwesterndevelopedcountriesprovidesthedevelopmentofmodernizationofTCManunprecedentedopportunity．QualitycontrolofTCMandit

8、spharmacokineticsarethetwoaspectsofmodernizationofTCM．Therefore，Usingmodernscienceandtechnologytoclarifytheroleofitsa