日本落葉松×長白落葉松無性系間生根差異的分子機(jī)制

日本落葉松×長白落葉松無性系間生根差異的分子機(jī)制

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時(shí)間:2019-02-02

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1、分類號Q943.2密級公開UDC學(xué)位論文日本落葉松×長白落葉松無性系間生根差異的分子機(jī)制MolecularMechanismofDifferentRootingCapacitybetweenTwoClonesofLarixleptolepis×Larixolgensis馮健指導(dǎo)教師姓名張守攻研究員申請學(xué)位級別博士專業(yè)名稱林木遺傳育種研究方向林木生物技術(shù)論文提交日期2008年5月論文答辯日期2008年6月學(xué)位授予日期2008年7月答辯委員會主席評閱人北京·中國林業(yè)科學(xué)研究院學(xué)位論文日本落葉松×長白落葉松無性系間生根差異的分子機(jī)制學(xué)位論文作者馮健指導(dǎo)教師姓名張守攻研究員指導(dǎo)小組成員齊力旺研究員

2、申請學(xué)位級別博士專業(yè)名稱林木遺傳育種研究方向林木生物技術(shù)論文答辯日期2008年6月中國·北京DissertationfortheDegreeMolecularMechanismofDifferentRootingCapacitybetweenTwoClonesofLarixleptolepis×LarixolgensisCandidate:FENGJianSupervisor:ZHANGShougongAssociateSupervisor:QILiwangAcademicDegreeAppliedfor:Ph.DSpeciality:GeneticsandBreedingofTreeDa

3、teofDefence:June,2008Degree-Conferring-Institution:ChineseAcademyofForestry匿名評閱論文論文編號中國林科院博士學(xué)位論文題目:日本落葉松×長白落葉松無性系間生根差異的分子機(jī)制EnglishTitle:MolecularMechanismofDifferentRootingCapacitybetweenTwoClonesofLarixleptolepis×Larixolgensis二級學(xué)科:(專業(yè)名稱)林木遺傳育種學(xué)位論文答辯預(yù)定日期:2008年6月20日通訊地址:北京頤和園后中國林科院研究生院,100091聯(lián)系電話:0

4、10-62888546;傳真:010-62888546電子郵址:yanghg@caf.ac.cn獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得本研究生培養(yǎng)單位或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:日期:年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解中國林業(yè)科學(xué)研究院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,中國林業(yè)科學(xué)研究院有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送

5、交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國林業(yè)科學(xué)研究院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名:導(dǎo)師簽名:年月日年月日學(xué)位論文作者畢業(yè)聯(lián)系方式工作單位:聯(lián)系電話:電子郵件:通訊地址、郵編:摘要無性繁殖是現(xiàn)代林業(yè)發(fā)展的前提。扦插是林木無性繁殖的主要方式,優(yōu)良品種進(jìn)行良種繁育的關(guān)鍵是扦插生根技術(shù)。尤其是針葉樹,扦插生根率低,是制約利用扦插進(jìn)行無性系林業(yè)發(fā)展的瓶頸。迄今對扦插生根的研究雖然已在生理生化的水平上取得一定進(jìn)展,但其生根相關(guān)的關(guān)鍵機(jī)理仍不清楚。隨著分

6、子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,從分子水平上探討生根機(jī)理、分離生根相關(guān)基因及探討這些基因的功能,進(jìn)而揭示林木扦插生根機(jī)制,為利用基因工程育種手段改良林木提供科學(xué)依據(jù),具有重要的科學(xué)意義和應(yīng)用價(jià)值。本研究選生根率差異較大的2個(gè)落葉松全同胞無性系,取IBA處理后6h、不定根原基發(fā)生、不定根生長等不同根發(fā)育階段的落葉松插穗基部為材料,利用抑制消減雜交技術(shù)構(gòu)建了落葉松扦插生根過程差別表達(dá)cDNA文庫。經(jīng)過測序、DNASTAR軟件序列拼接獲得UniEST,并利用GenBank數(shù)據(jù)進(jìn)行同源性比對;應(yīng)用半定量PCR和實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù),進(jìn)一步研究與分析IAAOL1、RGAOL等基因表達(dá)情況。通過簡并引物技術(shù),克隆部

7、分基因全長并應(yīng)用DNASTAR軟件構(gòu)建進(jìn)化樹。主要結(jié)果如下:(1)落葉松扦插生根實(shí)驗(yàn)表明,落葉松插穗扦插后10d后部分長出愈傷組織,25d時(shí)可見不定根根原基,至80d后插穗根系基本形成,生根率在17.18%—90.63%之間。我們根據(jù)上述根發(fā)育過程,確定了本研究的取材時(shí)期為:經(jīng)IBA處理后6小時(shí)、扦插后30d和扦插后50d。(2)成功構(gòu)建了正、反2個(gè)差別表達(dá)cDNA文庫,經(jīng)測序和生物信息學(xué)分析,共獲得521個(gè)UniEST

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