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《白藜蘆醇對胃癌bgc823細胞中凋亡相關基因pdcd5表達影響的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、鄭州大學2(X為屆碩士研究生畢業(yè)論文白要蘆醇對胃癌BGC-823細胞中凋亡相關荃因PDCDS表達影響的研究白蔡蘆醇對胃癌BGC·823細胞中凋亡相關基因PDCDS表達影響的研究碩士研究生柴雅玫導師文小崗副教授陳奎生教授鄭州大學基礎醫(yī)學院病理學教研室河南省腫瘤病理重點實驗室河南鄭州450052摘要背景和目的胃癌是消化系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤之一，目前胃癌己成為中國內地第三大常見腫瘤，嚴重威脅人民的健康和生命，是我國重點研究的惡性腫瘤之一。人程序化死亡分子5(thehumanprogranued。elldeaths，PnCDS)基因是
2、由北京大學人類疾病基因研究中心1999年在國際上首先報道的一個人類新基因，是從人白血病細胞株TF一1細胞中克隆到的凋亡相關新基因(GeneBank登記號AF014955)。PDCDS定位于19q12一q13.l，參與細胞凋亡過程的調控。PDCDS的mRNA在50余種人類組織中均有表達，并不限定于造血系統(tǒng)，其中在成年心、翠丸、’腎、’腎上腺及胎盤中高表達，其中胚胎組織表達明顯低于成年組織，國內外己有多家實驗室利用不同技術發(fā)現(xiàn)PDCDS在疾病情況下，特別是在腫瘤、自身免疫性疾病和局部損傷的情況下表達明顯下降。白黎蘆醇(r。Svera
3、trol，Res)是廣泛存在于葡萄、虎杖、花生等藥用植物中的一種多酚類化合物，作為低毒的天然藥物，對消化、呼吸、血液、生殖等多個系統(tǒng)來源的腫瘤細胞有抑制作用，可顯著抑制多種人類腫瘤細胞的生長、誘導腫瘤細胞凋亡。研究表明它可以通過抗氧化、抑制環(huán)氧化酶(COX)、抑制細胞色素P450酶、誘導腫瘤細胞分化和促進腫瘤細胞凋亡等來發(fā)揮抗癌作用。為探討白黎蘆醇對人胃低分化腺癌BGC一823細胞中PocDS蛋白和mRNA表達鄭州大學2以拍屆碩士研究生畢業(yè)論文白縈蘆醉對胃癌BGC-823細胞中況亡相關基因PIX刃5表達形響的研究的影響以及白黎蘆
4、醇對BGC一823細胞生長的抑制作用，本研究采用免疫細胞化學SP法檢測PDCDS在BGC一823細胞中的蛋白表達;采用原位雜交技術檢測BGC一823細胞中PDCDS在mRNA水平上的表達;采用流式細胞術和TUNEL法檢測BGC一823細胞的增殖與凋亡。探討PDCDS在BGC一823細胞中的表達與BGC一823細胞凋亡的相關性，為胃癌的臨床治療提供理論依據(jù)。材料和方法1.標本:人胃低分化腺癌細胞BGC一823購自中科院上海細胞生物學研究所，經復蘇孵育，傳代分為不同的實驗組，分別用25靦o1/L、50陽ol/L、100枷01/L、2
5、00靦01/L的白黎蘆醇處理BGC一823細胞24h、48h、72h。并設空白對照組(培養(yǎng)液對照組)，溶劑對照組(DMSO對照組)，順鉑組(3瑰/ml)，聯(lián)合用藥組(白黎蘆醇200靦o1/L+)頃鉑3瑰/m1)。2.應用免疫細胞化學SP法檢測各組BGC一823細胞中PDCDS蛋白表達。3.應用原位雜交技術檢測各組BGC一823細胞中PDCDSmRNA表達。4.應用流式細胞技術檢測各組分別作用24h、48h、72h細胞的增殖分化情況。5.應用流式細胞技術檢測各組分別作用24h、48h、72h細胞的凋亡情況。6.應用TUNEL法檢測
6、各組作用24h細胞凋亡的情況。7.采用SPSSn.0軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料用均數(shù)士標準差(又士S)表示，兩組均數(shù)的比較用t檢驗(t一test);兩組以上均數(shù)的比較用方差分析(ANV以);以a二0.05為顯著性檢驗標準。結果1.免疫細胞化學結果:PocDS蛋白在人胃低分化腺癌BGC一823細胞中低表達;以25靦01/L、50陽01/L、100陽01/L、200陽01/L4種不同濃度的白黎蘆醇作用于BGC一823細胞24h、48h、72h后PocDS蛋白表達均較空白對照組有所升高;3個時間段內隨著濃度增加，PDCDS蛋白表達增高
7、，且呈濃度依賴性，50一200陽ol/L白葬蘆醇組與空白對照組及溶劑對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義(只0.05)，各實驗組之間兩兩相比，差異有統(tǒng)計學意義(只0.05):4個實驗組中隨著時間延長，PDCDS蛋白表達升高，差異無統(tǒng)計學意義(乃0.05);鄭州大學2以為屆碩士研究生畢業(yè)論文白葬蘆醉對胃癌BGC一23細胞中凋亡相關荃因P以刃5表達形響的研究25陽ol/L白黎蘆醇組、溶劑對照組與空白組相比差異無統(tǒng)計學意義(乃0.05)。3個時間段內實驗組及順鉑組與聯(lián)合組相比，差異有統(tǒng)計學意義(只0.05)，聯(lián)合組中PDCDS蛋白的表達隨著作
8、用時間的延長而升高，以作用72h升高最顯著，三個時間段相比，差異有統(tǒng)計學意義(只0.05)。2.原位雜交結果:PocDSmRNA在人胃低分化腺癌BGC一823細胞中低表達;以25陽01/L、50陽01/L、100枷01/L、200枷01/L4種不同濃度的白黎蘆醇
