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1、原輔材料檢驗(yàn)方法原輔材料(12種):玉米淀粉糖化酶、淀粉酶、硫酸、鹽酸、磷酸氫二鈉、氯化鉀、氯化鈣、純堿(Na2CO3)、燒堿(NaOH)、消泡劑、二、淀粉酶分析(依據(jù)GB8275——87)1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.1外觀:固體粉狀無結(jié)塊,液體不沉淀(高溫酶)1.2酶活力≥2萬單位/克(ml)液體固體:酶活力≥40001.3水分≤8.0%1.4食品級(jí)酶活力≥50000單位/克(ml)液體。2、試驗(yàn)2.1外觀:目視判定2.2酶活力測(cè)定原材料檢驗(yàn)方法第2頁共21頁2.2.1試劑原碘液:稱取分析純結(jié)晶碘11g,分析純碘化鉀22g,混合后,先用少量蒸餾水使碘完全溶解后再加蒸餾水定容至50
2、0ml貯存于棕色瓶?jī)?nèi)。稀碘液:取原碘液2ml,加碘化鉀20g,混合后,加蒸餾水溶解定容至500mL,貯于棕色瓶?jī)?nèi)。2%可溶性淀粉:稱取2.00g可溶性淀粉(以絕干計(jì)),用少量蒸餾水調(diào)勻,徐徐傾入煮沸的蒸餾水中,加熱煮沸至透明為止,冷卻定容至100ml,此溶液當(dāng)天配制。0.02M磷酸氫二鈉—檸檬酸緩沖溶液(PH6.0):稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4﹒12H2O)45.23g和檸檬酸(C6H8O7﹒H2O)8.07g,用蒸餾水溶解定容至1000ml,配好后應(yīng)以酸度計(jì)較正PH值為6.0。標(biāo)準(zhǔn)終點(diǎn)色溶液A液:稱取分析純氯化鈷(COCl、6H2O)40.2439g和分析純重鉻酸
3、鉀0.4878g后,以蒸餾水溶解定容至500ml。B液:稱取鉻黑(C2OH12N8NaO7S)40mg以蒸餾水溶解定容至100ml。使用時(shí)取A液40ml與B液5.0ml混合,此混合液宜冰箱保存,使用15天后需要重新配制。2.2.2測(cè)定程序稱待測(cè)酶粉1.0000~2.0000g或1.00ml酶液,先用少量的40℃,0.02M的磷酸氫二鈉———檸檬酸緩沖液(PH6.0)溶解并用玻璃棒搗碎,將上層清液小心傾入適當(dāng)?shù)娜萘科恐校猎糠衷偌尤肷倭可鲜鼍彌_溶液,如此搗研3~4次,最后全部移入容量瓶中,用緩沖溶液定容至刻度,搖勻,通過4層紗布再用濾紙濾清,濾液供測(cè)定用。測(cè)定:取1.5
4、ml標(biāo)準(zhǔn)終點(diǎn)色溶液于白瓷板空穴內(nèi),作為比較顏色的標(biāo)準(zhǔn),取2%可溶性淀粉20ml和PH6.0磷酸氫二鈉———檸檬酸緩沖溶液5ml于25mm×200mm試管中,在70℃恒溫水浴中預(yù)熱4~5min,然后加入預(yù)先稀釋好的酶液0.5ml,立即記錄時(shí)間,充分搖勻,定時(shí)用滴管取出反應(yīng)液的0.5亳升,滴于預(yù)先充滿比色稀碘液(約1ml)的白瓷空穴內(nèi),穴內(nèi)顏色反應(yīng)由紫色逐漸變?yōu)榧t棕色,與標(biāo)準(zhǔn)終點(diǎn)色相同時(shí),即為反應(yīng)終點(diǎn),并記錄時(shí)間T(分鐘)。注:(1)酶反應(yīng)全部時(shí)間控制在2~2.5min之間。(2)測(cè)定時(shí)采用40瓦日光燈照明,燈與瓷板的間距應(yīng)為60mm左右為宜。(3)白瓷板可用10ml比色管
5、代替。2.2.3計(jì)算1g酶粉或1ml酶液于70℃,PH6.0條件下,以1小時(shí)液化可溶性淀粉的克數(shù)來表示(克可溶性淀粉/克小時(shí)或克可溶性淀粉/ml小時(shí))。原材料檢驗(yàn)方法第3頁共21頁60X=(————×20×2%×n)-0.5T式中:X——酶活力單位μ/gn——稀釋倍數(shù)T——測(cè)定記錄時(shí)間60——分鐘數(shù)20——可溶性淀粉的毫升數(shù)0.5——測(cè)定時(shí)稀酶液用量ml2.3水份測(cè)定2.3.1于已知恒重的40mm×25mm稱量皿中,稱取酶粉2.0000g,在105~110℃恒溫干燥箱內(nèi)烘2小時(shí),移至干燥中冷卻,稱重,再在干燥箱內(nèi)烘干,直至恒重。(測(cè)定水分的恒重是前后2次稱得的質(zhì)量之差不
6、超過2mg)2.3.2計(jì)算W1-W2X(%)=——————×100W1-W式中:X——樣品中水分的含量(%)W——稱量皿質(zhì)量(g)W1——烘干前皿加樣品質(zhì)量(g)W2——烘干后皿加樣品質(zhì)量(g)三、糖化酶分析(依據(jù)GB8276—87)1、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.1外觀:粉狀,無結(jié)塊。1.2酶活力≥30000單位/g1.3水分≤8.0%2、試驗(yàn)方法2.1外觀:目視判定2.2酶活力測(cè)定2.2.1試劑2.2.1.10.1M乙酸——乙酸鈉緩沖液(PH4.6):稱取6.7g乙酸鈉(CH3COONa·3H2O),吸取冰乙酸液2.6ml,用蒸餾水定容1000ml,上述緩沖液應(yīng)以酸度計(jì)校正PH值。
7、2.2.1.20.5M硫代硫酸鈉溶液a、配制:稱取硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)24.82g,碳酸鈉(Na2CO3)原材料檢驗(yàn)方法第3頁共21頁0.2g,原材料檢驗(yàn)方法第4頁共21頁溶于煮沸后冷卻的蒸餾水中定容至1000ml,即得0.1M硫代硫酸鈉溶液,貯藏于棕色瓶中密閉保存,配制后應(yīng)放置一星期標(biāo)定使用(標(biāo)定后不再標(biāo)定)。b、標(biāo)定:取在120℃干燥至恒重量的基準(zhǔn)重鉻酸鉀0.15g精確稱量,置碘量瓶中,加水50ml使之溶解,加碘化鉀2克,加1M硫酸溶液40ml搖勻密塞,放在暗處10分鐘后,用蒸餾水250ml稀釋,用本液滴定至終點(diǎn)時(shí),