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《液相色譜法同時測定水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、第34卷分析化學(xué)(FENXIHUAXUE)研究簡報第5期2006年5月ChineseJournalofAnalyticalChemistry663～667液相色譜法同時測定水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留3張志剛施冰陳鷺平林立毅周昱(廈門出入境檢驗檢疫局,廈門361012)摘要用液相色譜2可見法同時測定水產(chǎn)品中孔雀石綠(MG)、結(jié)晶紫(CV)及其代謝物隱色孔雀石綠(LMG)和隱色結(jié)晶紫(LCV)的殘留量,并用液相色譜2串聯(lián)質(zhì)譜法進行確證和定量。樣品用乙腈提取,二氯甲烷液液分配,MCX陽離子固相萃取小柱凈化,濃縮定容。以乙酸銨緩沖溶液和
2、乙腈為流動相,經(jīng)C18柱分離后,PbO2柱后衍生;用二極管陣列檢測器在618nm測定孔雀石綠和隱色孔雀石綠,在588nm測定結(jié)晶紫和隱色結(jié)晶紫;并用串聯(lián)質(zhì)譜在電噴霧2多反應(yīng)監(jiān)測離子的模式下,進行質(zhì)譜確證和定量;外標(biāo)法定量,內(nèi)標(biāo)亮綠和氘代隱色孔雀石綠校正回收率。液相色譜2可見法的檢出限為MG0.22,LMG0.28,CV0.22,LCV0.25μg/kg;液相色譜2串聯(lián)質(zhì)譜法的檢出限為MG0.014,LMG0.018,CV0.014,LCV0.0084μg/kg。在2～20μg/kg范圍內(nèi),回收率為75%～95%。關(guān)鍵詞高效液相色譜
3、,液相色譜2串聯(lián)質(zhì)譜,孔雀石綠,隱色孔雀石綠,結(jié)晶紫,隱色結(jié)晶紫1引言孔雀石綠(malachitegreen,MG)和結(jié)晶紫(crystalviolet,CV)同屬于堿性三苯甲烷類染料,具有類似的結(jié)構(gòu)(見圖1),在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中,常作為殺菌劑和抗寄生蟲藥,用于防治各種魚病。該類物質(zhì)在魚[1]體內(nèi)代謝為隱色孔雀石綠(LMG)和隱色結(jié)晶紫(LCV)(見圖1),長期殘留于生物體內(nèi)。由于三苯甲烷具有致突變、致畸和致癌作用,歐美、中國和日本等宣布嚴(yán)禁在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用孔雀石綠和結(jié)晶紫,并規(guī)定孔雀石綠(含隱色孔雀石綠)和結(jié)晶紫(含隱色結(jié)晶紫)不
4、得檢出。圖1孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色結(jié)晶紫和亮綠的分子結(jié)構(gòu)Fig.1Chemicalstructureofmalachitegreen(MG),leucomalachitegreen(LMG),crystalviolet(CV),leucocrystalviolet(LCV)andbrilliantgreen(BG)國內(nèi)外對水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留分析的報道主要集中在孔雀石綠和隱色孔雀石綠的測[2～8]定,有HPLC2VIS、HPLC2MS、HPLC2MS/MS等方法;關(guān)于結(jié)晶紫和隱色結(jié)晶紫測定的報道較少,僅有[2
5、,6,7][9]HPLC2VIS法、HPLC2MS法;同時測定孔雀石綠、結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物殘留的HPLC2MS/MS方法在國內(nèi)外均未見報道。本研究采用液相色譜2柱后衍生2可見法同時測定MG、LMG、CV、LCV殘留量,并建立了串聯(lián)質(zhì)譜確證方法。實驗表明,該方法的靈敏度和準(zhǔn)確度較高,凈化效果好,各項技術(shù)指標(biāo)均符合殘留分析的要求,可以滿足各國的檢測要求。2實驗部分2.1儀器與試劑1100型高效液相色譜儀(美國Agilent公司),配有二極管陣列檢測器(DAD);API3000串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀(美國ABI公司);T18型組織勻漿機(德國
6、IKA公司);固相萃取柱60mg/3ccWatersOasisMCX陽離子交換柱?？兹甘G、隱色孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色結(jié)晶紫、亮綠為Sigma公司試劑;氘代隱色孔雀2005207203收稿;2005212220接受?1994-2007ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net664分析化學(xué)第34卷石綠D62LMG(Bis2(42dimethylamino2phenyl)2phenyl2D52methane2D
7、1)購自WITEGA,用乙腈分別配制成100mg/L標(biāo)準(zhǔn)貯備液;乙腈、甲醇為色譜純(Merck試劑);實驗用水為Millipore超純水;其它試劑為分析純(上海試劑廠)。2.2樣品處理2.2.1提取準(zhǔn)確稱取5.00g樣品于100mL離心管中,加入50μL內(nèi)標(biāo)BG和D62MG(1mg/L),加入1mL鹽酸羥銨(0.25g/mL)、1mL對甲苯磺酸(0.05mol/L)、2mL乙酸銨溶液(0.1mol/L乙酸銨,冰乙酸調(diào)pH4.5)和40mL乙腈,均質(zhì)2min(10000r/min),離心3min(3000r/min),將上清液轉(zhuǎn)移到
8、250mL分液漏斗中,用20mL乙腈重復(fù)提取殘渣一次,合并上清液。于分液漏斗中加入30mL二氯甲烷,35mL水,振搖1min,靜置分層,收集下層有機層于150mL梨形瓶中,再用20mL二氯甲烷萃取一次,合并二氯甲烷層,45℃減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。2.2
