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1、吳茱萸對(duì)大鼠肝線粒體呼吸功能的影響吳玉霞（江西中醫(yī)學(xué)院330004）黃麗萍（江西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院330004）中文摘要目的：本試驗(yàn)嘗試從給藥組與空白組表征大鼠肝臟線粒體呼吸功能各指標(biāo)變化的角度，探索吳茱萸對(duì)機(jī)體呼吸功能的調(diào)控機(jī)制，以證實(shí)吳茱萸對(duì)大鼠肝臟線粒體呼吸功能的影響。方法：采用Clark氧電極法測(cè)定大鼠肝臟線粒體在密閉反應(yīng)體系中耗氧的變化，以確定線粒體耗氧速率。結(jié)果：與空白組比較，給藥組有較高的RCR，差異顯著。結(jié)論：吳茱萸組通過(guò)加快Ⅲ態(tài)呼吸耗氧速率，降低Ⅳ態(tài)耗氧速率而提高RCR。關(guān)鍵詞吳茱萸；肝臟線粒體；呼吸功能ABSTRACTPurpose:ToprovetheeffectofEv
2、odiarutaecarpaontherespiratorysystemofmitochondriainmouseliver,theindesofthesehavebeendetected,andalsotheRegulatorymechanism.Methods:TheClarkoxygenelectrodeisusedtotestthechangeofoxygen,whichconsumedbymitochondriuminmouseliver,tocalculatetherateoftheconsumptionofmitochondrialoxygen.Result:Compared
3、withtheblankgroup,theadministrationgrouphaveahigherlevelofRCR,andthedifferencewasobvious.Conclusion：EvodiarutaecarpaishelpfultothehigherlevelofRCR,byacceleratingtherateoftheoxygenconsumptionofstateⅢ,andreducingthatofstateⅣ.KeywordsEvodiarutaecarpa；livermitochondria;respiratorychainfunction前言9/9現(xiàn)代實(shí)
4、驗(yàn)已證實(shí),寒證的出現(xiàn)可能與人體能量代謝降低有關(guān)，由于能量代謝降低，身體熱量不足，體溫較低，呼吸緩慢，心跳減慢，心搏出量減少，體表毛細(xì)血管及小動(dòng)脈反射性收縮，大腦皮層興奮性減低而產(chǎn)生上述一系列“寒”的證候[1]。溫里藥具有溫中散寒、補(bǔ)火助陽(yáng)、回陽(yáng)救逆等功效，通過(guò)提高能量代謝對(duì)于寒證患者有很好的調(diào)節(jié)作用。吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸、石虎或疏毛吳茱萸的干燥近成熟果實(shí)，屬熱性中藥代表，具有散寒止痛、降逆止嘔、助陽(yáng)止瀉的功效。生物能量是維持機(jī)體生命的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，能量代謝是人體物質(zhì)代謝的最基本形式。線粒體是細(xì)胞活動(dòng)的主要供能場(chǎng)所，是物質(zhì)代謝和能量轉(zhuǎn)化的中心站[2]。線粒體通過(guò)氧化磷酸化(oxidati
5、vephosphorylation，OXPHOS)生成大量ATP供應(yīng)細(xì)胞內(nèi)各種化學(xué)反應(yīng)與功能的能量需要[3]。本實(shí)驗(yàn)嘗試從給藥組與空白組表征大鼠肝臟線粒體呼吸功能各指標(biāo)變化的角度，探索吳茱萸對(duì)大鼠肝臟線粒體呼吸功能的影響，以期探討熱性中藥影響能量代謝的途徑與機(jī)制。正文1試驗(yàn)材料1.1試驗(yàn)動(dòng)物健康雄性SD大鼠40只，體重220士20g，由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物質(zhì)量合格證編號(hào):SCXK（贛）2006－0001；將大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為4組，每組10只動(dòng)物，分別為吳茱萸20天組、吳茱萸30天組、吳茱萸40天組、空白組。試驗(yàn)期間動(dòng)物均飼養(yǎng)于同一環(huán)境下，保持室溫18～24℃，環(huán)境安靜，動(dòng)
6、物隨意進(jìn)食進(jìn)水，空白組給等體積生理鹽水。所有動(dòng)物于試驗(yàn)前12h禁食，但自由飲水。1.2試驗(yàn)藥材吳茱萸，購(gòu)自北京鶴元堂醫(yī)藥科技有限公司。1.3試驗(yàn)試劑蔗糖（solarbio）、甘露醇（天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司）、EDTA-2K（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司批號(hào)：F20080423）、KCl（上海實(shí)驗(yàn)試劑有限公司批號(hào)：200805025）、KH2PO4（天津市福城化學(xué)試劑廠批號(hào)：20080913）、Tris（solarbio）、HCL（上海焱晨化工實(shí)業(yè)有限公司）、線粒體提取試劑盒（碧云天生物技術(shù)研究所）、考馬斯亮藍(lán)G-250（sigma公司）、琥珀酸鈉（sigma公司）、ADP-2Na（si
7、gma公司）、Janusgreen9/9B（sigma公司）、95%乙醇（天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司批號(hào)：20090123）、85%磷酸（天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司批號(hào)：20081203）。1.4儀器設(shè)備782-1ChannelOxygensystem（StrathkelvinInstruments），低溫高速離心機(jī)（Thermo），-80℃冰箱（Thermo），DY89-Ⅱ型電動(dòng)勻漿機(jī)（寧波新芝生物科技股份有限
