資源描述：
《白蘞體外抗腫瘤活性成分篩選及作用機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、湖北中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文白蘞體外抗腫瘤活性成分篩選及作用機(jī)制研究姓名：張夢(mèng)美申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：中藥學(xué)指導(dǎo)教師：黃必勝20120524摘要中藥白蘞為葡萄科蛇葡萄屬植物白蘞(Ampelopsisjaponic(Thumb．)Makino)的干燥塊根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。其味苦、辛，微寒，具有清熱解毒、消癰散結(jié)、斂瘡生肌等功效，臨床上多用于治療癰疽發(fā)背，疔瘡，瘰疬，燒燙傷等癥狀?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，該藥具有抗菌、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)及抑制毛發(fā)生長(zhǎng)等作用。目前，關(guān)于白蘞的臨床應(yīng)用以及其藥理活性研究大多還集中在抑菌作用方面，而它的抗腫瘤作用也已經(jīng)開(kāi)始引起大家的關(guān)注。本研究采用生物活性指導(dǎo)下的有效成
2、分分離方法，分離篩選出白蘞抗腫瘤的活性部位及其活性成分，并探討其抗腫瘤的作用機(jī)制，同時(shí)還研究了白蘞不同組分的急性毒性，為白蘞的進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。本文主要完成了以下工作：1采用MTT法，選擇人肝癌細(xì)胞株HepG2以及乳腺癌細(xì)胞株A2480，對(duì)白蘞醇提物的石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、水溶液部位進(jìn)行抗腫瘤活性研究，篩選出更加敏感的HepG2細(xì)胞株作為研究的受試對(duì)象。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，乙醚部位和乙酸乙酯部位為白蘞抗腫瘤活性最好的兩個(gè)部位。2采用硅膠柱層析，依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、乙醇、甲醇對(duì)活性部位進(jìn)行洗脫，分離得到五個(gè)部分。采用MTT法對(duì)這5個(gè)部分進(jìn)行抗腫瘤活性的篩選，結(jié)果顯示，乙
3、醚和乙酸乙酯部分的抗腫瘤活性較其它三個(gè)部分更好，其中，乙醚部分抗腫瘤活性最佳。3采用硅膠柱層析、LH-20葡聚糖凝膠柱等現(xiàn)代色譜分離手段，以生物活性為指導(dǎo)進(jìn)行分離，從活性最好的乙醚部分中共分離出7種化合物。再通過(guò)1H-NMR、13C-NMR等現(xiàn)代波譜方法，對(duì)分離出的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，最終確定了其中的5個(gè)化合物，它們?yōu)椋篋一谷甾醇(D—Sitoster01)、齊墩果酸(O1eanoliCacid)、沒(méi)食子酸(gal1icacid)、棕櫚酸(palmiticacid)、白藜蘆醇(resveratto1)。4采用MTT法，對(duì)齊墩果酸、沒(méi)食子酸、白藜蘆醇進(jìn)行抗腫瘤活性研究。結(jié)果顯示，齊墩果酸、沒(méi)
4、食子酸、白藜蘆醇對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2均有抑制作用。其中齊墩果酸48小時(shí)的Ic，。為38．4mg·L-l，沒(méi)食子酸48小時(shí)的IC，。為18．3mg·L一，白藜蘆醇48小時(shí)的IC，。為66．76mg·L～。結(jié)果顯示，沒(méi)食子酸的抗腫瘤作用最強(qiáng)。5通過(guò)hnnexinV-FITC／PI雙標(biāo)記法和Jc一1染色檢測(cè)HepG2細(xì)胞線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)，研究探討白蘞中沒(méi)食子酸抗腫瘤的作用機(jī)制。結(jié)果顯示，沒(méi)食子酸可以通過(guò)降低腫瘤細(xì)胞的線粒體膜電位，最終誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的凋亡，并且凋亡的發(fā)生與壞死是相伴的。6通過(guò)急性毒性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，白蘞水提組分、醇提組分、乙酸乙酯提組分和全組分不能測(cè)出LD，。；經(jīng)最大耐受量試驗(yàn)，測(cè)
5、得4個(gè)組分的MTD值分別為120、154．2、696．6和3．75g·kg～·d1(按生藥量計(jì)算)，分別相當(dāng)于臨床70kg成人每公斤體重日用量的930．9倍、1194．7倍．5398．6倍、29倍，顯示白蘞具有較好的安全性。關(guān)鍵詞：白蘞；抗腫瘤活性；化學(xué)成分；作用機(jī)制；急性毒性TheAmpelopsisvitroanti—tumoractiveingredientscreeningAndthemechanismofstudySpeciality：TraditionalChineseMedicineAuthor：MengmeiZhangTutor：Prof．BishengHuangABSTRAC
6、TAmpelopsisjaponica(Thunb．)Makinoisaplant，．Itsdriedrootshavebeenusedastraditionalmedicineforthetreatmentofanodyneandfebrifuge．a(chǎn)ndonlycontainedinthe”ShenNong’SHerbalClassic"．Bitter，acrid，slightlycold，clearinganddetoxifying，carbuncleSanjie，grabbingasoremyogeniceffectsforthetreatmentoftheulcerback，boil
7、s，scrofula，bumsembolism．Modempharmacologicalstudieshaveshownthatthedrughasantibacterial，immunomodulatory，inhibithairgrowthandanti-tumoreffect．ClinicalapplicationsandpharmacologicalstudiesonAmpelopsisf
