糞腸球菌對大鼠實(shí)驗(yàn)性根尖周炎nfatcl和cathepsink的表達(dá)影響研究

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1、糞腸球菌對大鼠實(shí)驗(yàn)性根尖周炎NFATc1和CathepsinK的表達(dá)影響研究計(jì)：學(xué)位論文：38頁表格：5個(gè)插圖：10幅畢峻溢指導(dǎo)教師：牛衛(wèi)東教授申請學(xué)位級別：碩士學(xué)位專業(yè)名稱：口腔臨床醫(yī)學(xué)論文提交日期：2012年4月論文答辯日期：2012年5月學(xué)位授予單位：大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)位授予日期：2012年6月評閱人：答辯委員會(huì)主席：獨(dú)創(chuàng)性聲明fIYIIfIIIl2IIIfIl2IIllIl8IIll2IIIIIl9IlllIl7IIIllllfIIIf本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和

2、致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名：!咝簽字日期：≯生年』月二細(xì)目錄一、摘要??????????????????????????1(一)中文摘要??????????????????????1(二)英文摘要?????????????????????3二、正文?????????????????????????5(一)前言??????????????????????

3、??5(一)日lJ舌???????“????????????????。，(二)材料和方法?????????????????????6(三)結(jié)果???????????????????????8(四)討論???????????????????????13(五)結(jié)論????000????????????????24(六)參考文獻(xiàn)?????????????????????25三、綜述??????????????????????mDOOIDO?28(一)綜述??????????????????????28(二)參考文獻(xiàn)??????????????????

4、???34四、致謝????????????????DDOQBDIDODOIDDQD????38糞腸球菌對大鼠實(shí)驗(yàn)性根尖周炎NFATcl和CathepsinK的表達(dá)影響研究碩士生姓名：指導(dǎo)教師：指導(dǎo)小組：專業(yè)名稱：畢峻溢牛衛(wèi)東教授王麗娜老師口腔臨床醫(yī)學(xué)摘要目的：建立大鼠根尖周炎模型，研究糞腸球菌對活化T細(xì)胞核因子I(NFATcl)以及組織蛋白酶K(CathepsinK)的表達(dá)影響。方法：選取SD大鼠24只，右側(cè)下頜第一磨牙釉行開髓術(shù)后，隨機(jī)分為A、B兩組，每組12只。A組開髓后，髓腔直接暴露；B組開髓后，髓腔內(nèi)封入糞腸球菌，玻璃離子封閉髓腔。左側(cè)

5、下頜第一磨牙為正常對照組。分別于術(shù)后1周、2周、3周、4周四個(gè)時(shí)間點(diǎn)取3只鼠，進(jìn)行多聚甲醛心內(nèi)固定，取下頜骨組織，拍攝Micro．CT，脫鈣，制作冰凍切片，HE染色觀察根尖區(qū)的病理特征，采用NFATcl和CathepsinK多克隆抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，酶組織化學(xué)染色方法對破骨細(xì)胞進(jìn)行染色，檢測NFATcl和CathepsinK的表達(dá)與分布。結(jié)果：1．Micro．CTA、B組術(shù)后1周，右側(cè)下頜第一磨牙牙周膜增寬；術(shù)后2周，右側(cè)下頜第一磨牙根尖區(qū)出現(xiàn)低密度影；隨著時(shí)間的推移，至術(shù)后4周，牙根和根尖周牙槽骨明顯破壞，形成根尖陰影。正常對照組僅見牙

6、周膜輕微增寬，未見低密度影。2．HE染色A、B組術(shù)后1周，根尖周區(qū)域可見少量中性粒細(xì)胞浸潤；術(shù)后2周，根管內(nèi)的牙髓全部壞死，根尖周區(qū)域可見大量的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤；術(shù)后3周到4周，淋巴細(xì)胞浸潤逐漸增多，在根尖周的牙槽骨區(qū)域出現(xiàn)Howship陷窩，正常對照組根尖周的牙槽骨未見異常。3．免疫組織化學(xué)染色右側(cè)下頜第一磨牙根尖周牙槽骨骨吸收區(qū)域可見CathepsinK陽性細(xì)胞。1周到2周，CathepsinK的表達(dá)增加，達(dá)到高峰；2周到4周，CathepsinK的表達(dá)下降，正常對照組偶見CathepsinK陽性細(xì)胞。NFATcl在根尖膿腫周圍以及

7、根尖滲出液中的炎癥細(xì)胞上表達(dá)，術(shù)后1周到4周表達(dá)逐漸增加，正常對照組無NFATcl陽性細(xì)胞。兩種因子在B組的表達(dá)量明顯高于A組，均高于正常對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。4．酶組織化學(xué)染色右側(cè)下頜第一磨牙根尖牙槽骨骨吸收區(qū)域可見大量TRAP染色陽性的破骨細(xì)胞。術(shù)后1周到2周，破骨細(xì)胞的數(shù)量明顯增加；術(shù)后3周到4周，破骨細(xì)胞的數(shù)量降低，B組高于A組，均高于正常對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。正常對照組根尖周區(qū)域的牙槽骨邊緣偶見單個(gè)破骨細(xì)胞前體。結(jié)論：1．活化T細(xì)胞核因子1(NFATcl)和組織蛋白酶K(CathepsinK

8、)在實(shí)驗(yàn)性根尖周炎模型中高表達(dá)，提示NFATel和CathepsinK參與了根尖周炎的炎癥反應(yīng)和骨吸收過程。2．糞腸球菌在實(shí)驗(yàn)性根尖周炎模型當(dāng)中，使活