健脾理肺方對(duì)哮喘大鼠的免疫調(diào)節(jié)作用

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1、湖北中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文健脾理肺方對(duì)哮喘大鼠的免疫調(diào)節(jié)作用姓名：劉金環(huán)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師：向希雄20120523中文摘要目的：支氣管哮喘是一種慢性氣道炎癥性疾病，目前認(rèn)為氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性、氣道重構(gòu)、Thl／Th2失衡等在支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。健脾理肺方為中醫(yī)大師倪珠英治療小兒哮喘緩解期的經(jīng)驗(yàn)方，有健脾益氣調(diào)肺之功。本課題采用卵蛋白(OVA)誘導(dǎo)建立SD大鼠哮喘模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，通過(guò)ELISA和Real-time．PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)，觀察健脾理肺方對(duì)哮喘

2、大鼠血清IgE、ICAM．1、VCAM．1、IFN-Y、IL-4和肺組織IL．5mRNA、GR-13mRNA的影響，以評(píng)價(jià)健脾理肺方對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性、氣道重構(gòu)及Thl／Th2失衡的影響，探討健脾理肺方防治支氣管哮喘的作用機(jī)制，為提高健脾理肺方治療小兒哮喘的臨床療效提供依據(jù)，為中醫(yī)藥治療小兒支氣管哮喘提供可靠的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。方法：將50只大鼠按體重隨機(jī)分為五組，每組10只，A組為正常對(duì)照組(即空白組)；B組為哮喘模型組(即模型組)；C組為中成藥玉屏風(fēng)散對(duì)照組(即玉屏風(fēng)組)；D組為西

3、藥地塞米松對(duì)照組(即激素組)；E組為中藥健脾理肺方治療組(即治療組)。哮喘大鼠動(dòng)物模型的建立采用卵蛋白致敏激發(fā)法。指標(biāo)：主要通過(guò)ELISA試劑盒測(cè)定實(shí)驗(yàn)大鼠血清IgE、ICAM．1、VCAM．1、IFNmY和IL．4的含量，通過(guò)實(shí)時(shí)定量一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real．time．PCPO檢測(cè)實(shí)驗(yàn)大鼠肺組織IL．5mRNA、GR-13mRNA的表達(dá)水平，觀察大鼠肺組織病理形態(tài)學(xué)方面的改變。結(jié)果：1．對(duì)哮喘大鼠血清IgE的影響模型組-9空白組比較，]gE水平明顯增高，統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著差別(P<0．01)；治療組

4、和地塞米松組IgE水平-9模型組相比明顯降低，差別有顯著意義(P<0．01)，與玉屏風(fēng)組相比亦有顯著差異(P<0．01)；治療組與地塞米松組相比無(wú)顯著差異(p=-o．58)。2．對(duì)哮喘大鼠血清IL-4和I腳的調(diào)節(jié)作用模型組的IL．4較空白組明顯增高，而IFN吖明顯降低，差異有顯著意義(P<0．05)；與模型組相比，治療組和地塞米松組的幾．4水平明顯降低、IFN吖水平明顯升高，有顯著差別(P<0．05)；治療組與地塞米松組比較幾．4和IFN吖的平均值均相差不大，無(wú)顯著差異(P--0．63，P--0．

5、26)；治療組與玉屏風(fēng)組相比，IL．4明顯偏低，IFN-q,明顯偏高，且差別有顯著意義(P<0．05)。3．對(duì)哮喘大鼠血清ICAM．1和VCAM．1的影響模型組與空白組相比大鼠血清ICAM一1和VCAM—l的水平明顯增高，差異有顯著意義(P<0．05)；與模型組相比，治療組、地塞米松組和玉屏風(fēng)組的ICAM．1和VCAM．1水平明顯降低，有顯著差別(P<0．05)；治療組與地米組相比無(wú)顯著差異(P=-0．28，P=-0．87)；治療組與玉屏風(fēng)組相比，ICAM．1和VCAM．1的水平明顯偏低，差別有顯

6、著意義(P<0．05)。4．對(duì)哮喘大鼠肺組織IL一5mRNA的影響模型組大鼠肺組織的IL．5mRNA較空白組明顯增高，差異有顯著意義(P<0．05)；與模型組相比，治療組和地塞米松組的IL．5mRNA水平明顯降低，有顯著差別(P<0．05)；治療組的IL．5mRNA表達(dá)水平較地塞米松組更低，差別有顯著意義(P<0．05)；治療組與玉屏風(fēng)組相比，IL一5mRNA偏低，但差別無(wú)顯著意義(P=0．46)。5．對(duì)哮喘大鼠肺組織GR．IjmRNA的影響模型組的GR—13mRNA較空白組明顯降低，差異有顯著意

7、義(P<0．05)；與模型組相比，治療組的GR-13mRNA水平明顯升高，有顯著差別(P<0．05)；與地塞米松組、玉屏風(fēng)組相比，治療組GR-flmRNA表達(dá)水平更高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)．6．對(duì)哮喘大鼠肺組織病理形態(tài)的改變經(jīng)健脾理肺方干預(yù)的哮喘大鼠肺組織病理形態(tài)圖與模型組相比，氣管管壁結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)，炎癥減輕，水腫明顯消失，管腔炎性滲出物明顯減少，n黏膜上皮逐漸修復(fù)，豁膜下層水腫明顯減輕，管腔基本恢復(fù)正常。結(jié)論：1．采取卵蛋白致敏激發(fā)法可以成功建立哮喘大鼠模型。2．健脾理肺方可能有調(diào)節(jié)

8、哮喘大鼠Thl／Th2平衡的作用，同時(shí)可以緩解氣道炎癥、抑制嗜酸性粒細(xì)胞的聚集，并可抑制氣道高反應(yīng)性及氣道重構(gòu)，還可以促進(jìn)GR與糖皮質(zhì)激素結(jié)合的能力。關(guān)鍵詞：支氣管哮喘；緩解期；健脾理肺方IIISpeciaIity：IntheWesterncombinationofPediatriCSAuthor：LiuJinhuanTutor：Prpfessor．XiangXiXiongTheImmunoreguIationofAsthmaRatwithLifeiJianpiRecipeAbst