添加卵泡液或hmg對人未成熟卵母細胞體外成熟培養(yǎng)的影響

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1、鄭州大學碩士學位論文添加卵泡液或HMG對人未成熟卵母細胞體外成熟培養(yǎng)的影響姓名：夏歡申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：孫麗君201204摘要添加卵泡液或HMG對人未成熟卵母細胞體外成熟培養(yǎng)的影響研究生夏歡導師孫麗君鄭州大學第二臨床學院生殖醫(yī)學中心河南鄭州450014大多數(shù)的體外受精一胚胎移植(invitrofertilization，IVF)方案常規(guī)采用控制性超排卵(con們lledovarianhyperstimulation，COH)，COH技術(shù)通?？傻玫?0~14個成熟卵母細胞，但約有

2、15-20％卵母細胞未達到成熟狀態(tài)，這部分未成熟卵在卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射(instracytoplasmissperminjection，ICSI)中去顆粒細胞后常被丟棄，有研究顯示裸卵和帶顆粒細胞的卵在體外培養(yǎng)均可獲得成熟卵母細胞，在此后的培養(yǎng)中其受精率、卵裂率及胚胎的各項指標皆相似，證實了未成熟裸卵母細胞可以進行體外成熟培養(yǎng)。因此充分利用ICSI脫顆粒細胞后的這部分未成熟卵母細胞，使之培養(yǎng)成熟，將會增加ICSI周期的胚胎數(shù)量，患者的助孕成功率也能得到一定的提高：雖然近】0多年來，IVM(inv

3、itromaturation，ⅣM)技術(shù)的應用得到了迅速的拓展，但該技術(shù)目前還處于探索階段，仍然存在成熟率、受精率、卵裂率、可利用胚胎率較低和種植率低等問題。解決這些問題關(guān)鍵在于IVM培養(yǎng)液的成分。盡管圖際上已有公司研發(fā)了人未成熟卵母細胞體外成熟的培養(yǎng)液系統(tǒng)，但所用的培養(yǎng)液可能還缺少卵子成熟所必須的某些物質(zhì)，仍擺脫不了成功率低、不穩(wěn)定等缺陷，本課題就此展開研究，旨在建立一套有效的人卵母細胞體外成熟培養(yǎng)系統(tǒng)，對開發(fā)新的IVM培養(yǎng)系統(tǒng)，改善IVM的臨床結(jié)局有重要意義。摘要目的本課題X寸IVF患者COH后

4、的未成熟卵母細胞進行研究，探討商品化的IVM培養(yǎng)液中添加不同成分對未成熟卵母細胞的體外成熟、受精和胚胎發(fā)育的影響，旨在建立一種有效的人卵母細胞體外成熟培養(yǎng)方案。方法本實驗共選擇216名ICSI患者，平均年齡35．9士5．4，216個ICSI周期，共收集265枚未成熟卵母細胞，未成熟卵母細胞中155枚為MI期，另llO枚為GV期。患者來源于2011年3～11月期I’日J到鄭州大學第三附屬醫(yī)院接受ICSI的助孕患者，助孕指征均為男方因素而行ICSI的不孕患者。配制IVM培養(yǎng)液：A組：商品化的IVM培養(yǎng)液

5、，未添加任何成分；B組(激素組1：添加含0．075IU／mLFSH及0．075IU／mLLH的HMG至基礎(chǔ)IVM培養(yǎng)液中；C組(成熟卵泡液組)：50％基礎(chǔ)IVM培養(yǎng)液與50％人成熟卵泡液配成。在進行ICSI操作過程中，把脫顆粒細胞后觀察到的未成熟卵母細胞，置于事先配制好的IVM液中。分別觀察各組24h和48h成熟情況，成熟后進行ICSI操作，并對此后形成的胚胎進行評分，最后進行統(tǒng)計分析。本課題的開展已獲鄭州大學第三附屬醫(yī)院倫理委員會的批準。每位患者均被事先告知并簽署知情同意書，然后進入本研究。所有數(shù)

6、據(jù)采用SPSSl6．0統(tǒng)計軟件包處理。計數(shù)資料采用Z2檢驗，F(xiàn)ischer的精確檢驗。檢驗水準為a=O．05。結(jié)果1一般情況共采集到未成熟卵母細胞265枚。未成熟卵母細胞中155枚為Mr期，另110枚為GV期，進行體外培養(yǎng)后，24h后成熟的卵母細胞共126枚成熟率為47．5％，48h后成熟的卵母細胞共165枚成熟率為62．3％，成熟的卵母細胞均行ICSI授精。2比較三組培養(yǎng)液對未成熟卵母細胞體外成熟影響三組培養(yǎng)液培養(yǎng)未成熟卵母細胞，24h的成熟率比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>O．05)。C組48h成

7、熟率(74．7％)比A組(53．4％)明顯增高，差異有統(tǒng)計學U摘要意義(P0．05)。三組培養(yǎng)液對MI期卵母細胞進行體外培養(yǎng)后24h成熟率兩兩比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>O．05)。體外培養(yǎng)后48h，C組成熟率(81．7％)高于B組(62．2％)，差異有統(tǒng)計學意義(尸<0．05)。三組培養(yǎng)液對GV期卵母細胞進行體外培養(yǎng)后24h成

8、熟率兩兩比較，差異均無統(tǒng)計學意義(尸>O．05)。體外培養(yǎng)后48h，C組成熟率(62．9％)高于A組(36．8％)，差異有統(tǒng)計學意義(P