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1、分類號S813.3學校代碼101291UDC636學號2009301009褪黑激素影響山羊絨生長的分子機理TheMolecularMechanismofMelatoninAffecttingtheGrowthofCashmere申請人：麗春學科門類：農(nóng)學學科專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖研究方向：絨山羊分子遺傳育種指導教師：李金泉教授論文提交日期：二〇一二年四月本研究由“國家“863”計劃項目”（編號：2007AA10Z151）和“國家自然科學基金項目”(編號：30760163)資助Thisworkwassupportedbygrantsfr
2、omNational“863”ofChina(No.2007AA10Z151)andNationalNaturalScienceFoundationofChina(No.30760163)摘要通過對內蒙古絨山羊埋植褪黑激素（MT）試驗，研究連續(xù)2年埋植MT、只埋植1年和停止埋植對其絨毛生產(chǎn)性能和皮膚中有關絨毛生長相關基因表達量變化的影響，進而為研究絨毛生長的分子機理提供可參考的依據(jù)，也為MT在生產(chǎn)上的運用奠定理論基礎。為研究MT對絨毛生長特性與絨毛品質的影響，每月測定受試羊絨和毛細度、長度及絨毛質量比；同時結合熒光定量PCR實驗和原位雜
3、交實驗，研究埋植MT對絨毛生長相關基因在絨山羊皮膚毛囊中表達的影響。研究結果發(fā)現(xiàn)：埋植MT縮短絨毛生長周期。從7月份開始埋植MT經(jīng)過1年的埋植出現(xiàn)1年內2次脫絨現(xiàn)象，而再持續(xù)埋植1年MT出現(xiàn)2年內4次脫絨現(xiàn)象，然而埋植1年MT后7月份停止埋植將在2年內出現(xiàn)3次脫絨現(xiàn)象，并推遲其翌年春季脫絨時間。雖然秋季脫落的絨比春季抓絨時的絨短，但其絨長度也能滿足生產(chǎn)需要。埋植MT或停止埋植對成年羊春季抓絨時絨厚度、長度和細度無影響；對羔羊連續(xù)2年埋植MT，使其抓絨時絨細度變細，而埋植1年后停止埋植MT具有絨長度變短的趨勢。埋植MT對粗毛長度和生長周期
4、無影響，但對周歲羊埋植MT的當年其粗毛有變細的趨勢。從羔羊階段開始連續(xù)2年埋植MT明顯降低周歲羊抓絨時的絨毛比，但埋植MT具有提高成年羊抓絨時的絨毛比的趨勢。開始埋植MT的當年出現(xiàn)產(chǎn)絨量提高的趨勢，而連續(xù)2年埋植MT后導致第二年產(chǎn)絨量比第一年的產(chǎn)絨量下降；停止埋植MT后，其產(chǎn)絨量變化趨勢與對照組類似。通過RT-PCR實驗研究發(fā)現(xiàn)：在內蒙古成年絨山羊皮膚組織中，毛囊生長前期提高表達量的基因：TGFβ2、Delta1、Notch1、Wnt10b、MSX-2、β-catenin、FGF5、PDGFA、PDGFRa和RORα。絨毛快速生長期低表
5、達的基因：TGFβ2、TGFβRII、Notch1、hairless、Wnt10b、β-catenin、PDGFA、NTRK3、RORα、RORβ和RORγ。退行期至休止期初提高表達量的基因：BMPR1B、TGFβ2、Notch1、hairless、Wnt10b、β-catenin、PDGFA、NTRK3、RORα、RORβ和RORγ。退行期提高后休止期初降低表達量的基因：BMP2和Delta1基因。休止期高表達的基因：BMP2、TGFβRII、PDGFA、NTRK3、RORα、RORβ和RORγ基因。停止埋植MT組和連續(xù)2年埋植MT組
6、在絨毛快速生長期和休止初期Wnt10b基因表達量的下降，可能與埋植MT促使毛囊進入休止期有關。然而連續(xù)埋植1年或2年MT在休止期后期提高Wnt10b基因的表達量、降低BMP2基因的表達量，從而誘導毛囊提前進入了新一輪的生長期。埋植MT可能通過影響RORγ基因的表達來影響Wnt10b的表達，從而降低皮膚中Wnt10b與TGFβ2基因表達量的相關性，從而影響了其它信號通路分子的表達。與對照組相比MT處理組降低毛囊退行期和休止期RORα、RORβ和RORγ基因，休止初期β-catenin基因，以及NTRK3基因休止期的表達量；提高休止初期MS
7、X-2和FGF5基因的表達量。其中，停止埋植MT后也降低絨毛快速生長期TGFβRII、NTRK3、Delta1和RORα基因的表達量，提高休止后期TGFβRII和BMPR1B基因的表達量。連續(xù)2年埋植MT也降低快速生長期BMP2基因，休止期TGFβRII基因的表達量；提高BMPR1B、Notch1和hairless基因在休止前期的表達量。對成年羊7月份開始埋植MT也降低退行期BMP2基因和休止期TGFβRII基因的表達量。Wnt10b、PDGFA和RORα基因為絨毛生長周期相關基因，埋植MT影響毛囊生長周期，而這些基因在皮膚組織中的表達
8、模式也隨著毛囊周期而變化。在皮膚毛囊組織中，TGFβ信號通路通過WNT信號通路調節(jié)其它信號通路，其中TGFβ信號通路中的BMP2和TGFβ2基因在整個毛囊周期性生長過程中具有很重要的作用。原位雜交研究發(fā)現(xiàn)，
