順鉑、環(huán)丙沙星及二者聯(lián)合對人肝癌bel-7402細胞抑制作用體外實驗研究

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1、新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文順鉑、環(huán)丙沙星及二者聯(lián)合對人肝癌BEL--7402細胞抑制作用體外實驗研究姓名：李冬揚申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：李韶山201204新鄉(xiāng)醫(yī)學院碩士學位論文順鉑、環(huán)丙沙星及二者聯(lián)合對人肝癌BEL一7402細胞抑制作用體外實驗研究摘要目的用臨床上常用的抗腫瘤藥物順鉑(cisplatin，DDP)，喹諾酮類抗菌藥物環(huán)丙沙星(cipronoxacin，CIP)及二者聯(lián)合作用于人肝癌BEL一7402細胞，觀察其細胞增殖、損傷修復及遷移的變化，并從分子水平研究DDP、CIP對人肝癌BEL．7402細胞侵襲遷移重要

2、基因MMP的影響，探討DDP、CIP可能的分子機制，從而為臨床進一步應用此藥物治療肝癌提供依據(jù)。方法體外培養(yǎng)BEL．7402細胞，將細胞分成4組，分別為空白對照組、DDP組、CIP組、DDP聯(lián)合CIP組。采用對數(shù)生長期的細胞進行實驗。以四氮唑鹽還原法(MTT法)測定生長抑制率，計算半數(shù)抑制濃度(媽D)；細胞劃痕實驗觀察藥物對肝癌細胞損傷修復能力影響，計算移行愈合率；細胞遷移實驗觀察藥物對肝癌細胞遷移作用，計算其遷移抑制率；應用RT．PCR檢測藥物作用肝癌細胞后MMP．2、MMP．9基因轉(zhuǎn)錄水平的變化。結(jié)果1．不同濃度的DDP、CIP單

3、用及二者聯(lián)合均能抑制BEL．7402細胞的生長，且抑制作用隨藥物濃度增加而增強，差異有顯著性(P<0．01)；DDP的JGD為11．2±0．6umol／L，CIP的IC50為202．3±4．3¨m01／L，DDP聯(lián)合CIP的』Go區(qū)問為9+60～12+250pm01／L；各濃度聯(lián)合組與相應濃度DDP或CIP單藥組相比，抑制率均有顯著性差異(尸<0．01)；聯(lián)合組療效均優(yōu)于單藥組，在一定濃度范圍內(nèi)聯(lián)合用藥表現(xiàn)為相加作用。2．DDP、CIP單用及聯(lián)合都對BEL一7402細胞的遷移愈合能力表現(xiàn)出一定的抑制作用，效果隨著藥物濃度的增加而加強，

4、藥物組的細胞移行愈合率與對照組相比，除DDP組6um01／L，扮0．05，無顯著性差異，其余藥物組差異有統(tǒng)計學意義(尸

5、結(jié)果顯示DDP、CIP單用或聯(lián)合處理后BEL．7402細胞的MMP。2、MMP．9轉(zhuǎn)錄受到顯著抑制(P

6、質(zhì)金屬蛋白酶新皇墮堂墮堡主堂垡堡塞—————————————————————————————————一InvitroStudyofCisplatinandCipronoxacinandCombinationInhibitinghumanhepatomaceUBEL·7402AbStractobjectiveToobseⅣechangesofproliferationandhealingaIldm1鏟ationtreatedCisplatin(DDP)，oneofthemostcommonantitumordmgsusedmc11mc，

7、orCipronoxacin(CIP)，oneofQuinoloneantibacterialdmgsusedinclinic，werechosedtoinvestigatetheircytotoxicef．fectsonhlmlaIlh印atomacell1ineofBEL-7402inVitro·Andtheeffectoftheircolalitiononthekeygeneofmi鏟ation，MMPsandpossiblemolecularmechanismwereevaluatedtosettlefoundationfor

8、usingthosetocure11Ver—cancer1nChnlC．MethodsBEL．7402cellswereculturedinVitroanddiVidedintofourgroups：control，Ci