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1、密級:學校代碼:10075分類號:學號:20091363農(nóng)學碩士學位論文中華鱉性腺分化及溫度對其影響學位申請人:李慧君指導教師:康現(xiàn)江教授管越強教授學位類別:農(nóng)學碩士學科專業(yè):水產(chǎn)養(yǎng)殖授予單位:河北大學答辯日期:二○一二年六月ClassifiedIndex:CODE:10075U.D.C:NO:20091363ADissertationfortheDegreeofM.AgricultureStudyontheDifferentiationofGonadandtheEffectsofTemperatur
2、esonItinTrionyxsinensisCandidate:LiHuijunSupervisor:Prof.KangXianjiangProf.GuanYueqiangAcademicDegreeAppliedfor:MasterofAgricultureSpecialty:AquacultureUniversity:HebeiUniversityDateofOralExamination:June,2012摘要摘要原生殖細胞(Primordialgermcells,PGCs)是生殖細胞的前體,
3、研究PGCs的起源、遷移和分化是動物生殖和發(fā)育生物學的一項重要內(nèi)容。本文對不同發(fā)育階段的中華鱉胚胎進行組織切片,并結合免疫組織化學方法,研究中華鱉PGCs的起源、遷移路徑及分化時間;通過對中華鱉性征,尤其是第二性征的統(tǒng)計分析,探索中華鱉稚鱉早期性別鑒定的標準。本文一方面可以為中華鱉生殖和發(fā)育生物學的研究提供基礎參考,另一方面也為中華鱉雄性化苗種選育提供科學依據(jù)。對中華鱉PGCs起源、遷移和分化的研究顯示:中華鱉的原生殖細胞起源于外胚層,孵化約24h后遷移至生殖新月處增殖,然后沿血管遷移至臍腸系膜遷移到
4、生殖嵴附近,沿腎臟與生殖嵴連接處遷移到生殖嵴。32±0.5℃下孵化,生殖嵴從8d開始隆起,13d發(fā)育成原始性腺,到19d雌雄個體之間有顯著差異,21d分化結束形成精巢和卵巢。溫度對中華鱉性腺發(fā)育及性比影響的研究顯示:從26℃~36℃隨孵化溫度逐漸升高,所需孵化時間逐漸縮短。孵化溫度為32℃和34℃時孵化率最大,隨溫度上升,到36℃孵化率驟減;隨溫度下降,孵化率逐漸下降。其他幾組孵化溫度的數(shù)據(jù)來看,32℃時雄性比率最高,溫度降低或升高時,孵化率均有所下降,但是各組差別并不明顯。對中華鱉性征的研究顯示:對
5、400只稚鱉進行統(tǒng)計,雌雄稚鱉在殼長/殼寬上沒有明顯的區(qū)別;尾長/尾寬、尾長/裙邊寬的數(shù)據(jù)顯示均為雌鱉要大于雄鱉,統(tǒng)計分析結果顯示差異顯著。剛出殼的稚鱉卵巢呈長梭狀,位于腎臟內(nèi)側,卵原細胞在解剖鏡下可以看出成顆粒狀排列在卵巢的皮層,輸卵管位于腎臟另一側,呈乳白色;精巢呈線狀,較卵巢短、橫向直徑小。稚鱉的外生殖器在外觀上沒有什么區(qū)別。nanos1基因的表達的研究顯示,在中華鱉胚胎的性腺中,只有生殖細胞可以表達PGCs,間質(zhì)細胞不能表達,nanos1在卵巢中的表達水平比精巢要高。同時也發(fā)現(xiàn),在腎臟中也有n
6、anos1的表達,nanos1是否具有多重作用、其缺失是否會對除性腺以外的組織正常發(fā)育造成影響等諸多方面還需進一步研究確定。關鍵詞:中華鱉性別分化生殖嵴原生殖細胞性征免疫組織化學IAbstractAbstractTheprimordialgermcells(Primordialgermcells,PGCs)aretheprecursorsofthegermcells.Studyingtheorigin,migrationanddifferentiationofPGCsisanimportantpart
7、oftheanimalreproductiveanddevelopmentalbiology.Thearticlestudiedtheorigin,migration,pathandtimeofdifferentiationoftheTrionyxsinensisPGCsbyobservingthetissuesectionsoftheT.sinensisembryosofdifferentdevelopmentalstagesandimmunohistochemicalmethods.Thearti
8、cleexploredtheearlysexidentificationstandardsofT.sinensisinjuvenilesthroughtheanalysisofsecondarysexualcharacteristics.Ontheonehand,thisarticleprovideabasicreferenceforthestudyofreproductiveanddevelopmentalbiologyofT.sinensis,and