優(yōu)化附著基對(duì)仿刺參(apostichopus japonicus)幼體附著變態(tài)的影響

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1、中國海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文優(yōu)化附著基對(duì)仿刺參（Apostichopusjaponicus）幼體附著變態(tài)的影響姓名：劉超申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：馬甡；包衛(wèi)洋201206優(yōu)化附著基對(duì)仿刺參(彳pDsf把辦D矽淞卸D刀配淞)幼體附著變態(tài)的影響摘要仿刺參養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展的同時(shí)，幼體附著變態(tài)率普遍偏低，附著變態(tài)初期幼體易患“滑板癥"等問題嚴(yán)重影響著仿刺參養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。針對(duì)其他無脊椎動(dòng)物幼體附著變態(tài)的研究表明，附著基的表面材質(zhì)與附著基上的生物群落是影響幼體附著變態(tài)的兩個(gè)重要因素(Zobell，

2、C．E，1935)，而關(guān)于仿刺參幼體附著變態(tài)方面的研究較少。本研究對(duì)仿刺參幼體附著基表面材質(zhì)進(jìn)行了優(yōu)化，同時(shí)采集仿刺參養(yǎng)殖池塘以及自然海區(qū)的附著細(xì)菌，篩選出能夠誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)的高活性細(xì)菌。將表面材質(zhì)優(yōu)化附著基同篩選的高誘導(dǎo)活性細(xì)菌結(jié)合使用，以進(jìn)一步提高仿刺參幼體的附著變態(tài)率，為仿刺參苗種生產(chǎn)提供技術(shù)支持。實(shí)驗(yàn)中利用環(huán)氧樹脂膠將450—1000um、330一450“m以及250—330岬三個(gè)粒級(jí)的蠣殼粉和甘蔗渣分別粘附于透明聚乙烯波紋板表面，形成表面材質(zhì)優(yōu)化附著基。將表面材質(zhì)優(yōu)化附著基在成

3、參養(yǎng)殖池中分別懸掛0、5和10天后取回，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分析不同類型的表面材質(zhì)優(yōu)化附著基對(duì)仿刺參幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)效果。結(jié)果表明，仿刺參幼體在各優(yōu)化附著基上的附著變態(tài)率同其懸掛天數(shù)成正比，且250．330岬蠣殼粉優(yōu)化的附著基【蠣殼粉(s)】誘導(dǎo)仿刺參幼體附著變態(tài)的效果最明顯。將表面材質(zhì)優(yōu)化附著基投入育苗池內(nèi)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)的結(jié)果同樣表明250一330“m的蠣殼粉優(yōu)化的附著基能夠顯著誘導(dǎo)幼體的附著變態(tài)，同波紋板附著基相比，其表面仿刺參幼體的附著變態(tài)率明顯提高。分離篩選得到可以有效形成菌膜的16株附著細(xì)

4、菌，利用16SrDNA方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定，并分析了其對(duì)仿刺參幼體附著變態(tài)的誘導(dǎo)效果。結(jié)果表明，4株細(xì)菌具有明顯誘導(dǎo)效果，其中3株屬于nP“如口加加聊D刀伽屬，另外一株屬于彳加m瓏D聆儺屬。在細(xì)菌附著密度為(1．07—7．84)×106、(6．95—8．48)×107、(1．O卜3．61)×108cells／cm2時(shí)，4株細(xì)菌誘導(dǎo)下的仿刺參幼體附著變態(tài)率分別為為32．50—37．50％、30．00—47．50％、57．50一60．00％，明顯高于對(duì)照組(P<0．05)。培養(yǎng)前述4株細(xì)菌并使其附著于

5、250一330Hm蠣殼粉優(yōu)化的表面材質(zhì)優(yōu)化附著基表面，研究了兩者對(duì)仿刺參幼體附著變態(tài)的綜合誘導(dǎo)效果。結(jié)果表明，無論是波紋板還是蠣殼粉(S)，當(dāng)其表面附著有4株細(xì)菌中的任何一株形成的單種菌膜后，其表面的仿刺參幼體的附著變態(tài)率明顯高于空白波紋板(10．00±8．20％)和無菌膜附著的的蠣殼粉(S)(25．00±5．77％)。分析分別附著有三株AP甜幽口耽廠D朋D，2儺屬細(xì)菌的波紋板同對(duì)應(yīng)的蠣殼粉(s)表面仿刺參幼體的附著變態(tài)率可知，細(xì)菌膜中細(xì)菌密度對(duì)仿刺參幼體的附著變態(tài)率的影響差異不顯著。而當(dāng)附著細(xì)

6、菌么拋加聊伽伽sp．1密度達(dá)到108cells／cm2時(shí)，仿刺參幼體在蠣殼粉(S)表面的附著變態(tài)率(77．50±2．20％)明顯高于其在波紋板表面的附著變態(tài)率(62．50±5．00％)。蠣殼粉(S)同么拋陽聊D胛伽sp．1結(jié)合使用使得仿刺參幼體的附著變態(tài)率高于其與其他細(xì)菌結(jié)合使用(尸<0．05)。故認(rèn)為250—330um蠣殼粉同么加，DmD，?儺sp．1結(jié)合是最佳的附著基優(yōu)化組合。利用蠣殼粉(S)同么拋m聊D挖伽sp．1結(jié)合使用的應(yīng)用示范實(shí)驗(yàn)表明有么拋m聊D挖伽Sp．1結(jié)合的蠣殼粉(S)表面幼體

7、附著變態(tài)密度為(75．00±3．82)ind／dm2，顯著高于無細(xì)菌附著的波紋板(49．00±6．83ind／dm2)、無細(xì)菌附著的優(yōu)化附著基(54．00±4．00in訓(xùn)dIll2)以及有細(xì)菌附著的波紋板(64．00±3．26ind／dm2)表面的附著變態(tài)密度。綜上所述：利用250—330¨m蠣殼粉優(yōu)化的聚乙烯波紋板附著基可使幼體附著變態(tài)率提高50％；4拋，D聊D刀儺sp．1和3株nP甜如a加加m伽伽屬細(xì)菌能使幼體附著變率平均提高58％；4拋m聊D嬲sp．1同250一330Hm蠣殼粉優(yōu)化的聚乙烯

8、波紋板附著基結(jié)合使用，則能使幼體的附著變態(tài)率提高到對(duì)照組的7倍，示范應(yīng)用試驗(yàn)中，其提高比例為53％。250一330肛m蠣殼粉優(yōu)化的附著基同4拋加垅D門儺sp．1結(jié)合使用為生產(chǎn)中解決仿刺參幼體附著變態(tài)率偏低的問題提供了有效的技術(shù)途徑。關(guān)鍵詞：仿刺參(／仞Ds如血印淞／印伽記螂)蠣殼粉甘蔗渣聚乙烯波紋板交替單胞菌屬(彳療P加聊D，?鯽sp．)假交替單胞菌屬(AP甜如日耽陽mD刀娜Sp．)附著變ImpmVem蛐toftheSt豫tllmforlarvals刪ementandmetamorphosiso