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《j亞群禽白血病病毒抗原抗體檢測體系的建立》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
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2、師簽名:萄蘭絲目符號說明㈣8舢9啪3哪8Ⅲ8刪5川2刪Y目錄中文摘要?????????????????????????????????.IABSTRACT????????????????????????????????..III1引言?????????????????????????????????????????????11.1禽白血病J亞群研究現(xiàn)狀????????????????????????.21.1.1ALV—J分子病毒學(xué)特性????????????????????????..21.1.2ALV—J基因組學(xué)????
3、???????????????????????..21.1.3ALV-J的流行病學(xué)??????????????????????????..31.1.4ALV-J的致病性及危害????????????????????????..41.1.5ALV—J的防控????????????????????????????一51.2ALV—J的檢測方法???????????????????????????..51.2.1病毒的分離與鑒定??????????????????????????.51.2.2免疫學(xué)檢測方法????????????
4、???????????????.61.2.3核酸分子檢測方法??????????????????????????.71.3ELISA檢測技術(shù)????????????????????????????..81.3.1.雙抗原夾心法測抗體?????????????????????????91.3.2雙抗體夾心法測抗原?????????????????????????.91.3.3間接法測抗體????????????????????????????.91.3.4競爭法測抗體????????????????????????????.9
5、1.4膠體金試紙條檢測技術(shù)?????????????????????????.91.4.1膠體金技術(shù)的原理??????????????????????????101.4.2膠體金的制備????????????????????????????101.5本課題研究的目的和意義????????????????????????102材料與方法??????????????????????????????..122.1材料???????????????????????????????????????????..122.1.1實驗細胞和動
6、物???????????????????????????122.1.2試驗用菌種、病毒和載體質(zhì)粒?????????????????????122.1.3主要試劑??????????????????????????????122.1.4主要儀器??????????????????????????????122.1.5實驗地點??????????????????????????????132.2目的蛋白原核表達體系的建立??????????????????????132.2.1病毒DNA的獲取??????????????????
7、?????????132.2.2引物設(shè)計與合成???????????????????????????132.2.3目的基因的獲取???????????????????????????132.2.4DH5Q感受態(tài)細胞的制備???????????????????????.142.2.5連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化???????????????????????????142.2.6重組質(zhì)粒pET一30a—gp85的鑒定????????????????????.142.2.7目的蛋白在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達???????????????????15
8、2.2.8包涵體的提取與復(fù)性?????????????????????????152.2.9純化蛋白的WesternBlot檢測????????????????????.162.3間接ELISA檢測抗體方法的建立?????????????????????172.3.1間接ELISA方法檢測