豬圓環(huán)病毒2型感染影響豬瘟弱毒疫苗免疫效果的機(jī)制

豬圓環(huán)病毒2型感染影響豬瘟弱毒疫苗免疫效果的機(jī)制

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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬圓環(huán)病毒2型感染影響豬瘟弱毒疫苗免疫效果的機(jī)制姓名:趙丹萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:宋勤葉20120526摘要豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)可導(dǎo)致感染豬的免疫功能抑制,降低疫苗免疫效果。免疫接種是當(dāng)前我曝預(yù)防豬瘟的主要播施,而牦淶中經(jīng)常出現(xiàn)豬瘟(CSF)疫苗免疫失敗現(xiàn)象,成為困擾豬瘟防控的關(guān)鍵因素之一。本研究通過分析CSF弱毒疫茁免疫之前和免疫之后感染PCV2仔豬的體液與細(xì)胞免疫應(yīng)答、外周血NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群含量以及細(xì)胞因子圖譜的動(dòng)態(tài)變化,揭示PCV2感染影稍CSF弱毒疫苗免疫效粟的機(jī)制。應(yīng)用MTT法對(duì)外周血淋巴細(xì)胞(PBLC)增殖活性的檢測結(jié)果顯示,

2、免疫舞初期CSF弱毒疫苗對(duì)免疫豬外周血淋巴細(xì)胞的增殖能力有輕微的抑制作用,但很快就恢復(fù)正常。而PCV2感染導(dǎo)致初次免疫或加強(qiáng)免疫藉7d、14d,PBLC增殖活性低于V組,隨后逐漸恢復(fù),表明PCV2感染在短期內(nèi)使CSF免疫豬PBLC的增殖抑制加劇。通過流式細(xì)胞術(shù)對(duì)外周血中淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞群含量的分析結(jié)果顯示,V—I和l-v組的淋巴纓胞、NK緬脆積T細(xì)脆泛群(Yh綱胞、乳細(xì)胞、豫細(xì)脆、76T綴驄)的平均含量低于V組,其中以V-I組的細(xì)胞下降更嚴(yán)重。表明CSF弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2均會(huì)引起淋巴細(xì)胞含量降低。應(yīng)鬻實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-timeFQ-PCR)對(duì)PBLC中W

3、N-'/、IL-2、純4、IL-10、IL-12p40、IL.18等細(xì)胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄水平的測定結(jié)果顯示,初次免疫后PCV2感染可導(dǎo)致免疫豬PBLC中IL.2、IFN-y、IL-4、IL.10、IL.12p40、IL.18mRNA的轉(zhuǎn)錄水平明顯降低;加強(qiáng)免疫后可引起磁,lO與IFN-3,和IL-18mRNA的轉(zhuǎn)錄闋時(shí)上調(diào),毪.2和l王疊mRNA的轉(zhuǎn)錄下調(diào)。表明CSFV弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2均能導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄的嚴(yán)重匱乏或紊亂。綜合上述研究結(jié)果表明,PCV2感染可以導(dǎo)致豬瘟疫苗誘導(dǎo)的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答水平低下;PCV2感染弓

4、起的外瘸盎孛_濰巴纓麓缺乏、纓胞因子的嚴(yán)重匱乏或轉(zhuǎn)錄

5、紊亂是造成豬瘟兔疫失敗的重要原因。關(guān)鍵詞:豬圓環(huán)病毒2型;豬瘟弱毒疫苗;抑制;免疫應(yīng)答:機(jī)制蚴9Ⅲ搬掰1¨¨玨琵■l刪3㈣4?刪1刪2舢YMechanismofPorcineCircovirusType2InfectionInfluencingImmuneResponsesofClassicalSwineFeverAttenuatedVaccineAuthor:ZhaoDan-pingAdvisor:ProfessorSongQin-yeMajor:PreventiveVeterinaryMedicineAbstractPorcinecircovimstype2(PCV2)cancausein

6、fectedpigletsimmunosuppressionandreduceimmuneeffectofvaccine.Nowinourcountry,vaccinationisthemainmeasuretopreventCSF.Butimmunefailureofclassicalswinefever(CSF)isoftenseenclinically,whichbecomesoneofthetroublesomefactorsagainstCSFprevention.Inthisstudy,humoralandcellularimmuneresponse,contentsofNKcel

7、lsandT-eellsubpopulations,andmRNAlevelsofcytokinesinperipheralbloodlymphocytes(PBLC)ofthepigletsinfectedwithPCV2beforeoraftervaccinationwithCSFvaccinewereanalysedtorevealthemechanismofporcinecircovirustype2infectioninfluencingimmuneresponsesofclassicalswinefeverattenuatedvaccine.Twenty28-day-oldheal

8、thyweaningpigletswererandomlydividedintofourgroupswhichwereGroupV-I,I—V,VandC,fivepigletspergroup.ThepigletsinGroupV-1wereintramuscularlyinjectedwimCSFvaccinetwodaysbeforebeinginoculatedwithPCV2.Group

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