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《毒害艾美耳球蟲與柔嫩艾美耳球蟲雞胚傳代研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文毒害艾美耳球蟲與柔嫩艾美耳球蟲雞胚傳代研究姓名:樊玉娟申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:黃兵;岳城20090401毒害艾美耳球蟲與柔嫩艾美耳球蟲雞胚傳代研究摘要雞球蟲病是由艾美耳球蟲寄生于雞腸道所引起的一種危害嚴重的全球性寄生蟲病,每年給養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。球蟲體外培養(yǎng)模型的建立對深入研究球蟲學(xué)及球蟲病學(xué)具有重要的意義和作用,包括:診斷、抗原抗體產(chǎn)生、評估寄生蟲免疫模型的性能、藥物篩選、改進生化療法、。臨床分離株的鑒別分類、疫苗生產(chǎn)、尋找致弱蟲株,以及提供研究寄生蟲與宿主相互作用的活蟲體等,并為基因工程疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。本研究首
2、先利用傳統(tǒng)生物學(xué)方法對實驗所選的毒害艾美耳球蟲(Eimerianecatrix)蟲株進行鑒定。進行了毒害艾美耳球蟲雞胚傳代條件的研究,探索柔嫩艾美耳球蟲(Eimeriatenella)雞胚培養(yǎng)條件及建立柔嫩艾美耳球蟲雞胚適應(yīng)株。收集純化毒害艾美耳球蟲及柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊,通過接種不同日齡雞胚、不同劑量、添加營養(yǎng)素等試驗來探索球蟲雞胚培養(yǎng)的最適環(huán)境,結(jié)果證明,9曰齡組為毒害艾美耳球蟲最佳接種日齡,平均卵囊產(chǎn)量(每只胚卵囊數(shù))為2.0×104個卵囊,成熟率為82.4%,而柔嫩艾美耳球蟲最佳接種日齡為lO日齡;接種量均為0.1x104個子孢子組的平均卵囊產(chǎn)量為O.03×
3、103,成熟率約為O,證明此劑量難以使雞胚獲得感染;且lX104個子孢子劑量組,成熟率高達99%,為最佳接種劑量;胰島素和葉酸均有促進卵囊在雞胚中發(fā)育的作用,且胰島素最佳添加量為1000U/mL,葉酸的最佳接種量為O.05mg/mL;對比柔嫩艾美耳球蟲接種SPF雞胚與普通雞胚卵囊產(chǎn)量,結(jié)果表明無明顯差異,普通雞胚平均卵囊產(chǎn)量略高于SPF雞胚。利用以上探索條件成功地構(gòu)建了毒害艾美耳球蟲與柔嫩艾美耳球蟲雞胚培養(yǎng)體系、建立柔嫩艾美耳球蟲雞胚適應(yīng)株,并對雞體傳代株和雞胚適應(yīng)株進行生物學(xué)特性比較,得出雞胚適應(yīng)株具有保持良好免疫原性和致病性降低的優(yōu)點。對柔嫩艾美耳球蟲雞胚適應(yīng)株進行
4、內(nèi)生性發(fā)育史研究,成功地觀察到了三代無性生殖和兩代有性生殖的全部發(fā)育階段。本研究成功探索了毒害艾美耳球蟲雞胚傳代的條件,成功構(gòu)建了柔嫩艾美耳球蟲雞胚培養(yǎng)模型,建立了一株柔嫩艾美耳球蟲雞胚適應(yīng)株。對柔嫩艾美耳球蟲雞胚適應(yīng)株進行了內(nèi)生性發(fā)育史研究,并對柔嫩艾美耳球蟲雞胚適應(yīng)株和雞體傳代株進行生物學(xué)特性比較。研究結(jié)果為雞球蟲體外培養(yǎng)及基因工程疫苗的研制篩選奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:毒害艾美耳球蟲;柔嫩艾美耳球蟲;雞胚;傳代;內(nèi)生性發(fā)育史ResearchofEimerianecatrixandSubculturedinAvianEmbryoAbstractAviancoccidios
5、isisthemajorparasiticdiseaseofpoultryinfectedbyEimeriaspp.Itinflictssevereeconomiclossesonthepoultryindustry.Thein—depthstudyofinvitromodelplacedagreatimportanceroleofthecoccidiaandcoccidiosisstudies,include:diagnosis,antigenantibodytoevaluatetheperformanceofparasiteimmunemodel,drugscree
6、ning,improvedchemicalandbiologicaltherapies,theidentificationofclinicalisolatesofclassification,vaccineproduction,lookingfortheweakstrain,asweilasresearchtheinteractionbetweenparasitesandhosts,suchasthelivingbody,forthegeneticengineeringvaccinefoundation.·Inthisstudy,theuseoftraditionaJb
7、iologicalmethodsfirsttheexperimentalpoisoningofselectedEimerianecatrixstrainsandidentificationofinsects.includingthepotentialperiodofparasiticparts。sporesoftheshortesttime,theshapeofoocysts,oocystsize.SeparationtechniqueusingasingleoocystisolatedpurestrainsandbyPCRidentif