ⅰ型鴨肝炎病毒vp1蛋白優(yōu)勢抗原區(qū)鑒定及間接elisa方法建立論文

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1、—————』二J螋炒I-.緲L魯量量量甍量量量量量奠篁董量邕曼曼曼曼量曼鼉舅量量皇曼皇皇量置魯魯-‘刁口,a罾目錄中文摘要??????????????????????????????????.I英文摘要??????????????????????????????????IIIl前言?????????????????????????????????????????????.11.1鴨病毒性肝炎概述???????????????????????????..11.1.1流行病學??????????????????????????????11.1.2發(fā)病機理??

2、???????????????????????????..11.1.3臨床癥狀?????????????????????????????..21.1.4病理變化?????????????????????????????..21.2DHV-I的流行及分布??????????????????????????..21.3DHV-I的分類地位???????????????????????????31.4DHV-I病原學特性???????????????????????????..31.4.1病毒的形態(tài)???????????????????????????????

3、31.4.2病毒的致病力????????????????????????????31.4..3病毒的理化性質(zhì)???????????????????????????41.5DHV-1分子生物學特性?????????????????????????.41.6診斷方法???????????????????????????????51.6·.1病毒的分離與鑒定??????????????????????????51.6·.2血清中和試驗????????????????????????????61.6.3酶聯(lián)免疫吸附試驗??????????????????????

4、????61.61.4瓊脂免疫擴散試驗??????????????????????????71.6·.5間接血凝(IHA)???????????????????????????.81.6.6直接熒光抗體檢測(FA)????????????????????????81.6.7膠體金法(DIGFA)?????????????????????????81.61.8分子生物學診斷技術?????????????????????????91.7研究的目的和意義????????????????????????????92材料與方法???????????????????

5、????????????..102.1試驗材料??????????????????????????????。102.1.1質(zhì)粒、載體????????????????????????????102.1.2病毒、菌種、血清?????????_????????????????102.1.3主要酶類及試劑??????????????????????????.102.1.4主要試驗儀器設備?????????????????????????102.2試驗方法??????????????????????????????。ll2.2.1原核表達載體pET-32.VPlⅣ

6、P1.A~e的構建???????????????112.2.2目的蛋白的誘導表達及鑒定?????????????????????..15I東北農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學碩士學位論文2.2.3間接ELISA檢測方法的標準化????????????????????.172.2.4DHV抗體間接ELISA臨界值的確定及陽性結果的判定標準????????..192.2.5特異性試驗????????????????????????????192.2.6重復性試驗????????????????????????????192.2.7最低檢出量的測定????????????????

7、?????????192.2.8間接ELISA方法與血清中和試驗的比較????????????????。192.2.9間接ELISA方法檢測人工感染樣本的初步應用?????????????。203結果?????????????????????????????????????????????。2l3.1VPl蛋白的分段表達、純化與抗原性分析?????????????????。213.1.1VPl蛋白軟件分析結果???????????????????????2l3.1.2VPl/VPl.a(chǎn)~e基因的PCR擴增結果??????????????????。213.

8、1.3表達載體pET032a.VPl/VPl.a(chǎn)~e的構建???????????

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